[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素β亚基的制备方法

摘要

本发明属生物制药领域，涉及一种人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCGβ)的高效制备方法。采用真核表达载体，构建含有6his纯化标签的和人绒毛膜促性腺激素β亚基的真核表达载体，用哺乳动物表达系统作为表达宿主，在体外表达、鉴定、纯化获得稳定、高效正确表达的人绒毛膜促性腺激素β亚基蛋白，本发明在有生物活性的hCGβ来源方面极富价值，获得的hCGβ可作为生物药品开发，亦可作为免疫原免疫动物制备单克隆、多克隆抗体，从根本上解决hCGβ来源短缺的问题。

主权项

1.一种人绒毛膜促性腺激素β亚基的制备方法，其特征是采用真核表达载体，构建含有6his纯化标签的和人绒毛膜促性腺激素β亚基的真核表达载体，用哺乳动物表达系统作为表达宿主，在体外表达、鉴定、纯化获得人绒毛膜促性腺激素β亚基蛋白，通过下述步骤：1)构建分泌型真核表达载体pCI-gs-signal-6His-hCGβ；2)重组质粒转染宿主细胞；3)转染宿主细胞培养及高表达克隆的筛选；4)收集、浓缩培养细胞上清；5)Western blotting鉴定表达产物；6)目的蛋白含量的分离纯化。