[发明专利]一种载脂蛋白A-I的制备方法无效
申请号: | 200610029114.4 | 申请日: | 2006-07-19 |
公开(公告)号: | CN101108874A | 公开(公告)日: | 2008-01-23 |
发明(设计)人: | 吴满平;廖雪玲 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/30;C07K14/775 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明属生化药物制药领域,涉及载脂蛋白A-I的制备方法,具体涉及一种从废弃的人血浆F-IV组分分离制备载脂蛋白A-I(ApoA-I)的方法。本发明利用废弃人血浆F-IV组分经等电点沉淀、氯仿、乙醇处理获得纯度98%和按血浆F-IV ApoA-I含量计算收率高达23.5%,并保持天然ApoA-I生物活性的载脂蛋白A-I,每克湿重F-IV可制备3.1mg纯化ApoA-I,本发明为开发ApoA-I药用价值奠定了良好基础。提供了一种适合工业化生产的人血浆ApoA-I制备方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 脂蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种载脂蛋白A-I的制备方法,其特征是包括下述步骤:①采用废弃的血浆F-IV组分为原料,采用含乙醇、NaHCO3液于-20℃搅拌抽提,离心取上清液,②上清液调pH5.5,离心收集沉淀,-4℃溶解于pH8.6的Tris-HCl-Urea溶液,③加等体积氯仿/乙醇液脱脂,-20℃静置,离心取上层液,④加等体积乙醇沉淀,-20℃静置,离心取上清液。⑤浓缩,经碳酸盐缓冲液透析,⑥巴氏灭菌,除菌过滤,⑦冻干,得ApoA-I干粉。
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