[发明专利]一种载脂蛋白A-I的制备方法无效
申请号: | 200610029114.4 | 申请日: | 2006-07-19 |
公开(公告)号: | CN101108874A | 公开(公告)日: | 2008-01-23 |
发明(设计)人: | 吴满平;廖雪玲 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/30;C07K14/775 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂蛋白 制备 方法 | ||
1.一种载脂蛋白A-I的制备方法,其特征是包括下述步骤:
①采用废弃的血浆F-IV组分为原料,采用含乙醇、NaHCO3液于-20℃搅拌抽提,离心取上清液,
②上清液调pH5.5,离心收集沉淀,-4℃溶解于pH8.6的Tris-HCl-Urea溶液,
③加等体积氯仿/乙醇液脱脂,-20℃静置,离心取上层液,
④加等体积乙醇沉淀,-20℃静置,离心取上清液。
⑤浓缩,经碳酸盐缓冲液透析,
⑥巴氏灭菌,除菌过滤,
⑦冻干,得ApoA-I干粉。
2.按权利要求1所述的载脂蛋白A-I的制备方法,其特征是所述步骤1的抽提,其中采用的乙醇、NaHCO3液是4倍体积的含pH7.365%乙醇-10mM NaHCO3液。
3.按权利要求1所述的载脂蛋白A-I的制备方法,其特征是所述步骤2的pH8.6的Tris-HCl-Urea溶液是pH8.6 100mMTris-HCl-6MUrea溶液。
4.按权利要求1所述的载脂蛋白A-I的制备方法,其特征是所述步骤3的氯仿/乙醇液其比为1∶1。
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