[发明专利]一种利迪链菌素发酵工艺

摘要

本发明公开了一种利迪链菌素发酵工艺，由如下步骤组成：(1)配制培养基；(2)发酵：将利迪链霉菌(Streptomycesluteogriseus)CGMCC 1692，经摇瓶种子培养基培养和种子培养后接入发酵培养基，在通气，搅拌下，25～35℃，在0～24小时，调节pH，发酵从24小时开始至终点，葡萄糖流加率为0.40～0.70g/l·h，硫酸铵0.002～0.005g/l·h，从36～72小时流加丙酸钠0.5～1mg/l·h，培养72～120小时；(3)经纯化得利迪链菌素，本发明确定了一种适合利迪链菌素大规模生产的新工艺，大幅度提高了利迪链菌素的生产水平，得到了预期的利迪链霉素纯品。

主权项

1.一种利迪链菌素发酵工艺，其特征是由如下步骤组成：(1)配制培养基：①摇瓶种子培养基的配制：取淀粉4～8g，葡萄糖5～15g，蛋白胨1～5g，Mg2SO4·7H2O0.3～1g，NaCl 0.3～1g，加水至100～300ml，分装于3个锥形瓶，灭菌；②种子培养基的配制：取淀粉20～60g，葡萄糖5～15g，黄豆饼粉6～15g，玉米浆3～10g，K2HPO4 0.2～0.7g，Mg2SO4·7H2O 0.3～0.8g，NaCl 0.3～0.8g，泡敌0.1～0.4g，加水至1.5L，调节pH为6.0～7.5，灭菌；③发酵培养基的配制：取淀粉300～900g，葡萄糖50～200g，黄豆饼粉150～250g，玉米浆30～90g，K2HPO4 4～8g，Mg2SO4·7H2O 8～12g，NaCl 8～12g，花生油2～10g，泡敌2～8g，加水至20L，调节pH为6.0～7.5，灭菌；(2)发酵：①摇瓶种子培养：将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC 1692接入摇瓶种子培养基中，25～35℃培养20～70小时，制得摇瓶种子液100～300ml；②种子培养：将制得的摇瓶种子液接入种子培养基中，在2L种子罐中，通气量2～6L/h，搅拌转速400～600rpm，25～35℃培养20～70小时，制得种子培养液；③发酵培养：将种子培养液接入装有10～28L无菌发酵培养基的30L发酵罐中，通气量1300～2000L/h，搅拌转速400～600rpm，25～35℃，在0～24小时，用浓氨水或NaOH水溶液调节8.0≥pH≥5.8；发酵从24小时开始至终点，连续流加质量比为30～50％的葡萄糖水溶液，纯葡萄糖流加率为0.40～0.70g/l·h，硫酸铵0.002～0.005g/l·h，用浓氨水或NaOH水溶液调节8.0≥pH≥6.50，从36～72小时流加丙酸钠0.5～1mg/l·h，培养72～120小时；(3)将发酵液过滤后，经纯化得利迪链菌素。