[发明专利]一种从大豆或豆粕中纯化制备抗肿瘤因子－组织蛋白酶B抑制因子的方法

摘要

本发明公开了一种从大豆或豆粕中纯化制备抗肿瘤因子－组织蛋白酶B抑制因子的方法，包括大豆或豆粕研磨、搅拌、沉淀、透析、排阻层析柱、离子交换柱分离、洗脱、分部收集等步骤；利用本发明的方法纯化制备的大豆组织蛋白酶B抑制因子对人宫颈癌细胞(Hela)和神经胶质瘤细胞(glioma)生长有显著抑制效果，为一步研究开发成为抗肿瘤药物或肿瘤预防药物或相关保健预防食品以及大豆产品精加工和原料的综合利用提供了新的途径。

主权项

1.一种从大豆或豆粕中纯化制备抗肿瘤因子-组织蛋白酶B抑制因子的方法，包括如下步骤：(1)取大豆或豆粕研磨成粉，使其颗粒直径为10μm～50μm，(2)溶入缓冲液中搅拌15小时～24小时，过滤去除沉淀，上清液经8,000rpm～14,000rpm离心8min～15min，50％硫酸铵沉淀，(3)将上述沉淀溶解在刚浸没量的缓冲液中，于10倍体积的缓冲液中透析18小时～24小时，(4)透析后的溶液经8,000rpm～14,000rpm离心8min～15min，(5)将步骤(4)的上清液缓慢加到用缓冲液平衡过的排阻层析柱上，用缓冲液分离并分部收集其中有抑制活性的部分，(6)将所述收集液缓慢加到用缓冲液平衡过的离子交换柱上，先用200ml缓冲液洗涤柱子以去除未结合的蛋白质，再用100ml缓冲液对100ml 0.5mol/L NaCl溶液作梯度洗脱，分部收集，得到组织蛋白酶B抑制因子。