[发明专利]对微囊藻毒素－LR进行化学修饰并合成完全抗原的方法

摘要

本发明涉及对微囊藻毒素－LR进行化学修饰并合成完全抗原的方法，属于免疫检测技术领域，包括对微囊藻毒素－LR的化学修饰和用戊二醛1步法合成完全抗原两部分；本方法选择第7位氨基酸Mdha作为连接位点，Mdha远离致毒基团Adda，因而抗体能够有效的识别出微囊藻毒素和节球藻毒素；而且远离两个可变的氨基酸，因而能够识别出微囊藻毒素的各种异构体，可提高微囊藻毒素－LR抗体的特异性。

主权项

1、一种对微囊藻毒素-LR分子进行化学修饰并合成完全抗原的方法，包括对微囊藻毒素-LR的化学修饰和用戊二醛1步法合成完全抗原两部分；所述对微囊藻毒素-LR的化学修饰方法的具体步骤如下：1)将2-巯基乙胺和MC-LR按照大摩尔比(1000～5000)∶1充分混和在pH＝8.0～10.0的碱性碳酸盐缓冲液中；混合均匀，在40℃～60℃反应1～2小时；2)反应完毕，降到室温，加入与2-巯基乙胺等摩尔的乙酸使反应停止，得到中间产物H2N-etMC-LR；3)采用固相萃取技术对该中间产物进行纯化；所述用戊二醛1步法合成完全抗原方法的具体步骤如下：4)将所获得的纯化后的中间产物溶于缓冲溶液中，使其在溶液中的浓度为0.1～1mg/mL；5)按中间产物∶戊二醛摩尔比为1∶(5～20)加入适量戊二醛，剧烈振摇，充分摇匀后，按中间产物∶BSA摩尔比10～15∶1加入BSA溶液，充分混合，反应12小时以上；6)反应完毕，混合物在PBS中透析24小时以上，得到微囊藻毒素-LR的完全抗原。