[发明专利]未变性天然鱼胶原的制备方法

摘要

本发明公开了一种未变性天然鱼胶原的制备方法。其特点是选取富含胶原蛋白的冷冻海产鱼皮或新鲜河鱼皮100重量份，用醚2－5重量份或与水以任意比例混合的非离子表面活性剂5－10重量份溶液中浸泡5－24小时，过滤，用0.1－4M EDTA溶液500－700重量份中搅拌处理24－48小时。过滤后的沉渣100重量份，加入蛋白酶10－20重量份，用酸调节pH＝2－4，于温度4－6℃搅拌1－3天，离心过滤得到的胶原溶液中加入0.5－5MNaCl盐析、反复处理3－5次，膜透析处理3次，得到浓度为0.5－2％的高纯度未变性天然鱼胶原蛋白液。用差热仪测得变性温度河鱼天然胶原为20－28℃、海产鱼天然胶原12－25℃，电泳法测得其含有α链、β链和γ链的分子量分别为10万、20万和30万。

主权项

1.未变性天然鱼胶原的制备方法，其特征在于：(1)原料的预处理选用富含胶原的冷冻海产鱼皮或新鲜河鱼皮，去鳞、去肉，切成0.2-2cm的小块100重量份，用醚2-5重量份，浸泡5-24小时或与水以任意比例混合的非离子表面活性剂5-10重量份浸泡5-24小时，过滤，加入0.1-4M EDTA溶液500-700重量份浸泡24-48小时，搅拌，过滤，所有操作的温度为4-6℃，所得沉渣作为以下提取原料备用。(2)未变性天然鱼胶原的提取将上述已预处理的原料100重量份，蛋白酶10-20重量份，用酸调节pH＝2-4，于温度4-6℃下缓慢搅拌1-3天，得到未变性天然鱼胶原蛋白液。(3)提取物的纯化将上述鱼胶原蛋白液，用16000-20000rpm高速离心机分离，除去滤渣，上层清液加入0.5-5M NaCl盐析，所得沉淀经离心分离后用0.1-2M乙酸溶解，如此反复盐析处理3-5次，再经膜透析处理3次，获得浓度为0.5-2％的高纯度未变性天然鱼胶原溶液。