[发明专利]用于鉴别活性氧类物质清除剂的方法和试剂盒无效
申请号: | 02807428.9 | 申请日: | 2002-02-05 |
公开(公告)号: | CN1500149A | 公开(公告)日: | 2004-05-26 |
发明(设计)人: | 潘申权 | 申请(专利权)人: | 潘申权 |
主分类号: | C12Q1/00 | 分类号: | C12Q1/00;C12N1/21 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 巫肖南;封新琴 |
地址: | 新加坡*** | 国省代码: | 新加坡;SG |
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摘要: | 本发明涉及用于测定细胞内H2O2水平的方法和试剂盒,用于测定供试化合物是否具有清除活性氧类物质(ROS)的能力。本发明的方法和诊断试剂盒采用含有启动子的细胞,该启动子可被ROS诱导,例如根癌土壤杆菌的H2O2诱导性KatA启动子,该启动子用于驱动报道基因的表达。报道基因的表达水平与细胞内ROS、具体为H2O2的水平有相互关系。在细胞暴露于供试化合物时,无论是细胞内还是细胞外,如果ROS诱导性报道基因表达水平降低了,那么这说明供试化合物是ROS清除剂。本发明的方法还可以用于选择新的或改进的ROS清除剂,该方法是在细胞中表达供试清除剂的文库,该细胞表达来自ROS诱导性启动子的报道基因,然后选择ROS诱导性报道基因表达水平降低的那些细胞。表达来自ROS诱导性启动子的报道基因的细胞可以具有经过基因修饰的背景,以降低它们的天然存在的ROS清除能力。 | ||
搜索关键词: | 用于 鉴别 活性氧 物质 清除 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
1、测定化合物除去ROS的能力的方法,包含:a)提供包含与报道基因可操作连接的ROS诱导性启动子的细胞,其中该报道基因与其可操作连接的启动子是异源的;b)使该细胞暴露于潜在能够除去ROS的化合物;c)在暴露于化合物时,测量细胞中ROS诱导性报道基因表达的变化;其中ROS诱导性报道蛋白表达的降低表明该化合物能够除去ROS。
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