[发明专利]一种绿色添加剂生物反应器及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 01129831.6 | 申请日： | 2001-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN1366048A | 公开（公告）日： | 2002-08-28 |
| 发明（设计）人： | 钟安清;秦智锋;储成才 | 申请（专利权）人： | 深圳市三方圆信息技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/12;C12N15/33;C12N15/63;C12N1/13;C12N15/70;C12N15/87 |
| 代理公司： | 深圳市中知专利代理有限公司 | 代理人： | 王雄杰 |
| 地址： | 518048 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种绿色添加剂生物反应器及其构建方法和应用,通过目的基因的同源性分析、目的基因的人工修饰、目的基因的人工合成、基因重组、重组质粒转化小球藻等过程构建了可生产具有生物活性的抗畜禽病毒蛋白和促生长因子的生物反应器,用此生产的畜禽饲料添加剂具有增强对营养物质的吸收、改善肠道消化功能、提高乳奶产生和提高畜禽的瘦肉比例,抵抗动物疫病的侵袭等功效,解决了常规添加剂的耐药性和药物残留等问题,具有工艺简单、操作方便、技术效果好和对动物促生长、抗病毒作用明显等优点,广泛适用于各类动物的促生长和抗病毒侵袭之用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 绿色 添加剂 生物反应器 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1、一种绿色添加剂生物反应器，其特征在于：反应器由小球藻、信号肽基因和免疫原性基因、目标基因及基因修饰后的小球藻表达的具有生物活性的产物组成，其中的信号肽基因和免疫原性基因为：GGATCCATGGGGAAGAACGGCAGCCTGTGCTGCTTCTCTCTGCTGCTGCTGCTGCTTCTCGCCGGGTTGGCGTCCATGAATAAAGTAAAATTTTATGTTTTATTTACGGCGTTACTATCCTCTCTATGTGCACACGGAGCTCCCGGGTATGCACATGGAACACCTCAAAATATTACTGATTTGTGTGCAGAATACCACAACACACAAATACATACGCTAAATGATAAGATATTTTCGTATACAGAATCTCTAGCTGGAAAAAGAGAGATGGCTATCATTACTTTTAAGAATGGTGCAACTTTTCAAGTAGAAGTACCAGGTAGTCAACATATAGATTCACAAAAAAAAGCGATTGAAAGGATGAAGGATACCCTGAGGATTGCATATCTTACTGAAGCTAAAGTCGAAAAGTTATGTGTATGGAATAATAAAACGCCTCATGCGATTGCCGCAATTAGTATGGCAAATTCTAGA其目标基因包括下列基因之一种：(1)促进动物生长基因PGH基因：ATCTAGAATGGCCTTCCCGGCCATGCCCCTGTCGAGCCTGTTCGCCAACGCCGTGCTGCGCGCCCAGCACCTGCACCAGCTGGCCGCCGACACGTACAAGGAGTTCGAGCGCGCCTACATCCCGGAGGGTCAGCGCTACTCGATCCAGAACGCCCAGGCCGCCTTCTGCTTCTCGGAGACGATCCCGGCGCCGACGGGTAAGGACGAGGCCCAGCAGAGGTCGGACGTGGAGCTGCTGCGCTTCTCGCTGCTGCTGATTCAGTCGTGGCTGGGGCCCTTCATCCGCTGAGTCGACA(2)促进动物生长的PEGF基因：TGGGGAAGAACGGCAGCCTGTGCTGCTTCTCTCTGCTGCTGCTGCTGCTTCTCGCCGGGTTGGCGTCCAACTCTTACTCTGAGTGCCCGCCGAGTCATGACGGGTACTGCCTTCACGGTGGTGTTTGTATGTACATTGAAGCTGTTGATTCTTACGCTTGCAACTGCGTTTTCGGTTACGTTGGTGAAAGATGCCAACATAGAGACCTTAAGTGGTGGGAACTTAGACATCATCATCATCATCAT(3)口蹄疫VP1抗原基因：ACCACCTCCACAGGTGAGTCGGCTGACCCTGTGACTGCCACTGTTGAGAACTACGGTGGTGAGACACAGGTCCAGAGACGCCAACACACGGATGTCTCGTTCATATTAGACAGATTTGTGAAAGTAACACCAAAAGACCAAATTAATGTGTTGGACCTGATGCAAACCCCTGCACACACTTTGGTAGGCGCGCTCCTCCGTACTGCCACCTACTACTTCGCAGACCTAGAAGTGGCAGTGAAACACGAGGGGAACCTTACCTGGGTCCCGAATGGGGCGCCCGAGACAGCGTTGGACAACACCACCAATCCAACGGCTTACCACAAGGCACCGCTCACCCGGCTTGCACTGCCTTACACGGCACCACACCGTGTCTTGGCTACTGTTTACAACGGGAACTGCAAGTATGGCGAGAGCCCCGTGACCAATGTGAGAGGTGACCTGCAAGTATTGGCTCAGAAGGCGGCAAGAACGCTGCCTACCTCCTTCAATTACGGCGCCATCAAAGCCACTCGGGTGACTGAACTGCTTTACCGCATGAAGAGGGCCGAAACATACTGCCCCCGGCCTCTTTTGGCTATTCACCCAAGCGAAGCTAGACACAAACAAAAGATTGTGGCGCCTGTGAAACAGCTTTTG(4)口蹄疫病毒抗原多肽链：TCTAGAACCAACAACGTCCGCGGTGACCTTCAGGTCCTCGCTCAGAAGGCCGAGCGCACCCTCCCACATCATAAGCAGCGGATCGTTGCCCCCGCAAAACAGCTCCTCACCAACAACGTCCGCGGTGACCTTCAGGTCCTCGCTCAGAAGGCCGAGCGCACCCTCCCATGAGTCGAC(5)猪传染性胃肠炎病毒人工修饰抗原基因：1tctagaaccatggctttcttgaagagtttcccattctacgctttcttgtgcttcggacaa61tacttcgtggctgtgactcacgcagacaacttcccatgctctaagttgaccaacaggacc121atcggtaatcaatggaacttgatcgagaccttcttgttgaactactcatctaggttgcca181ccaaactctgacgacgtgttgggtgactacttcccaactgtgcaaccttggttcaactgc241atcaggaacaactctaacgacttgtacgtgactttggagaacttgaaggctctctactgg301gactacgctactgagaacatcacctggaaccacaggcaaaggttgaacgtggtggtgaac361ggatacccatacagtatcacagtgacaacaacccgcaacttcaactctgctgagggtgct421attatctgcatttgcaagggaagtccaccaactaccaccaccgagtctagtttgacttgc481aactggggaagtgagtgcaggttgaaccacaagttccctatctgtccatctaactcagag541gcaaactgcggaaacatgctgtacggcttgcaatggttcgcagacgaggtggtggcttac601ttgcatggagctagttaccggattagtttcgagaaccaatggtctggcactgtgacattc661ggtgacatgcgggccacaacattggaggtggctggcacgttggtggacttgtggtggttc721aacccagtgtacgatgtcagttactacagggtgaacaacaagaacgggactaccgtggtg781agcaactgcactgaccaatgcgctagttacgtggctaacgtgttcactacacagccagga841ggattcatcccatcagactttagtttcaacaactggttcctcttgactaacagcagcact901ttggtgagtggtaagttggtgaccaagcagccgttgctcgttaactgcttgtggccagtc961ccaagcttcgaggaggcagcttctacattctgcttcgagggagctggcttcgaccaatgc1021aatggagctgtgctcaacaatactgtggacgtgattaggttcaacctcaacttcactaca1081aacgtgcaatcagggaagggtgccacagtgttctcattgaacacaaccggtggagtcact1141ctcgagatttcatgctacacagtgagtgactcgagcttcttcagttacggagagattccg1201ttcggcgtgactgacggaccacggtactgctacgtgcactacaacggcacagctctcaag1261tacctcggaacactcccacctagtgtgaaggagattgctatcagtaagtggggccacttc1321tacattaacggttacaacttcttcagcacattcccaattgactgcatctcattcaacttg1381accactggtgacagtgacgtgttctggacaatcgcttacacaagctacactgaggcactc1441gtgcaagttgagaacacagctattacaaaggtgacgtactgcaacagtcacgttaacaac1501attaagtgctctcaaattactgctaacttgaacaacggattctaccctgtttcttcaagt1561gaggttggactcgtgaacaagagtgttgtgctcctcccaagcttctacacacacaccatt1621gtgaacatcactattgggctcggaatgaagcgtagtgggtacgggcaaccaatcgcctca1681acattgagtaacatcacattgccaatgcaggaccacaacaccgatgtgtactgcattcgg1741tctgaccaattctcagtttacgtgcattctacttgcaagagtgctttgtgggacaatatt1801ttcaagcgaaactgcacggaccaccaccatcaccatcactaaccgcggtggagctc(6)猪呼吸与生殖综合症病毒抗原基因：Atgttggggaaatgcttgaccacgggctgttgctcgcgattgctttctttgtggtgtatcgtgccgttctgttttgctgtgctcgtcaacgccaacagcaacagcagctctcattttcagttgatttataacttgacgctatgtgagctgaatggcacagattggctggctaacaaatttgactgggcagtggagacttttgtcatctttcccgtgttgactcacattgtttcctatggggcactcaccaccagccatttccttgacacagttggtctggtcactgtgtccaccgccgggttttatcacgggcggtatgtcttgagtagcatctacgcggtctgtgctctggctgcgttgatttgcttcgtcattaggcttgcgaagaactgcatgtcctggcgctactcttgtaccagatataccaacttccttctggacactaagggcagactctatcgttggcggtcgcccgttattgtagagaaagggggtaaggttgaggtcgagggtcacctgatcgacctcaaaagagttgtgcttgatggttccgtggcaacccctttaaccagagtttcagcggaacaatggggtcgtctctag(7)禽流感病毒的主要免疫原性蛋白基因即HA基因：ttgaattcttgaattcatggaaagaacagtgcttcttcttgcaacagtcagtcttgttaaaagtgatcagatttgcattggttaccatgcaaacaactcgacagagcaggttgacacaataatggaaaagaatgttactgttacacatgcccaagacatactggaaaggacacacaacgggaagctctgcgatctaaatggagtgaagcctctcattttgagggattgtagtgtagctggatggctcctcggaaaccctatgtgtgacgaattcatcaatgtgccggaatggtcttacatagtggagaaggccagtccagccaatgacctctgttatccagggaatttcaacgactatgaagaactgaaacaccta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