[发明专利]一种纯化鲀毒素的方法无效
申请号: | 01114201.4 | 申请日: | 2001-05-15 |
公开(公告)号: | CN1162433C | 公开(公告)日: | 2004-08-18 |
发明(设计)人: | 金传荫;刘永定;宋立荣;朱家明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院水生生物研究所 |
主分类号: | C07D491/20 | 分类号: | C07D491/20 |
代理公司: | 武汉科宏专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 43007*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种纯化鲀毒素的方法。首先是离子交换层析,使用弱酸性阳离子交换树脂柱,转换成铵型或氢型,将经过澄清的鲀毒素粗提液上柱,以0.1-2N浓度的乙酸一步或分步洗脱,或使用乙酸梯度洗脱,收集含鲀毒素的洗脱液,减压蒸发至干,然后重溶于乙酸中;其次是凝胶过滤层析,将第一步所得液上柱,用乙酸洗脱,收集含鲀毒素的洗脱液,减压蒸发至干,得纯鲀毒素的乙酸盐固体。将上述固体溶于所需盐的相应酸中,蒸干后得所需盐。溶于苦味酸中,制成苦味酸盐,水溶后用NH4OH沉淀,即获得极纯粹的毒素。该方法简单,操作方便,所得纯鲀毒素的纯度符合药用剂型的需要,又能生产色谱试剂。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯化 毒素 方法 | ||
【主权项】:
1、一种纯化鲀毒素的方法,其步骤是:A、离子交换层析,使用弱酸性阳离子交换树脂柱,转换成铵型或氢型,将pH调整为4.0-6.5,将澄清的鲀毒素粗提液上柱,先以纯水或缓冲液或低于0.4N浓度的乙酸溶液洗柱,再以0.1-2N浓度的乙酸一步或分步洗脱,或使用0.01-2.5N乙酸梯度洗脱,收集含鲀毒素的洗脱液,减压蒸发至干,然后溶于0.01-0.15N乙酸中;B、凝胶过滤层析,选用排阻分子量在1500-4000Da,充填大柱的凝胶装柱,将第一步所得鲀毒素的乙酸溶液上柱,用0.01-0.15N乙酸洗脱,收集含鲀毒素的洗脱液,得纯鲀毒素的乙酸盐溶液,减压蒸发至干,得纯鲀毒素的乙酸盐固体。
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