[发明专利]一种构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌的方法无效
| 申请号： | 00115955.0 | 申请日： | 2000-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN1337466A | 公开（公告）日： | 2002-02-27 |
| 发明（设计）人： | 喻子牛;刘子铎;孙明;邵宗泽;徐世瑾;江昊;郑嵘 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;A01N63/00 |
| 代理公司： | 北京农林水专利代理有限公司 | 代理人： | 张红兵 |
| 地址： | 430070 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于微生物杀虫农药技术领域,具体涉及一种构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌的方法,其特点是,利用PCR技术从苏云金芽胞以色列亚种中克隆p19,p20两个辅助蛋白基因,通过基因工程方法构建具有特异毒力的工程菌,与已有技术相比,本发明提高了苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的表达量,促进了晶体的形成,提高了杀虫效率,降低了生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 苏云金芽胞 杆菌 杀虫 工程 方法 | ||
【主权项】：
1、一种构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌的方法，其过程包括PCR，其特征在于所述的步骤包括：1)从苏云金芽胞杆菌以色列亚种中克隆出p19、p20两个与野生型菌株的基因型一致的辅助蛋白基因；2)将辅助基因进行限制性内切酶酶切，并连接到适当的载体上，使辅助基因能够在苏云金芽胞杆菌中正常表达；3)将含p19、p20的穿梭质粒分别电转化入野生型菌株；4)通过质粒图谱、PCR、DNA-DNA杂交和聚丙烯酰氨凝胶电泳筛选、鉴定转化子；5)通过摇瓶培养、生物测定筛选发酵性能优良、毒力高的转化子。
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