本发明属于基因检测领域，涉及荧光生物分析，特别是指基于滚环信号放大的Pax‑5a基因检测试剂盒及其使用方法。该试剂盒包括Pad‑lock、A1链、A2链、A3链、AP链、缓冲液体系、T4连接酶、Phi29 DNA聚合酶和dNTPs，其中Pad‑lock序列如SEQ ID No.1所示、A1链序列如SEQ ID No.2所示、A2链序列如SEQ ID No.3所示、A3链序列如SEQ ID No.4所示、AP链序列如SEQ ID No.5所示。本申请的试剂盒操作非常简便，过程时间短，仅需5个小时；在检测范围内展现出极佳的稳定性；该试剂盒检测线低至3.33pM，具有较高的灵敏度。
本发明属于分子生物学领域，涉及基于磁珠和靶向无酶双扩增检测miRNA Let‑7a的试剂盒及其应用。包括以下DNA序列：其中A1序列如SEQ ID No.1所示、A2序列如SEQ ID No.2所示、A3序列如SEQ ID No.3所示、AP序列如SEQ ID No.4所示、H1序列如SEQ ID No.5所示、H2序列如SEQ ID No.6所示、F序列如SEQ ID No.7所示、Q序列如SEQ ID No.8所示，磁珠混合液以及PBS缓冲液和BSA溶液。采取无酶手段，避免了酶反应带来的长时间和复杂实验步骤，同时避免了酶蛋白等对实验结果的干扰，使得过程更加方便快速。
本发明属于分子生物学领域领域，涉及miRNA Let‑7a的检测，特别是指一种基于磁珠和氧化石墨烯的辅助作用检测miRNA Let‑7a的试剂盒及其应用。包括以下核苷酸链：A1链、A2链、A3链、AP链和荧光链，磁珠混合液，PBS缓冲液，BSA缓冲液和Cutsmart缓冲液；其中A1链序列如SEQ ID No.1所示、A2链序列如SEQ ID No.2所示、A3链序列如SEQ ID No.3所示、AP链序列如SEQ ID No.4所示、荧光链序列如SEQ ID No.5所示，其3’端修饰有FAM基团。本方法基于磁珠和氧化石墨烯辅助下的无酶放大策略的传感系统机制，可以实现对目标基因高灵敏和高选择性检测。
本发明属于分子生物学领域，特别是指基于核酸外切酶Ⅲ的功能化发夹探针、组合物及提高检测Pax‑5a基因灵敏度的方法。所述功能化发夹探针序列如SEQ ID No.1所示，该功能化发夹探针包括G‑四链体片段和3’凹陷末端区域。包含功能化发夹探针的检测组合物，还包括引物、DNA聚合酶、核酸外切酶Ⅲ和氯化血红素溶液。本发明的发夹探针引入了G‑四链体序列；同时形成了3’凹陷末端，便于核酸外切酶Ⅲ的剪切，降低了背景信号的干扰；并且设计的发夹探针是能够识别目的基因的多功能实体；通过引物和DNA聚合酶的作用，实现了目标基因的循环利用，放大了检测信号，降低了检测下限，使得最低检测限达60.1 fM。
