本发明公开了一种副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗及其生产方法和应用,本发明的副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗,含有经甲醛溶液灭活的副猪嗜血杆菌4型H4L1株、5型H5L3株和12型H12L3株及水基免疫佐剂,其中,所述副猪嗜血杆菌4型H4L1株、5型H5L3株和12型H12L3株均于2018年01月11日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号分别为:CCTCC M 2018019,CCTCC M 2018020,CCTCC M 2018021。本发明的三价灭活疫苗用于预防4、5和12型副猪嗜血杆菌引起的副猪嗜血杆菌病,并且此疫苗具有安全性好、免疫效力高且免疫期长等优点。