本发明公开了一种HPV检测试剂盒,所述试剂盒为特异性检测HPV16/18型L1蛋白抗体的试剂盒,所述试剂盒包括有效量的HPV16型L1蛋白、HPV18型L1蛋白;有效量的抗HPV16型L1蛋白的单克隆抗体;有效量的抗HPV18型L1蛋白的单克隆抗体;有效量的HPV16型L1蛋白、HPV18型L1蛋白的兔多抗和配套的检测试剂。所述的抗HPV16型L1蛋白的单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID.NO.2所示。所述的抗HPV18型L1蛋白的单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的序列如SEQ ID NO.3和SEQID.NO.4所示。本发明建立的HPV16型或HPV18型阻断ELISA检测试剂盒,该试剂盒具有良好的特异性和敏感性,在只换用酶标抗体的情况下实现HPV16型和HPV18型抗体的分型检测,可应用于HPV疫苗免疫后评价或HPV感染筛查。