本发明属于油菜遗传育种和基因工程技术领域，公开了甘蓝型油菜BnaA07.Douf‑1基因在创制重花瓣油菜种质中的应用。申请人精细定位并克隆了BnaA07.Douf‑1基因，其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO.2所示。将该基因转入重瓣甘蓝型油菜株系375中表达，可使花瓣数目由10‑15枚减少到4枚，在单瓣甘蓝型油菜B409和Westar中敲除该基因及其同源基因BnaC07.Douf‑1，会使油菜花瓣数目由4枚增加到5‑9枚。本发明克隆的甘蓝型油菜花瓣数目基因BnaA07.Douf‑1能够通过在油菜中定向敲除该基因及其同源基因而创制不同花型的甘蓝型油菜，应用于选育具高观赏价值的重花瓣油菜新品种，为观赏性油菜新品种的突破提供新种质和基因资源。
本发明公开了一种新的自交不亲和油菜种质的创制方法，涉及植物基因工程技术领域。本方法主要是：①在隐性亲和系油菜基因组中鉴定出2个SMI2的同源序列：分别命名为BnS6‑SMI2和BnS7‑SMI2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；②根据BnS6‑SMI2基因的特异序列设计基于CRISSPR/Cas9的三个sgRNA，sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。本发明证明BnS6‑SMI2调控自交不亲和性，并利用CRISPR/Cas9创造了不同突变类型的株系；其自交后代表现明显的自交不亲和表型，为甘蓝型油菜自交不亲和杂交育种提供了新的种质资源，同时在油菜分子设计育种中具有广阔的应用前景。
本发明属于植物生物技术领域，与植物组织特异启动子的分离和应用有关，具体涉及一种油菜组织特异性启动子在调控目的基因在植物花药中表达的应用。发明人将该启动子及其截短的片段融合报告基因并转化拟南芥，GUS染色发现它们能驱动报告基因在花药中特异表达，它们的序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；进一步截短后获得具有花粉特异表达的SEQ ID NO.5所示的启动子片段。本发明进一步公开了所述组织特异启动子或截短后的启动子片段为控制植物育性提供了新的有效调控元件，对基因工程育种具有很好的应用前景。
