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[发明专利]一种PET降解工程菌的构建及应用-CN202310959605.2在审
发明人： 颜正飞;吴敬;徐翰;冯楚淇 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种PET降解工程菌的构建及应用，属于微生物工程技术领域。本发明提供了PET降解酶组成型分泌表达单元、表达PET降解酶的质粒及底盘微生物科恩氏菌。本发明提供的分泌表达单元可实现PET降解酶在底盘微生物科恩氏菌中的分泌表达，使重组科恩氏菌在高温培养过程中实现PET的降解，为PET高效生物降解提供了新方法，具有广阔的应用前景。
一种 pet 降解工程构建应用

[发明专利]一种聚酯降解酶突变体及其在聚酯塑料降解中的应用-CN202310791375.3在审
发明人：夏伟;吴敬;王慧;薛苗苗;陈晟;颜正飞 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-30 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种聚酯降解酶突变体及其在聚酯塑料降解中的应用，属于环境科学领域。本发明通过对ICCG的底物结合位点附近第59位、第192位、第217位、第218位氨基酸进行单点或多点突变，构建得到的突变体对降解PBAT和PET的效率有了显著提升，对PET的降解率达59.17％以上，对PBAT的降解率达47％以上，具有巨大的工业应用前景。
一种聚酯降解突变体及其塑料中的应用

[发明专利]一种高效降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的角质酶突变体及应用-CN202210027510.2有效
发明人：吴敬;颜正飞;陈晓倩;王蕾 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-01-11 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的角质酶突变体及应用，属于环境科学领域。本发明通过对来源于Thermobifida fusca来源角质酶TfC进行改造得到一系列突变体，所述突变体是在所述TfC的底物结合位点附近发生单点或多点突变，对其第65位、第92位、第184位、第209位、第213位发生突变，构建得到9种突变体。与野生型TfC相比，本发明所述9种TfC的突变体(M1‑M9)在酶活、60℃下的半衰期有显著提升，并对降解PET的效率有了显著提升，具有良好的工业前景。
一种高效降解对苯二甲酸乙二醇角质突变体应用

[发明专利]一种提高PET降解酶表达量的方法-CN202310651316.6在审
发明人：吴敬;颜正飞;陈晓倩;徐翰 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-02 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高PET降解酶表达量的方法，属于蛋白质工程和发酵工程技术领域。本发明所述方法涉及一种产酶促进剂胞二磷胆碱，具体步骤如下：含PET水解酶表达质粒的重组菌在发酵产酶过程中添加0.01～1mM胞二磷胆碱，其产酶量得到极大的提升。本发明为PET降解酶的高产提供一个有效的策略，操作工艺简单，且成本较低，效果显著，为工业化制备奠定了基础。
一种提高 pet 降解表达方法

[发明专利]一种芳香味鳕鱼肽的制备方法-CN202310910023.5在审
发明人： 颜正飞;吴敬;宿玲恰;袁帅 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-07-21 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种芳香味鳕鱼肽的制备方法，属于微生物领域。本发明中将鳕鱼肽高温灭菌，取上清液冷冻干燥后溶于蒸馏水，制成200g/L的鳕鱼肽溶液，将2.5％嗜酸乳杆菌重悬液接种至鳕鱼肽溶液中，经发酵后，可以实现在有效去除鳕鱼肽的腥味的同时，提升了鳕鱼肽原本的活性物质，提高了鳕鱼肽抗氧化、持油能力等功能性作用。与未去腥的鳕鱼肽相比，本发明所得芳香味鳕鱼肽主要的腥味物质庚醛、壬醛、辛醛、4‑乙基苯酚、二甲基二硫醚和二甲基三硫的含量降低了68.8％、100％、81.59％、100％、100％、100％。芳香味鳕鱼肽的DPPH·、·OH、ABTS+·、O2‑·自由基清除率与持油能力超70％。
一种芳香鳕鱼制备方法

[发明专利]一种PET水解酶的高通量筛选方法和应用-CN202310631018.0在审
发明人：吴敬;颜正飞;徐翰;陈晓倩;冯楚淇 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-05-31 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12Q1/44 文献下载
摘要：本发明公开了一种PET水解酶的高通量筛选方法和应用，属于检测技术领域。本发明提供的高通量筛选方法以卵黄磷脂作为培养基的筛选指示剂，基于水解圈直径差异表征聚对苯二甲酸乙二醇酯水解酶活性。本发明提供的高通量筛选方法，操作方便，通量高，成本低廉，周期短，正向突变体获得率高，可将筛选周期缩短至24h，为筛选高效的塑料降解酶提供了新方法，具有广阔的应用前景。
一种 pet 水解通量筛选方法应用

[发明专利]菌酶联合体及其在聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料降解中的应用-CN202210739841.9有效
发明人： 颜正飞;周剑桥;李娟;吴敬 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-06-27 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了菌酶联合体及其在聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料降解中的应用，属于塑料垃圾生物降解技术领域。本发明通过筛选得到的科恩氏菌JQ‑3，并将科恩氏菌应用于对苯二甲酸乙二醇酯及聚对苯二甲酸乙二醇酯中间体的降解中；并进一步将科恩氏菌JQ‑3与PET降解酶ICCG组成高温型菌酶联合体，可实现高温条件下高效降解聚对苯二甲酸乙二醇酯及聚对苯二甲酸乙二醇酯中间体，其降解能力远优于采用菌或酶单独处理，该菌酶混合体表现出很好的协同降解效应，且能够实现对PET制品及PET中间体BHET、MHET等的完全降解，对TPA也有较好的降解效果。本发明处理工艺简单、处理成本低，在塑料降解技术领域具有较好地推广应用价值。
联合体及其对苯二甲酸乙二醇塑料降解中的应用

[发明专利]角质酶突变体及其在聚对苯二甲酸乙二醇酯降解中的应用-CN202210755217.8有效
发明人：吴敬;颜正飞;陈晓倩;王蕾 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-06-29 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明公开了角质酶突变体及其在聚对苯二甲酸乙二醇酯降解中的应用，属于环境科学领域。本发明通过对来源于细菌HR29的BhrPETase进行了单点或多点突变，对第93位、第122位、第174位、第184位、第194位、第207位、第209位、第213位中的至少一处氨基酸进行了突变，构建得到了11种突变体。与野生型BhrPETase相比，本发明构建11种BhrPETase的突变体在酶活、60℃下的半衰期有显著提升，并对降解PET的效率明显提高，具有良好的工业前景。
角质突变体及其对苯二甲酸乙二醇降解中的应用

[发明专利]一种过氧化物及角质酶联合处理聚乙烯的方法-CN202210027522.5有效
发明人：吴敬;王蕾;孔德民;宿玲恰;颜正飞;陈晓倩 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-01-11 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12P5/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种过氧化物及角质酶联合处理聚乙烯的方法，属于环境科学、材料学及酶工程领域。本发明提供了间氯过氧苯甲酸和角质酶联合处理聚乙烯的新方法，并通过优化LDPE与mCPBA的比例，优化酶解反应时间，可使处理后的聚乙烯重均分子量由最初的210000Da降低至3862Da，为聚乙烯的生物降解提供了新的思路。
一种过氧化物角质联合处理聚乙烯方法

[发明专利]一种聚对苯二甲酸乙二醇酯的改性方法及其在酶解过程中的应用-CN202111011880.9有效
发明人：吴敬;颜正飞;金昶序;陈晓倩 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： C08L67/02 文献下载
摘要：本发明涉一种聚对苯二甲酸乙二醇酯的改性方法及其在酶解过程中的应用，属于环境修复领域。本发明将聚对苯二甲酸乙二醇酯与聚己内酯采用熔融共混法，获得改性聚对苯二甲酸乙二醇酯膜，使改性后的聚对苯二甲酸乙二醇酯膜在结晶度、亲水角等方面呈现不同程度的改善，使膜表面更加疏松，空洞明显增多。将改性处理后的聚对苯二甲酸乙二醇酯膜在65℃、150rpm恒温水浴摇床中加入ICCG酶反应96h，能够完全降解改性聚对苯二甲酸乙二醇酯。本发明提供的方法工艺步骤少、效率高，易实现工业化生产，在降解高结晶度聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料中具备极高的应用前景。
一种对苯二甲酸乙二醇改性方法及其过程中的应用

[发明专利]一种蛋白酶筛选底物及其制备方法和应用-CN202010196390.X有效
发明人：吴敬;颜正飞;秦琴;唐诚业 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-03-19 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋白酶筛选底物及其制备方法和应用，属于检测技术领域。本发明提供了一种测定蛋白酶酶活的方法，利用此方法检测蛋白酶的酶活时，仅需将待测样品与蛋白酶筛选底物混合后观察混合液的颜色变化和颜色变化的响应时间即可，操作简单。本发明提供了一种测定蛋白酶酶活的方法，此方法以大米蛋白为底物，因此，利用此方法可准确的测定出蛋白酶对大米蛋白的酶活，在筛选得到更多对大米蛋白酶活高的蛋白酶方面具有极高的应用前景。
一种蛋白酶筛选及其制备方法应用

[发明专利]一种蛋白水解酶及其在蛋白肽生产中的应用-CN202010093059.5有效
发明人：吴敬;颜正飞;秦琴 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-02-14 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋白水解酶及其在蛋白肽生产中的应用，属于微生物技术领域以及发酵技术领域。本发明提供了一种来源于暗灰链霉菌(Streptomyces canus)T20的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白水解酶，此蛋白水解酶酶解蛋白的能力强，将此蛋白水解酶以2400U/g蛋白的添加量加入大米蛋白浓度为10g/L的大米蛋白分散液中进行酶解，仅需酶解2h，即可使酶解上清液中小分子肽的含量高达74.81％。
一种蛋白水解及其生产中的应用

[发明专利]一种含有嗜麦芽寡养单胞菌的菌酶混合制剂及其应用-CN202010635189.7有效
发明人：吴敬;颜正飞;陈晓倩;黄青松;顾冷涛 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-07-03 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种含有嗜麦芽寡养单胞菌的菌酶混合制剂及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供了一种全新的降解聚对苯二甲酸乙二醇酯及聚对苯二甲酸乙二醇酯中间体的方法，通过将特定菌株和特定生物酶类组合，制备了具有特定降解用途的菌酶混合制剂，该混合制剂为嗜麦芽寡养单胞菌与角质酶的复配物；采用本发明提供的菌酶混合制剂降解聚对苯二甲酸乙二醇酯及聚对苯二甲酸乙二醇酯中间体，其降解能力远优于采用菌或酶单独处理，所述菌酶混合制剂在高结晶度聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)及其中间体苯二甲酸乙二醇酯(BHET)降解过程中具有显著的协同作用，在塑料降解技术领域具有较好地推广应用价值。
一种含有麦芽寡养单胞菌混合制剂及其应用

[发明专利]可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯及其中间体的食石油微杆菌-CN201911147762.3有效
发明人：吴敬;颜正飞;顾冷涛 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-11-21 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯及其中间体的食石油微杆菌，属于微生物技术领域。本发明提供了一株可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的食石油微杆菌JWG‑G2，将此食石油微杆菌JWG‑G2以1×108CFU/mL的接种量接种至含有2g/L聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料颗粒的无机盐液体培养基中培养5d后，可使聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料颗粒部分被降解为羟乙基对苯二甲酸酯和可直接回收利用的对苯二甲酸，可使聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料颗粒表面的酯键官能团减少，且使聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料颗粒的失重率达5.6％，因此，本发明的食石油微杆菌JWG‑G2在降解聚对苯二甲酸乙二醇酯中具备极高的应用前景。
降解对苯二甲酸乙二醇及其中间体石油杆菌

[发明专利]乙酰木聚糖酯酶在聚对苯二甲酸乙二醇酯降解中的应用-CN202010582493.X有效
发明人：吴敬;颜正飞;王蕾;黄青松 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-06-23 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12P7/62 文献下载
摘要：本发明涉及乙酰木聚糖酯酶在聚对苯二甲酸乙二醇酯降解中的应用，属于酶工程技术领域。将乙酰木聚糖酯酶加入至高结晶度聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)薄膜的Tris‑HCl缓冲液中，65℃、150rpm恒温水浴摇床中反应6h后，可使高结晶度聚对苯二甲酸乙二醇酯塑料部分被降解为羟乙基对苯二甲酸酯(MHET)和可直接回收利用的对苯二甲酸(TPA)，处理后的薄膜表面出现明显的腐蚀现象。因此，本发明的乙酰木聚糖酯酶在降解高结晶度聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)塑料中具备极高的应用前景。
乙酰聚糖对苯二甲酸乙二醇降解中的应用

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