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[发明专利]一种复合微生态制剂及其制备方法和应用-CN201710940139.8有效
发明人： 韩莹倩;董青;李月勤;张永;冯白;刘涛;史洪涛 -专利权人：河南牧一动物药业有限公司
申请日： 2017-09-30 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种复合微生态制剂及其制备方法和应用，属于微生态制剂技术领域。本发明的复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌菌种接入微生物液体培养基中，于32～37℃通气发酵培养至形成芽孢，然后接入酿酒酵母菌菌种在28～32℃通气发酵，待酿酒酵母菌处于稳定期时，同时接入植物乳杆菌菌种和屎肠球菌菌种在30～37℃密闭静置发酵，待植物乳杆菌和屎肠球菌同时处于稳定期时，停止发酵，即得。本发明的复合微生态制剂的制备方法，多菌种分段发酵利用不同益生菌利用的营养组分不同对营养底物进行充分利用，节省原料和能源；并且在发酵产物中含有多种益生菌和丰富的代谢产物，各菌种比例天然形成，临床效果更好。
一种复合生态制剂及其制备方法应用

[发明专利]一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体-CN201710038807.8有效
发明人：杨国宇;韩莹倩;王月影;李和平;王江;郭豫杰;郭婉莹;苏冰倩;褚贝贝 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2017-01-19 - 公布日： 2020-04-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
一种促进蛋白可溶性表达提高重组载体

[发明专利]一种畜禽用苜蓿草微生态饲料添加剂及其制备方法-CN201510973171.7有效
发明人：史洪涛;胡晓波;王永芬;乔宏兴;韩莹倩;姜亚乐;边传周 -专利权人：河南牧业经济学院
申请日： 2015-12-22 - 公布日： 2019-11-08 - 主分类号： A23K10/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种畜禽用苜蓿草微生态饲料添加剂及其制备方法，属于饲料添加剂领域。该畜禽用苜蓿草微生态饲料添加剂，由发酵菌种和以下重量份数的原料混合发酵制成：苜蓿草550～700份、纤维素酶0.5～1.5份、植酸酶0.5～1.5份；所述发酵菌种的用量为：每550～700g的苜蓿草对应加入枯草芽孢杆菌菌种40～60mL、地衣芽孢杆菌菌种20～30mL、植物乳杆菌菌种180～220mL、酵母菌菌种100～150mL。本发明的畜禽用苜蓿草微生态饲料添加剂营养价值高、吸收好、成本低，并具有维持肠道菌群平衡、增强畜禽免疫力的作用，用于提高畜禽生产性能效果显著。
一种畜禽苜蓿草生态饲料添加剂及其制备方法

[发明专利]一种用于提高产蛋鸡生产性能的中药微生态制剂及其制备方法-CN201610278338.2有效
发明人：汤法银;张俊逸;韩莹倩;乔宏兴;史洪涛;王永芬;边传周 -专利权人：河南牧业经济学院
申请日： 2016-04-29 - 公布日： 2019-05-10 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于提高产蛋鸡生产性能的中药微生态制剂及其制备方法，该中药微生态制剂由发酵菌种和以下重量份数的原料混合发酵制成：黄芪15～20份、淫羊藿7～10份、艾叶50～60份、大枣8～12份、酵母细胞壁多糖7～10份；发酵菌种的用量为：每15～20g的黄芪对应加入枯草芽孢杆菌菌种10～15mL、地衣芽孢杆菌菌种3～5mL、植物乳杆菌菌种5～10mL、屎肠球菌菌种20～25mL。该中药微生态制剂药物利用率高、药效显著，解决了细菌耐药性、药物残留以及饲料受霉菌毒素污染等问题；增强了蛋鸡免疫力和肠道消化吸收功能，提高蛋鸡产蛋率及蛋的品质，延迟淘汰时间，从整体上达到提高蛋鸡生产性能的目的。
一种用于提高蛋鸡生产性能中药生态制剂及其制备方法

[发明专利]一种连续化生产c-di-AMP的方法-CN201510281173.X有效
发明人：杨国宇;张改平;杨森;孔江南;张超;韩莹倩;郭豫杰 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2015-05-28 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12P19/28 文献下载
摘要：本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种采用固定化DisA蛋白连续生产c‑di‑AMP的方法。该方法步骤：1、DisA基因改造，通过基因工程手段，将DisA基因与cbm基因融合构建重组质粒载体；2、重组质粒转化，CBM‑DAC融合蛋白的表达；3、一步纯化和固定化DAC酶；4、连续化生产c‑di‑AMP；5、反应产物分离浓缩与纯化。本发明特异性的利用了CBM结构域与纤维素结合但无水解功能的特点，工艺较为成熟，生产成本低廉，环境友好，所制备的DAC酶类型多样，来源广泛，而且浓度、纯度较高，酶促反应效率较高，因而具有较好的开发应用价值。
连续化生产固定化构建重组质粒载体反应产物分离基因工程手段重组质粒转化酶工程技术环境友好基因工程基因融合开发应用酶促反应融合蛋白一步纯化纤维素结构域水解制备生产成本蛋白浓缩成熟改造

[发明专利]酶促cGAMP生成量检测所用RNA适配体及检测方法-CN201510357003.5在审
发明人：张超;杨国宇;孔江南;韩莹倩 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2015-06-25 - 公布日： 2015-10-07 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体设计一种酶促cGAMP生成量检测所用RNA适配体及检测方法。该RNA适配体包括spinach2，VC2/g20a和tRNA三部分，碱基序列如SEQ ID NO.1 所示。相较于现有的cGAMP生成量检测方法，本发明的主要技术优点体现在：1、本发明中的RNA适配体通过体外转录获得，无需切胶纯化，较好的保证了RNA适配体的完整性；2、相较于HPLC法，检测成本低廉，操作简便，相较于TLC法，操作安全无风险，检测样品数量大，可实现大规模样品检测；3、本发明中的RNA适配体可进一步纯化或者与其他试剂完善配制成标准化检测试剂盒，便于检测使用。
cgamp 生成检测所用 rna 适配体方法