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[发明专利]用于检测新霉素、阿米卡星和巴龙霉素的单抗和酶联免疫方法与试剂盒-CN201210045202.9有效
发明人：袁宗辉;王玉莲;闫彩霞;彭大鹏;潘源虎;黄玲利;陈冬梅;陶燕飞;戴梦红;刘振利;廖峰 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2012-02-27 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：本发明公开了一种能识别新霉素、阿米卡星和巴龙霉素的特异性单克隆抗体和一种用于检测新霉素、阿米卡星和巴龙霉素的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞EDC/5G04所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C201144。本发明的酶联免疫检测方法包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测等步骤。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别新霉素、阿米卡星和巴龙霉素，提高了现有技术的检测效率；动物组织样品处理方法简单、时间短。本发明的酶联免疫方法及试剂盒还具有检测灵敏度高、精密度好、准确性好的特点。
用于检测新霉素阿米卡星霉素免疫方法试剂盒

[发明专利]用于检测3-甲基喹噁啉-2-羧酸的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒-CN201210045175.5有效
发明人：袁宗辉;张西亚;彭大鹏;王玉莲;潘源虎;黄玲利;陈冬梅;陶燕飞;刘振利;周琪 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2012-02-27 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：本发明公开了一种能识别3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)的特异性单克隆抗体，本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞MQCAG GA/5B10所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：C201147。本发明还公开了特异性单克隆抗体、包被原、免疫原的制备方法和酶联免疫检测方法及试剂盒。与现有技术相比，本发明首次制备得到可识别MQCA的单克隆抗体，检测过程中的样品处理方法更加简便，易操作，具有检测灵敏度高、精密度强、准确性好等优点。
用于检测甲基喹噁啉羧酸单克隆抗体免疫方法试剂盒

[发明专利]用于苏丹红Ⅰ和对位红检测的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒-CN201210045215.6无效
发明人：袁宗辉;张丽燕;彭大鹏;王玉莲;潘源虎;陈冬梅;陶燕飞;黄玲利;戴梦红;刘振利 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2012-02-27 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：本发明公开了一种能识别苏丹红I和对位红的特异性单克隆抗体和一种用于检测动物源性食品中苏丹红I和对位红的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞SU I/1H7所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：C201185。本发明的酶联免疫检测方法包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测等步骤。与现有技术相比，本发明的方法和试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等优点。
用于苏丹对位检测单克隆抗体免疫方法试剂盒

[发明专利]用于氯霉素残留检测的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒-CN201210045221.1无效
发明人：袁宗辉;易红波;彭大鹏;王玉莲;黄玲利;陈冬梅;陶燕飞;戴梦红;刘振利;谢长清 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2012-02-27 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：本发明公开了一种能识别氯霉素的特异性单克隆抗体和一种用于检测氯霉素的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由杂交瘤细胞HSBSA/4B7所分泌，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C201152。本发明的酶联免疫检测方法包括免疫原、包被原、抗体的制备以及样品的处理和检测等步骤。本发明的单克隆抗体对氯霉素的识别专属性强，灵敏度高，酶联免疫方法及试剂盒的精密度好、准确性高。
用于氯霉素残留检测单克隆抗体免疫方法试剂盒

[发明专利]兽用甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂及其制备方法与应用-CN201010604172.1有效
发明人：袁宗辉;方萤玉;王玉莲;潘源虎;黄玲利;陶燕飞;陈冬梅;彭大鹏;戴梦红;刘振利 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2010-12-24 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： A61K9/16 文献下载
摘要：本发明涉及一种兽用甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂及其制备方法与应用。制剂中有效药物成分甲磺酸达氟沙星含量为11.45～21.01％，载体海藻酸钠多糖交联物含量为78.99～88.55％。该制剂采用乳化化学交联法制备，先将甲磺酸达氟沙星、海藻酸钠、抗氧化剂配成水相溶液，在乳化的条件下滴加交联剂，固化形成微球，然后通过洗涤、离心、过滤、干燥，得到平均粒径在8～9μm的甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂。该制剂的制备工艺简单易行，所用原料具有很好的生物相容性、生物降解性和稳定性，制备的甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂具有安全无毒、载药量高(11.45％～21.01％)、包封率高(59.54～88.20％)和长效缓释等特点，对猪肌内注射该制剂后可维持有效浓度数天，适用于治疗由敏感菌引起的畜禽呼吸道、消化道感染。
兽用甲磺酸达氟沙星缓释微球制剂及其制备方法应用

[发明专利]适用于畜禽的甲磺酸达氟沙星-阿莫西林混悬注射液及其制备与应用-CN201010286223.0有效
发明人：袁宗辉;陶恒勋;王玉莲;黄玲利;潘源虎;陶燕飞;陈冬梅;刘振利;彭大鹏;戴梦红;王旭 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2010-09-16 - 公布日： 2011-03-02 - 主分类号： A61K31/4709 文献下载
摘要：本发明属于畜禽用药制剂制备技术领域。具体涉及一种畜禽用的甲磺酸达氟沙星-阿莫西林混悬注射液，其制备方法与用。本发明的制剂中甲磺酸达氟沙星含量为2.5％(W/V)，阿莫西林含量为15％(W/V)，其余为注射用油酯、助悬剂、抗氧化剂和乳化剂。制备方法为：先将注射用油酯和助悬剂加热搅拌制成凝胶，然后加入甲磺酸达氟沙星和阿莫西林原料药微粉、抗氧化剂、乳化剂，经高速分散机、胶体磨分散均质，制备成混悬剂。本发明制备工艺简单，制备的混悬注射液符合药典要求，经肌内注射后对消化道和呼吸道疾病具有明显的长效作用，是一种对畜禽消化道和呼吸道疾病具有长效作用的新型兽药制剂。
适用于畜禽甲磺酸达氟沙星阿莫西林注射液及其制备应用

[发明专利]一种3,5-二氯-4-羟基-2-甲氧基-6-甲基-苯甲酸的化学合成方法-CN200910273434.8有效
发明人：袁宗辉;李荣强;陶燕飞;潘源虎;黄玲利;王玉莲;王绪;陈冬梅;刘振利;翟长友;富泽林;张西亚;卢洪涛 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2009-12-29 - 公布日： 2010-09-01 - 主分类号： C07C65/21 文献下载
摘要：本发明属于药物代谢物的化学合成技术领域，具体涉及一种阿维拉霉素体内代谢物3，5-二氯-4-羟基-2-甲氧基-6-甲基-苯甲酸的化学合成方法。本发明的特征是，从现有“效美素”预混剂中通过反向工程得到阿维拉霉素粗品，对其纯化，通过一步反应制得3，5-二氯-4-羟基-2-甲氧基-6-甲基-苯甲酸的粗品，对该粗品进行重结晶纯化，制得其纯品，仪器分析该合成的产品纯度达99.5％以上。本发明的合成方法路线短，收率高，条件易控，原料价廉易得，所得产物纯度高。合成的产品不仅为阿维拉霉素的代谢研究和残留检测提供了化学对照品，也为同类化合物的合成提供了相应的工艺参考。
一种羟基甲氧基甲基苯甲酸化学合成方法

[发明专利]氚或氘标记喹赛多的制备方法-CN200910061154.0有效
发明人：袁宗辉;斯琴朝克图;黄玲利;王玉莲;陶燕飞;陈冬梅;刘振利;彭大鹏;戴梦红;刘振果;邱荣超;刘志亮 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2009-03-18 - 公布日： 2009-09-23 - 主分类号： C07D241/52 文献下载
摘要：本发明涉及一种饲料药物添加剂喹赛多的氚或氘标记制备方法。本发明是氚气或氘气与4-溴-2-硝基苯胺或4-碘-2-硝基苯胺，在催化剂和酸接受体作用下脱卤交换氚或氘，生成4-³H-2-硝基苯胺或4-²H-2-硝基苯胺，再经过氧化反应、Beirut反应、成腙反应，采用微量合成方制得氚或氘标记喹赛多，获得高比活度(12.63Ci/mmol)、高放化纯度(98％以上)、高化学纯度(99.5％以上)的氚标记喹赛多或高化学纯度(99.5％以上)的氘标记喹赛多。本发明为系统展开喹赛多在动物体内吸收、分布及代谢规律提供了物质基础。本发明合成制备的4-³H-2-硝基苯胺或4-²H-2-硝基苯胺可作为所有在喹噁啉环第6位上无其它取代基的喹噁啉类药物氚或氘标记合成的起始原料，是本类药物的氚或氘标记合成重要基础物质。
标记喹赛多制备方法

[发明专利]兽用盐酸氧阿苯达唑预混剂-CN200910061679.4有效
发明人：袁宗辉;韩勇;黄玲利;王玉莲;陈冬梅;戴梦红;陶燕飞;彭大鹏;王旭;刘振利 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2009-04-23 - 公布日： 2009-09-23 - 主分类号： A61K9/14 文献下载
摘要：本发明属于饲料药物添加剂应用技术领域，具体涉及一种兽用盐酸氧阿苯达唑预混剂的制备及应用。本发明以盐酸氧阿苯达唑为有效成分，用载体沸石粉混合均匀后制成预混剂，按重量份计：含水量小于1％的盐酸氧阿苯达唑1～20份，含水量小于1％的沸石粉80～99份，按照常规方法混合为成品。本发明制备的预混剂可添加于猪、羊、牛全价配合料中，用于防治家畜体内寄生虫病。按活性成分计给药剂量为5～10毫克/公斤体重。本发明制备的预混剂性能优良，生物利用度高，残留消除快。
盐酸氧阿苯达唑预混剂

[发明专利]一种人肠道菌群连续培养的系统及方法-CN200810048065.8有效
发明人：袁宗辉;魏亚静;戴梦红;王玉莲;陈冬梅;刘振利;黄玲利;陶燕飞;彭大鹏;王旭;谢长清;姚俊平;郝海红;姚敏;郭文韬 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-06-18 - 公布日： 2009-02-18 - 主分类号： C12M1/36 文献下载
摘要：本发明涉及一种人肠道菌群连续培养系统及方法。系统包括一组发酵罐，培养基输入、废液输出、液位控制系统和气路系统。建立了一种人肠道菌群连续培养系统及方法，构建了一种模拟人肠道环境的离体模型，连续培养的装置通过电脑控制，模型具有操作简单、使用方便、体系稳定性好等特点，经检测表明人肠道菌群不仅能在系统中稳定生长，且优势菌数量和主要的代谢产物(SCFA)浓度也与健康人相似。该模型的建立不仅为抗菌药残留对人肠道菌群影响的安全性评价构建了平台，也为新药、功能食品等的安全评价研究提供了更科学的方法和途径。
一种肠道连续培养系统方法

[发明专利]检测食品沙门氏菌的Taqman探针荧光定量PCR方法-CN200810197170.8有效
发明人：袁宗辉;戴梦红;王玉莲;刘振利;彭大鹏;黄玲利;王旭;陈冬梅;陶燕飞;谢长清 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-10-07 - 公布日： 2009-02-11 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测食品沙门氏菌的Taqman探针荧光定量PCR方法。针对fimY基因设计引物和Taqman探针，荧光定量PCR。在优化的反应程序和反应体系下，以水煮裂解法提取的肠炎沙门氏菌标准菌株10倍系列稀释液的基因组DNA为模板，进行荧光定量PCR，绘制标准曲线，根据线性关系R²和扩增效率E来衡量重复样品数据是否一致和不同拷贝数的初始模板是否具有相同的扩增效率。应用本发明建立的方法，对人工污染的猪肌肉和鸡蛋样本进行检测，该方法能在最高浓度为14.8×10⁸cfu/ml干扰菌的存在下，在1～3cfu/10g的接种浓度上检出阳性。本发明使用fimY基因特异引物和Taqman探针，在优化的反应条件下检测食品中污染的沙门氏菌时，具有更高的稳定性、特异性和灵敏性，是一种快速、准确的沙门氏菌检测方法。
检测食品沙门氏菌 taqman 探针荧光定量 pcr 方法

[发明专利]一种快速检测空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药突变点的荧光定量PCR方法-CN200810048093.X有效
发明人：袁宗辉;郝海红;戴梦红;王玉莲;黄玲利;彭大鹏;王旭;陈冬梅;陶燕飞;魏亚静;郭文韬 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-06-19 - 公布日： 2009-01-21 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明属生物技术领域，涉及一种检测空肠弯曲杆菌大环内酯类药物耐药相关基因突变的方法。本发明利用实时荧光定量PCR TaqMan探针技术，依据空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药突变区23S rDNA中V区的核酸序列，设计特异性的引物和探针，通过优化TaqMan实时荧光定量PCR反应体系和反应条件，以准确检测靶基因的相关耐药突变点。本发明能够快速准确地同时检测出空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药的两个主要突变位点，比目前已经报道的相关分子生物学检测方法具有更好的特异性和更高的灵敏度，比传统的测序和药敏实验方法操作简便、准确快速。本发明为耐大环内酯类空肠弯曲杆菌分子流行病学监测提供了有力的技术手段。
一种快速检测空肠弯曲杆菌内酯耐药突变荧光定量 pcr 方法

[发明专利]一种治理和回收利用喹赛多生产废水的方法-CN200810048646.1有效
发明人：袁宗辉;邱荣超;陶燕飞;王玉莲;黄玲利;陈冬梅;彭大鹏;戴梦红;刘振利;谢长清;王旭;刘志亮;斯琴朝克图;李荣强 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-07-31 - 公布日： 2008-12-31 - 主分类号： C07D241/52 文献下载
摘要：本发明属于喹赛多(2－甲酰氰基乙酰腙－喹噁啉－1，4－二氧化物)生产废水的治理及其回收利用方法。采用减压蒸馏方法回收了喹赛多生产废水中的绝大部分有用物质，并套用到其生产过程中，生产的喹赛多纯度达98％以上，产率达到53％，大大降低了喹赛多的生产成本；采用焚烧法对无回收利用价值的蒸馏剩余物进行焚烧后，其减容比高达96％，废气排放达到国家规定标准；采用UV/Fenton氧化法对喹赛多水冲洗液处理后，其COD去除率达98％以上，达到国家一级排放标准，可以安全的排放到环境中。本发明所用设备简单，操作简单易行，对喹赛多生产废水进行治理和回收利用后，其生产达到清洁生产和资源的循环利用，符合我国建设环境友好型和资源节约型社会的要求。
一种治理回收利用喹赛多生产废水方法

[发明专利]2－甲酰氰基乙酰腙－喹噁啉－1,4－二氧化物的化学合成方法-CN200810048645.7有效
发明人：袁宗辉;邱荣超;陶燕飞;薛克友;斯琴朝克图;刘志亮;王玉莲;黄玲利;陈冬梅;彭大鹏;戴梦红;刘振利;谢长清;王旭 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-07-31 - 公布日： 2008-12-17 - 主分类号： C07D241/52 文献下载
摘要：本发明属于药物合成领域，具体涉及一种饲料添加剂2－甲酰氰基乙酰腙－喹噁啉－1，4－二氧化物(喹赛多)的化学合成方法。本发明的步骤包含以苯并氧化呋咱为原料，N，N－二甲基甲酰胺为反应介质，在催化剂吡咯烷的作用下与丙酮醛缩二甲醇反应，合成中间体喹噁啉－1，4－二氧－2－甲醛缩二甲醇；将该中间体在甲醇和浓盐酸中进行醇解，与氰乙酰肼反应合成最终产物2－甲酰氰基乙酰腙－喹噁啉－1，4－二氧化物(喹赛多)。本发明反应条件温和，原料廉价易得，所用试剂均为低毒或无毒，合成产品收率较高，纯度较好，适于工业化条件下的扩大生产。
甲酰氰基乙酰喹噁啉二氧化物化学合成方法

[发明专利]一种艾迪普啉的合成方法-CN200810047222.3有效
发明人：袁宗辉;刘志亮;陶燕飞;王玉莲;黄玲利;陈冬梅;彭大鹏;戴梦红;刘振利;谢长清;邱荣超;司琴朝克图;方莹玉 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2008-04-03 - 公布日： 2008-09-17 - 主分类号： C07D239/49 文献下载
摘要：本发明属于兽药制备技术领域，具体涉及一种苄胺嘧啶类药物艾迪普啉的合成方法。以对二甲氨基苯甲醛为原料，先后经过醛基还原为腈基，溴取代苯环氢，甲氧基取代苯环溴，甲氨基的甲基化，腈基氧化为醛基，缩合和环合反应得到目标产物艾迪普啉。本发明得到的产物收率可以达到13％，收率相对较高。本发明使用简单易得的普通试剂为反应介质，所用仪器和反应条件容易实现。最后所得产品纯度较高。其合成不仅提供一种艾迪普啉的合成方法，也为其它苄胺嘧啶类药物的合成提供了参考。
一种艾迪合成方法