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[发明专利]一种表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌及其构建方法和表达方法-CN202310468268.7在审
发明人： 贡红日;张玉莹;饶子和 -专利权人：南开大学
申请日： 2023-04-27 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌及其构建方法和表达方法，属于外源表达技术领域。本发明提供了一种表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌的构建方法，以含有辅助基因敲除质粒的耻垢分枝杆菌感受态为基底细胞，先转入带有亲和纯化标签的结核分枝杆菌ATP合成酶基因簇，再敲除耻垢分枝杆菌ATP合成酶基因组，反复传代后收集不含辅助基因敲除质粒的菌株，利用原核表达的方法向该菌株中转入结核分枝杆菌ATP合成酶基因簇，得表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌。利用本发明所述构建方法，解决了异源表达必需基因本底基因难以敲除以及多亚基蛋白复合物异源表达杂合复合物形成的问题。
一种表达结核分枝杆菌 atp 合成重组及其构建方法

[发明专利]一种人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的纯化方法-CN202211600937.3在审
发明人： 贡红日;饶子和;杜占强 -专利权人：南开大学
申请日： 2022-12-13 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的纯化方法。本发明提供的纯化方法：将人源线粒体复合物总蛋白溶液装入填装有Anti‑Flag填料的色谱柱中进行亲和柱层析纯化，将得到的人源线粒体呼吸链复合物II粗提液装入凝胶排阻色谱柱中进行凝胶排阻柱层析纯化，采用第二洗脱剂进行第二洗脱后收集第二洗脱液，得到所述人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ纯品；所述人源线粒体复合物总蛋白溶液中的人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的SDHD亚基C端融合有3×Flag标签。本发明提供的纯化方法具有操作流程简单，实验成本较低，获得的人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ纯度较高，生理活性好的优势，可用于后续的结构功能及药物发现研究。
一种线粒体呼吸复合物纯化方法

[发明专利]一种人源ATP合成酶的纯化方法-CN202210387022.2在审
发明人： 贡红日;饶子和;赖越峥 -专利权人：南开大学
申请日： 2022-04-13 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种人源ATP合成酶的纯化方法。本发明提供了一种人源ATP合成酶的纯化方法，制备人源线粒体粗提物，溶膜，得线粒体总蛋白溶液；通过阳离子交换柱、阴离子交换柱及凝胶排阻色谱柱的手段分离纯化人源ATP合成酶。本发明提供的纯化方法具有操作方法简单，实验成本低，时长短的特点，得到的人源ATP合成酶蛋白纯度高，生理活性好，可用于后续的结构功能及药物发现研究。
一种 atp 合成纯化方法

[发明专利]一种人源呼吸链复合物I的纯化方法-CN202210351749.5在审
发明人： 贡红日;徐金旭;周珊 -专利权人：南开大学
申请日： 2022-04-02 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种人源呼吸链复合物I的纯化方法，涉及蛋白纯化技术领域。本发明依次采用阳离子交换层析、阴离子交换层析和分子筛层析的方法，对人源呼吸链复合物I进行纯化，与目前常用的借助密度梯度离心法相比，对实验设备要求低，而且具有步骤简单、耗时短、安全性好以及易规范化操作等优点。本发明所述纯化方法所用阴阳离子填料及分子筛填料简单易得，纯化流程易放大，可以进一步推进到大规模分离纯化人源呼吸链复合物I。
一种呼吸复合物纯化方法

[发明专利]天然植物提取物及防治蜜蜂微孢子虫病的用途-CN201410672287.2有效
发明人：郑火青;陈秀贤;胡福良;贡红日 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-11-22 - 公布日： 2018-05-29 - 主分类号： A61K36/87 文献下载
摘要：本发明提供一种天然植物提取物，以葡萄皮作为原料，用乙醇溶剂浸提，经过超声波破碎、旋转蒸发等工艺提取出来的膏状物质，再制成一定浓度的葡萄皮提取物糖浆混合物，制备成防治蜜蜂微孢子虫病的药物。使用时装于饲喂器中，让感染微孢子虫的蜜蜂自由取食，作用于蜜蜂和微孢子虫，从而达到有效防治蜜蜂微孢子虫病的效果。本发明对蜜蜂无毒无副作用，该物质富含花青素等黄酮类化合物以及单宁、纤维素等物质。对蜜蜂微孢子虫病的防治效果好；药物的原料来源广泛、易得，制取简单，成本低；对蜂产品及环境无污染，是一种健康、环保、生态、高效的防治蜜蜂微孢子虫病的新途径。
蜜蜂微孢子虫病蜜蜂天然植物提取物防治微孢子虫黄酮类化合物葡萄皮提取物超声波破碎环境无污染糖浆混合物纤维素膏状物质工艺提取旋转蒸发乙醇溶剂有效防治自由取食蜂产品花青素葡萄皮饲喂器新途径单宁富含浸提制取制备无毒时装感染环保生态健康