本发明公开了一种猪肠道冠状病毒的多重RT‑qPCR试剂盒及检测方法，所述试剂盒包括如序列表中SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.12所示的引物和探针。所述的RT‑qPCR检测方法是将猪肠道组织样品、猪的粪便或肛门拭子样品进行总RNA提取，然后将得到的总RNA作为模板，添加如序列表中SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.12所示的引物和探针配制得到扩增反应液并进行扩增反应，然后通过荧光定量PCR仪自带软件绘制扩增曲线并读取相应的Ct值并进行结果判定，确定并区分不同的猪肠道冠状病毒。本发明方法具有特异性好、灵敏度高的优点，能够同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎(TGEV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS‑CoV)，为实验室检测区分上述病毒株提供了有效的技术手段。
