本发明公开了一种用于全时期家蚕微孢子虫快速检测的引物和探针、试剂盒及其方法,属于生物技术领域,本发明提供的引物及探针具有SEQ ID NO.1~3所示的核苷酸序列,本发明通过引物设计、条件优化以及特异性、灵敏度检测,成功建立起针对不同阶段家蚕微孢子虫的快速检测方法,该方法可用于家蚕微孢子虫的早期防治,能够在耗时较短的情况下实现大规模的蚕卵带毒检测及鉴定。
本发明公开了两种家蚕主要病毒的双重荧光PCR检测引物和探针组、试剂盒及其方法,属于生物技术领域,本发明所述引物及探针具有SEQ ID NO:1~2、SEQ ID NO:9~10、SEQ ID NO:11~12所示的核苷酸序列,本发明通过引物设计、条件优化以及特异性、灵敏度检测,成功建立起家蚕主要病原核型多角体病毒、质型多角体病毒的双重荧光检测方法,该方法可用于两种主要家蚕病毒病的快速鉴别诊断,能够在耗时短的情况下实现不同病原检测及鉴定。
本发明涉及生物技术领域,涉及家蚕微孢子虫NbNTT2技术,具体为家蚕微孢子虫NbNTT2及其应用,提供一种家蚕微孢子虫NbNTT2,所述NbNTT2的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,干涉其表达的核酸序列如SEQID NO.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示中的任一条;本发明提供了一种家蚕微孢子虫NbNTT2及其应用,其中NbNTT2能够促进细胞内ATP的产生,并且NbNTT2对微孢子虫的增殖有促进作用,干涉或抑制NbNTT2对微孢子虫的增殖有抑制作用,可以用于微孢子增殖药物研发和微孢子防控。
本发明公开了家蚕微粒子假定蛋白NB29及其重组表达载体和应用,假定蛋白基因NB29的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其表达的蛋白具有分泌性,根据家蚕微粒子假定蛋白(NB29)筛选出截短体形式N3,其融合Cas9蛋白在家蚕细胞质中稳定表达,当感染家蚕微粒子,微粒子的分泌蛋白NB29‑B与NB29‑N3相互作用,将Cas9拖入宿主细胞核中,达到宿主基因编辑的目的。本发明的Cas9介导的诱导型基因编辑载体可以稳定编辑宿主基因,为制备昆虫家蚕微粒子致死模型和家蚕微粒子防控提供了新思路,且对可感染人类的微粒子和家蚕其他病原防控提供借鉴,同时为相关基因的功能研究奠定基础。