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[发明专利]一种用于活循环肿瘤细胞捕获与基因行为综合分析的微流控芯片系统及方法-CN202310776802.0在审
发明人：常凌乾;汪于森;董再再 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2023-06-28 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： B01L3/00 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物分析技术领域，具体涉及一种用于活循环肿瘤细胞捕获与基因行为综合分析的微流控芯片系统及方法。本发明的微流控芯片系统由芯片本体和探针组成，所述芯片本体由磁性分离流道层10、单细胞微栏阵列层20、纳米电穿孔平台层30依次层叠在一起组成，并进一步在所述磁性分离流道层10顶部外接顶电极40；所述纳米电穿孔平台30由纳米孔膜31、探针储液室32和底电极33集成而成；所述探针为设置在所述探针储液室32中的四面体探针34，其由7条单链DNA通过自组装方式制备得到，用于检测循环肿瘤细胞内的基因；所述单细胞微栏阵列层20中设置有三种尺寸规格的微栏阵列，用于捕获循环肿瘤细胞；当所述顶电极40和所述底电极33分别与外接电场连接时，所述纳米孔膜31上的纳米孔用于聚焦电场，使循环肿瘤细胞产生电穿孔，并将四面体探针34递送至循环肿瘤细胞内。
一种用于循环肿瘤细胞捕获基因行为综合分析微流控芯片系统方法

[发明专利]一种活细胞内增强子活性鉴定方法与装置-CN202210492754.8在审
发明人：常凌乾;董再再;万凤奇 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2022-05-07 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本公开提供了一种活细胞内增强子活性鉴定方法与装置，用于实现活细胞内增强子活性的灵敏检测。本公开中采用纳米电穿孔生物芯片对细胞质膜进行高度聚焦穿孔，并提供驱动力，加速增强子探针向细胞核的递送。增强子探针采用循环扩增策略设计，在1小时内将荧光信号提高100倍以上。在实施例中，该方法与装置成功实现活细胞内CCAT1增强子的活性检测，同时细胞活性不受影响，证实了本公开中提出的方法及装置在检测活细胞中增强子活性方面的稳健性和可靠性。本公开为活细胞内增强子基因调控机制研究与临床应用诊断提供了便利的通用平台。
一种细胞内增强活性鉴定方法装置

[发明专利]基于单细胞阵列的纳米电穿孔装置及其应用-CN202210746780.9在审
发明人：常凌乾;董再再 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2020-10-13 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本公开提供了一种基于单细胞阵列的纳米电穿孔装置及其应用，用于从活细胞内提取带电物质和/或向活细胞内递送带电物质，该纳米电穿孔装置包括一单细胞可寻址微孔阵列、一纳米通孔聚合物薄膜、一储存室、一顶电极和一底电极。与传统的电穿孔方法相比，本公开采用的纳米电穿孔施加的电压小于50伏，电压大幅度降低，能够在维持细胞良好活性的前提下，同时具有单细胞精度、高效、安全、高通量和均一性高的优势。
基于单细胞阵列纳米穿孔装置及其应用

[发明专利]一种新型活细胞核内蛋白检测方法与装置-CN202210384917.0在审
发明人：常凌乾;董再再;孙宏 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2022-04-13 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明属于生物分析技术领域，具体涉及一种活细胞核内蛋白质的检测方法与装置。通过纳米电穿孔分子递送方法将两个质粒探针递送到细胞内部，然后由细胞自身将质粒探针转录翻译形成两个多肽复合物。通过质粒探针所携带的基因，得到的两个多肽组合探针包含3个功能区域，即核定位区、特异性识别区和荧光蛋白区。利用核定位信号序列，组合探针被送入至活细胞细胞核内，并通过特异性识别多肽与目标核蛋白结合，最后经两个荧光蛋白片段的合并释放荧光信号，完成在活细胞核内的蛋白检测。
一种新型细胞核蛋白检测方法装置

[发明专利]一种耐药异质性循环肿瘤细胞捕获与基因分析的试剂、装置和方法-CN201811180288.X有效
发明人：方晓红;董再再;赵立波;张振;徐丽;周卫 -专利权人：中国科学院化学研究所;中国科学院大学
申请日： 2018-10-10 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明涉及一种对顺铂耐药的循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体以及所述核酸适体修饰的磁珠。本发明所述核酸适体或磁珠与现有技术已知的其它核酸适体或磁珠组合使用可提高循环肿瘤细胞的捕获效率，进一步利用微孔芯片二次纯化可提高循环肿瘤细胞的纯度，满足基因分析的要求。还特别提供了一种高效捕获耐药异质性非小细胞肺癌循环肿瘤细胞、进行基因分析的方法及试剂。
一种耐药异质性循环肿瘤细胞捕获基因分析试剂装置方法

[发明专利]一种基于核酸适体免疫PCR共同表征外泌体膜标志物和RNA的方法-CN201911011894.3有效
发明人：方晓红;董再再;赵立波;张振;周卫;徐丽 -专利权人：中国科学院化学研究所
申请日： 2019-10-23 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于核酸适体免疫PCR共同表征外泌体膜上标志物和RNA的方法。此方法主要涉及通过核酸适体对外泌体膜上标志物进行特异性识别和结合，再通过聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)同时扩增结合在外泌体上的核酸适体及外泌体RNA，实现外泌体膜上标志物和RNA的同时表征。利用本发明提出的方法，可实现外泌体膜上标志物和RNA的同时高灵敏检测，节约样本，操作简单，具有很高的临床应用价值。
一种基于核酸免疫 pcr 共同表征外泌体膜标志 rna 方法

[发明专利]基于单细胞阵列的纳米电穿孔装置及其应用-CN202011093674.2在审
发明人：常凌乾;董再再 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2020-10-13 - 公布日： 2021-01-15 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本公开提供了一种基于单细胞阵列的纳米电穿孔装置及其应用，该基于单细胞阵列的纳米电穿孔装置包括：三维微纳米结构芯片，用于阵列化单细胞并提供用于分子传输的纳米通道；细胞培养室，位于所述三维微纳米结构芯片之上，用于细胞培养；生物分子储存室，位于所述三维微纳米结构芯片之下，用于生物分子的存储；位于所述细胞培养室上方的顶电极，以及位于所述生物分子储存室下方的底电极，用于电穿孔时形成回路。与传统的电穿孔方法相比，本公开采用的纳米电穿孔施加的电压小于50伏，电压大幅度降低，能够在维持细胞良好活性的前提下，同时具有递送高效、安全、高通量和均一性高的优势。
基于单细胞阵列纳米穿孔装置及其应用

[发明专利]核酸适体酶联检测试剂盒和制备方法及其应用-CN201810677985.X有效
发明人：方晓红;张振;董再再;徐丽 -专利权人：中国科学院化学研究所
申请日： 2018-06-27 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及核酸适体酶联检测试剂盒和制备方法及其用途，该核酸适体酶联检测试剂盒，包括核酸适体板、阴性对照、阳性对照、样品稀释液、酶标抗体、洗涤液、显色液A&B、终止液和封口膜；其中，核酸适体板为VEGF核酸适体修饰的酶联板；酶标抗体为辣根过氧化物酶标记血管内皮细胞生长因子单克隆抗体。本发明的核酸适体酶联检测试剂盒具有结果稳定准确、特异性强、灵敏度高、使用方便、价格低廉、便于推广的优点。
核酸适体检测试剂酶联酶标抗体制备血管内皮细胞生长因子辣根过氧化物酶标记单克隆抗体样品稀释液特异性强阳性对照阴性对照封口膜灵敏度酶联板洗涤液显色液终止液修饰应用

[发明专利]亲和丙型病毒性肝炎核心抗原的核酸适体及其应用-CN201410482700.9有效
发明人：方晓红;张振;赵子龙;徐丽;董再再;赵立波 -专利权人：中国科学院化学研究所
申请日： 2014-09-19 - 公布日： 2018-08-24 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明公开了一种亲和丙型病毒性肝炎核心抗原的核酸适体及其应用。本发明所提供的核酸适体，是如下(a)或(b)：(a)序列表的序列2所示的单链DNA；(b)含有(a)所述核酸适体的单链DNA。利用本发明的核酸适体，可以捕获溶液中的丙型肝炎病毒核心抗原，也可以检测溶液中的丙型肝炎病毒核心抗原，将有利于丙型肝炎血清学诊断和血液筛查。利用本发明的核酸适体，部分代替单克隆抗体捕获核心抗原进行丙型肝炎检测，具有高灵敏、成本低、易制备、易保存的优点。本发明具有很高的应用价值。
核酸适体核心抗原丙型肝炎病毒核心抗原病毒性肝炎单链DNA 捕获应用丙型肝炎检测单克隆抗体丙型肝炎血液筛查血清学制备灵敏诊断保存检测

[发明专利]一种亲和丙型病毒性肝炎核心蛋白的核酸适体及其应用-CN201410219472.6有效
发明人：方晓红;张振;赵子龙;徐丽;董再再;赵立波 -专利权人：中国科学院化学研究所
申请日： 2014-05-22 - 公布日： 2014-08-27 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明公开了一种亲和丙型病毒性肝炎核心蛋白的核酸适体及其应用。本发明提供的核酸适体，是如下(a)或(b)：(a)序列表的序列2所示的单链DNA；(b)含有(a)所述核酸适体的单链DNA。利用本发明的核酸适体，可以捕获溶液中的丙型肝炎病毒核心蛋白，也可以检测溶液中的丙型肝炎病毒核心蛋白，将有利于丙型肝炎血清学诊断和血液筛查。利用本发明的核酸适体，部分代替单克隆抗体捕获核心蛋白进行丙型肝炎检测，具有高灵敏、成本低、易制备、易保存的优点。本发明具有很高的应用价值。
一种亲和病毒性肝炎核心蛋白核酸及其应用

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