本发明涉及动物疫病分子生物学检验试剂领域,具体涉及一种检测新型鹅细小病毒的Cycleave荧光PCR引物探针组及应用、检测试剂盒。检测新型鹅细小病毒的Cycleave荧光PCR引物探针组,包括核苷酸序列为SEQ ID NO:1的新型鹅细小病毒检测正向引物NGPV‑F、核苷酸序列为SEQ ID NO:2的新型鹅细小病毒检测反向引物NGPV‑R和核苷酸序列为SEQ IDNO:7的新型鹅细小病毒检测探针NGPV‑P。本发明引物探针组、检测试剂盒具有特异性好、灵敏度高、结果准确、可实现高通量检测等优势,适宜大规模推广应用,具有较高的商业价值和良好的应用前景。
本发明公开了一种用于同时检测GAstV和RA的荧光PCR引物探针组及试剂盒和方法,所述引物探针组包括4条不同的引物和2条不同的探针,其中,2条扩增GAstV的引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3~4所示;1条扩增GAstV的探针,其核酸序列如SEQ ID NO.17所示;2条扩增RA的引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO.11~12所示;1条扩增RA的探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示,可用于同时检测GAstV和RA,具有操作简单、灵敏度高、特异性好、检测速度快,成本低等优势,适宜临床大规模推广应用,具有良好的推广价值和应用前景。
本发明公开了基于双重荧光RT‑PCR鉴别检测试剂盒、方法及应用,具体涉及分子生物学检测技术领域,包括RHDV和RHDV2引物探针组,所述RHDV和RHDV2引物探针组包括针对经典RHDV的特异性引物对、TaqMan探针和针对RHDV2的特异性引物对、TaqMan探针;所述针对经典RHDV的特异性引物对包括正向引物序列如SEQ ID NO.1所示和反向引物序列SEQ IDNO.2所示。本发明通过4条引物及2条探针加入同一荧光RT‑PCR反应体系中,彼此之间不干扰检测效果,一次加样进行扩增,实时观察扩增结果,有效克服了现有试剂盒操作繁琐,时间长,特异性差的缺陷,能用于临床经典RHDV和RHDV2疑似样本的快速鉴别检测。适用于科研单位和基层单位RHD的流行病学调查和疾病检测,具有良好的商业应用前景,对我国RHD的防控具有重要意义。
本申请公开了一种检测鸡滑液囊支原体抗体的抗原组合物、试剂盒及其应用。所述抗原组合物包括第一抗原,所述第一抗原的氨基酸序列包括SEQ IDNo.3所示序列。所述抗原组合物还包括第二抗原,所述第二抗原的氨基酸序列包括SEQ ID No.2所示序列。所述抗原组合物还包括第三抗原,所述第三抗原的氨基酸序列包括SEQ ID No.1所示序列。以本发明的抗原组合物做为ELISA法的包被抗原,对临床样本血清型的检出率明显高于现有的进口试剂盒。
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物和探针、试剂盒及检测方法。该快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物的正向引物序列如SEQ ID No.1所示、反向引物序列如SEQ ID No.2所示;探针序列如SEQ ID No.3所示。本发明所建立的RPA方法可实现对ALV‑J亚群的快速检测,RPA检测限为10copies/μL;RPA仅特异性扩增禽白血病病毒J亚群GP85基因。采用本发明的引物和探针及检测方法具有优异的特异性、敏感性,简便、快速,实现了禽白血病毒J亚群现场快速检测;为禽白血病J亚群的临床快速检测提供了一种新的可靠的快速检测工具。
本发明公开了一种Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物及检测方法,属于禽类病毒检测技术领域。本发明Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物由上游引物和下游引物组成;所述上游引物如SEQ ID NO.1所示,所述下游引物如SEQ ID NO.2所示。Ⅰ亚群禽腺病毒检测方法,包括使用所述的Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物进行PCR扩增反应。所述PCR扩增反应产物出现494bp片段时为阳性,否则为阴性。本发明方法为能够检测I亚群禽腺病毒A、B、C、D、E等5个种共12个血清型的通用方法,具有通用性好、特异性强、敏感性高、操作方便、快速准确等特点。