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[发明专利]小龙虾胚胎染色体的制备方法-CN202310388834.3在审
发明人：刘少军;王余德;刘武霞;覃钦博;罗凯坤;王冬武;田欣 -专利权人：湖南师范大学;湖南岳麓山水产育种科技有限公司
申请日： 2023-04-12 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明属于动物细胞学实验技术领域，具体公开了一种小龙虾胚胎染色体的制备方法，包括如下步骤：取无节幼体期的小龙虾胚胎，浸于秋水仙素溶液中，在恒温培养箱中培养，离心后弃上清，得到细胞团沉淀；再经过低渗、固定、制片、喷片、染色、镜检，即得到小龙虾胚胎染色体。本发明首次采用无节幼体期的小龙虾胚胎制备染色体，克服了取样数量的限制，同时不用解剖亲本虾，而且染色体分裂相干净，分裂相数目较多，染色体数目形态清晰，有利于染色体的组型和染色体的遗传分析；操作简单，制作周期短，成本低廉。最终，通过该方法能获得小龙虾清晰的体细胞染色体数为188条。
小龙虾胚胎染色体制备方法

[发明专利]一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法-CN202211000404.1在审
发明人：刘少军;胡方舟;钟海涛;孙宇;吴昌;张纯;王石;文明;李武辉;吴萍;龚丁斌;刘庆峰;王余德;陶敏;周毅;覃钦博;汤陈宸;罗凯坤 -专利权人：湖南师范大学;湖南岳麓山水产育种科技有限公司;湖南省鱼类苗种繁育科技有限公司
申请日： 2022-08-19 - 公布日： 2022-11-18 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明属于鱼类种质资源改良领域，公开了一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育的方法，通过人工催产获得大口黑鲈成熟卵子和翘嘴鳜精液，用Hank’s液将翘嘴鳜精液稀释，在40w紫外灯对翘嘴鳜精液进行灭活处理5‑10min后与大口黑鲈成熟卵子混合，在常温水中进行受精2‑3min，然后在4℃的冷水中进行冷处理10‑15min，再在18‑20℃水中进行静水孵化即得到雌核发育的大口黑鲈。本发明采用翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发育成功选育得到雌核发育大口黑鲈后代，生长速度和肉质方面明显强于普通大口黑鲈，在不仅为改良大口黑鲈种质资源提供了良好基础，而且在遗传育种和生物进化方面也具有重大的意义。
一种翘嘴鳜精子诱导大口黑鲈雌核发方法

[发明专利]一种草鱼与黄尾密鲴亚科间远缘杂交的方法及三倍体草鲴杂交鱼的培育方法-CN202210556780.2在审
发明人：刘少军;王余德;陶敏;覃钦博;张纯;罗凯坤 -专利权人：湖南师范大学;湖南岳麓山水产育种科技有限公司
申请日： 2022-05-20 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种草鱼与黄尾密鲴亚科间远缘杂交的方法，包括如下步骤：以草鱼为母本，黄尾密鲴为父本，进行人工催产，采用两针注射法对母本草鱼进行注射，父本黄尾密鲴进行一针注射，人工催产后获得的卵子与精子进行人工干法授精，然后流水孵化受精卵，孵化成功后经检测即获得三倍体草鲴杂交鱼。还公开了三倍体草鲴的培育方法。本发明解决了草鱼和黄尾密鲴之间远缘杂交困难的问题，催产效率高，不仅整合了草鱼与黄尾密鲴的优良性状，丰富了市场鱼类品种，而且为优良品种的选育奠定了良好基础，为后续的新型多倍体鱼的选育提供了宝贵的资源，在生物进化和鱼类遗传有种具有重要的生物学意义。
一种草鱼黄尾密鲴亚科间远缘杂交方法三倍体草鲴培育

[发明专利]人工大规模诱导雌核发育花䱻的方法及雌核发育花䱻的应用-CN202210431827.2在审
发明人：刘少军;王余德;廖安民;罗凯坤;覃钦博;陶敏;张纯 -专利权人：湖南岳麓山水产育种科技有限公司;湖南师范大学
申请日： 2022-04-22 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种人工大规模诱导雌核发育花的方法，包括如下步骤：首先挑选性成熟雄性锦鲤和雌性花进行人工催产，然后将经过紫外灭活的锦鲤精子和花卵子混合，用羽毛搅拌以激活卵子，将被激活的卵子置于0‑1℃的黄泥浆中冷休克处理20‑22min，然后依次置于4‑6℃、8‑10℃、15‑18℃水中各处理1‑2min，再将其置于水温为22‑25℃的孵化槽中孵化，经鉴定筛选后即得到二倍体的雌核发育花本发明的培育方法，可以减少温度急剧升高对受精卵的损伤，提高了受精卵的孵化率和后代存活率，有效克服了常规方法难以获得可存活雌核发育花的技术障碍，成功获得了雌核发育花群体，填补了花雌核发育技术方面的空白。
人工大规模诱导核发方法应用

[发明专利]一种杂交鳊鱼的培育方法-CN202010469957.6有效
发明人：刘少军;龚丁斌;罗凯坤;覃钦博;王跃群;徐丽慧;陶敏;张纯;赵如榕;汤陈宸;吴昌;胡方舟;王余德;王石;刘庆峰 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2020-05-28 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种杂交鳊鱼的培育方法，包括以下步骤：挑选性特征明显的、体征良好的翘嘴鳊及团头鲂专池饲养，在繁殖季节对所述亲鱼进行人工催产，自然受精，将受精卵置于孵化池中流水孵化，待鱼苗孵化完成后进行饲养，再对饲养后的鱼苗进行检测筛分，获得改良的二倍体杂交鳊鱼。本发明的培育方法，使用低剂量的催产剂进行催产，并结合自然受精，既保证了亲本的顺利催产和存活率，降低了催产成本，又保证了受精率和孵化率不受影响，整个培育过程操作简单，获得的改良二倍体杂交鳊鱼具有生长速度快、体型优美、营养丰富、耐低氧、抗病性好、抗逆性好等特点，在遗传育种和生产实践方面具有重要意义。
一种杂交鳊鱼培育方法

[发明专利]日本白鲫和红鲫杂交品系的建立方法及合方鲫2号的培育方法-CN201811288974.9有效
发明人：刘少军;刘庆峰;梁秋丽;刘俊梅;陶敏;张纯;覃钦博;王静;罗凯坤 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2018-10-31 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种日本白鲫和红鲫杂交品系的建立方法，分别以经人工诱导雌核发育得到的雌性日本白鲫和雄性红鲫为母本和父本，经杂交获得的后代进行饲养，筛选得到两性可育的二倍体合方鲫F1；培育二倍体合方鲫F1，自交繁殖后获得两性可育的合方鲫F2，至少经过两次连续自交得到两性可育的二倍体合方鲫Fn，形成遗传性状稳定、两性可育的二倍体杂交鲫品系，该品系在鱼类遗传育种和生物进化方面具有重要意义，为培育新型优良鲫鱼提供了优质的种质资源库。本发明还公开了一种合方鲫2号的培育方法，以合方鲫F1为母本，与雄性日本白鲫回交育种得到。该方法简单易操作，得到的合方鲫2号头小背高，生长速度快，肉质甜而鲜嫩，抗逆抗病能力强。
日本杂交品系建立方法合方鲫培育

[发明专利]源于远缘杂交天然雌核发育鳙鱼的规模化制备方法-CN202111671427.0在审
发明人：刘少军;王余德;覃钦博;陶敏;张纯;罗凯坤;吴昌;龚丁斌 -专利权人：湖南岳麓山水产育种科技有限公司;湖南师范大学
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种源于远缘杂交天然雌核发育鳙鱼的规模化制备方法，以鳙鱼为母本，黄尾密鲴为父本，在繁殖季节对母本注射促黄体素释放激素类似物、绒毛膜促性腺激素和垂体的混合催产剂，然后对父本亲鱼人工注射促黄体素释放激素类似物和绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行人工催产；注射完毕后待亲鱼发情后进行人工授精，流水孵化，饲养，检测筛分，即获得所述的天然雌核发育鳙鱼。本发明无需进行精子灭活及卵子加倍等技术处理就能得到雌核发育后代，明显的优势是受精率高，孵化率高，能获得大量的两性可育的天然雌核发育鳙鱼，极大的减少了育种工作量；通过该方法制备获得生长速度快，抗病强，肉质好，杂食性的两性可育的天然雌核发育鳙鱼。
源于远缘杂交天然核发育鳙鱼规模化制备方法

[发明专利]锦鲤与鳙鱼亚科间远缘杂交的方法和四倍体锦鳙的应用-CN202010582326.5有效
发明人：刘少军;王余德;姚嘉骏;谭慧芳;罗凯坤;覃钦博;张纯;陶敏;汤陈宸 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2020-06-23 - 公布日： 2022-03-08 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种锦鲤与鳙鱼亚科间远缘杂交的方法，包括如下步骤：以锦鲤为母本，鳙鱼为父本，进行人工催产，采用一针注射法对母本亲鱼注射包含LRH‑A、HCG和地欧酮的混合催产素进行催产；采用二针注射法对父本亲鱼注射包含LRH‑A和HCG的混合催产素进行催产，人工催产后获得的卵子与精子进行人工干法授精，然后流水孵化受精卵，孵化成功后即获得锦鲤和鳙鱼的杂交后代。获得的新杂交后代为淡水鱼的遗传育种提供了新的资源与基础，且整个杂交过程操作简单，选育周期短，杂交后代的孵化率和存活率高。本发明还公开了杂交后代四倍体锦鳙的应用，能够大量获得生长速度快，抗逆性强的三倍体鱼，具有很大的产业化应用前景。
锦鲤鳙鱼亚科间远缘杂交方法四倍体应用

[发明专利]一种天然雌核发育团头鲂的培育方法-CN202010470888.0有效
发明人：刘少军;龚丁斌;罗凯坤;覃钦博;王跃群;徐丽慧;陶敏;张纯;赵如榕;汤陈宸;吴昌;胡方舟;王余德;王石;刘庆峰 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2020-05-28 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种天然雌核发育团头鲂的培育方法，以团头鲂为母本，黄尾密鲴为父本，对母本亲鱼人工注射LRH‑A和HCG的混合催产剂进行人工催产，LRH‑A的剂量为8‑10μg/kg，HCG的剂量为400‑500IU/kg；先注射母本亲鱼，3h后再对父本亲鱼人工注射LRH‑A和HCG的混合催产剂进行人工催产，其注射剂量是母本亲鱼的一半，采用胸鳍基部无鳞处腹腔一针注射法；再经过人工授精、流水孵化、饲养、检测筛分，即获得天然雌核发育团头鲂。本发明的培育方法，改变了亲本的卵子及精子的活性，进而获得了两性可育的天然雌核发育团头鲂，整个培育过程中无需进行精子灭活及卵子加倍等技术处理，极大的减少了工作量。
一种天然核发育团头鲂培育方法

[发明专利]一种同源四倍体鲤品系的建立方法及选育同源三倍体鲤的方法-CN201910515851.2有效
发明人：刘少军;王石;罗凯坤;胡方舟;周佩;吴昌;龚丁斌;张纯;陶敏;覃钦博;姚占洲;赵如榕 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2019-06-14 - 公布日： 2021-07-09 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种同源四倍体鲤品系的建立方法，以鲤鱼为原始母本，团头鲂为原始父本进行杂交，杂交F1代中挑选出雌性异源四倍体鲤鲂与雄性同源二倍体类鲫，经人工催产、人工干法授精、流水孵化、专池饲养、检测筛选后得到染色体数目为200的同源四倍体鲤F1，雌、雄同源四倍体鲤F1通过多代自交传代培养，得到遗传性状稳定的同源四倍体鲤品系。获得的同源四倍体鲤具有体形优美、生长速度快、抗逆性强、繁殖力强等优点，孵化率及苗种存活率都较高，两性可育且遗传稳定。还公开了一种以二倍体鲤作为母本、同源四倍体鲤作为父本，进行倍间杂交得到同源三倍体鲤的方法。获得的三倍体鱼具有潜在不育、生长快、肉质好等优点，在生产应用上具有重要价值。
一种同源四倍体品系建立方法选育三倍

[发明专利]一种利用鲂鲌杂交品系培育杂交鲌鱼的方法-CN201911397937.6有效
发明人：刘少军;吴昌;黄旭;陈乾;胡方舟;罗凯坤;赵如榕;汤陈宸 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2019-12-30 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用鲂鲌杂交品系培育杂交鲌鱼的方法，包括如下步骤：以团头鲂为母本，以翘嘴鲌为父本进行远缘杂交，将获得的雌性鲂鲌F1与雄性团头鲂进行回交，并从获得的杂交翘嘴鲂中挑选体型上偏向于翘嘴鲌的雌性杂交翘嘴鲂与雄性翘嘴鲌进行再杂交，即获得所述的杂交鲌鱼。本发明利用已建立的鲂鲌杂交品系，通过杂交、回交、再杂交等方法，成功获得了改良的异源二倍体杂交鲌鱼，具有背高、体长、不易掉鳞、刺少、两性可育的特点，其外形与翘嘴鲌相似性高，是一种新型生物学特性稳定的杂交鲌鱼，形成了新的优质鱼类和新的种质资源，在鱼类遗传育种方面具有重要意义。
一种利用杂交品系培育方法

[发明专利]一种改良日本白鲫的选育方法及其品系的建立方法-CN201811184730.6有效
发明人：刘少军;胡方舟;吴昌;范晶晶;王石;陶敏;张纯;覃钦博;罗凯坤 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2018-10-11 - 公布日： 2021-05-11 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种改良日本白鲫的选育方法，以日本白鲫为母本，团头鲂为父本，得到的杂交后代挑选出染色体数目为148的异源四倍体鲫鲂进行人工精养、人工催产及人工干法授精，将受精卵滴水孵化后进行饲养，得到的自交后代挑选出两性可育的、染色体数目为100的改良二倍体日本白鲫。获得的改良日本白鲫不但生长迅速、繁殖率高，而且头小、体背高、肉质好、抗病力强。本发明还提供了改良日本白鲫的品系建立方法，可以获得两性可育且遗传稳定的改良日本白鲫品系，在鱼类遗传育种和生物进化方面具有重要意义，在生产应用上，该改良日本白鲫品系的建立，为培育新型优良鲫鱼提供了优质的种质资源库。
一种改良日本选育方法及其品系建立

[发明专利]通过远缘杂交选育多种彩色双尾金鱼的方法-CN201911258490.4有效
发明人：刘少军;王余德;谭慧芳;覃钦博;罗凯坤;陶敏;张纯;赵如榕;汤陈宸 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2019-12-10 - 公布日： 2021-02-12 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过远缘杂交选育多种彩色双尾金鱼的方法，包括如下步骤：以锦鲤为母本，团头鲂为父本进行远缘杂交，在其杂交后代第一代获得湘军锦鲫，从中挑选雌雄湘军锦鲫进行专池培育，通过人工催产，人工干法授精，流水孵化，直到雌雄湘军锦鲫的自交后代鱼苗点腰后，卵黄消失完，进行人工精养，从中筛选出白底红色花纹、双尾分叉、高背型的同源二倍体湘军金鱼，该湘军金鱼具有可育、生长速度快、体形优美、体色独特、抗逆能力强、繁殖力强等优点。再将湘军金鱼与自然界中的其他金鱼杂交，培育出具有不同花色，漂亮的多种彩色双尾金鱼，这些双尾金鱼具有明显的杂交优势，具有非常高的产精量和产卵量，对其他金鱼的改良具有非常重要的作用。
通过远缘杂交选育多种彩色金鱼方法

[发明专利]一种人工催产-自然交配受精-胚胎浮性流水孵化的方法-CN201910984006.X有效
发明人：刘少军;吴昌;罗凯坤;廖志元;张纯;陶敏;覃钦博;汤陈宸;王余德;胡方舟;王石;刘庆峰 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2019-10-16 - 公布日： 2021-02-02 - 主分类号： A01K61/17 文献下载
摘要：本发明公开了一种鱼类人工催产‑自然交配受精‑胚胎浮性流水孵化的方法，该方法包括如下步骤：1)对性腺发育良好的亲鱼注射催产素进行人工催产；2)将注射催产素的亲鱼放入有附着物的网箱中，待其发情追尾，并在附着物上自然产卵受精；3)将附着的受精卵转移到孵化主槽进行胚胎浮性流水孵化。相对于传统的人工授精及孵化，本发明显著提高了鱼受精卵的孵化率和下池后的成活率，降低了亲鱼损耗，减少了人工成本，适用于黏性鱼卵的连续孵化养殖，有利于提高鱼类人工养殖生产效率。本发明为鱼类遗传育种工作提供了一种新的模式，在鱼类遗传育种方面具有重要意义。
一种人工催产自然交配受精胚胎流水孵化方法

[发明专利]鳙鱼与团头鲂亚科间远缘杂交的方法-CN202010921674.0在审
发明人：刘少军;王余德;罗亚新;姚家俊;谭慧芳;赵如榕;罗凯坤;覃钦博;张纯;陶敏;汤陈宸 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2020-09-04 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： A01K61/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种鳙鱼与团头鲂亚科间远缘杂交的方法，包括如下步骤：以鳙鱼为母本，团头鲂为父本，进行人工催产，首先对母本亲鱼注射催产剂PG或LRH‑A，同时对父本亲鱼进行注射，剂量减半；隔3‑4h后再对母本亲鱼注射LRH‑A、PG和HCG组成的混合催产剂；人工催产后获得的卵子与精子进行人工干法授精，然后流水孵化受精卵，孵化成功后即获得鳙鱼和团头鲂的杂交后代。获得的新杂交后代为淡水鱼的遗传育种提供了新的资源与基础，且整个杂交过程操作简单，选育周期短，杂交后代的孵化率和存活率高，在遗产育种和产业化方面都具有重要意义。
团头鲂亚科间远缘杂交方法

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