本发明提供一种右雷佐生中间体及杂质的分离检测方法,包括如下步骤:(1)用稀释剂稀释含有中间体和杂质的右雷佐生,得试样溶液;(2)用高效液相色谱仪检测试样溶液,高效液相色谱仪的色谱柱为CAPCELL PAK ADME色谱柱。本发明所述的分离检测方法,能够将右雷佐生中间体M2、中间体M1及杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F进行有效分离,各峰之间可以实现良好的基线分离,当流动相流速或色谱柱柱温控制恰当时,大部分中间体和杂质的峰分离度均大于3.0,整体分离度高,从而可以有效控制右雷佐生及其中间体的质量。