本发明涉及基因工程及分子生物学领域，提供一种KRAS基因检测引物组，包括用于对KRAS基因含condon12、condon13以及condon61位点的核酸片段进行特异性扩增的引物组，其特征在于，所述引物组包括上游引物SEQ ID NO:1和下游引物SEQ ID NO:2。本发明还提供了一种基因检测试剂盒及检测方法。本发明的基因检测引物组能够对含上述待测位点的核酸片段进行特异性扩增，使得基因突变检测灵敏度高、假阳性率低；本发明采用第二代高通量基因测序技术对待测位点的基因型进行检测，使得检测周期短，通量高。
本发明提供了一种检测神经母细胞瘤复发转移基因FZD2扩增的引物探针及其应用，所述引物探针序列分别为目的基因上游引物序列FZD2‑F：SEQ ID No:1 5’‑TTTCTGTCGGGCTGCTACAC‑3’、目的基因下游引物序列FZD2‑R：SEQ ID No:2 5’‑GTAACCGTCCTCGGAGAAGC‑3’、目的基因探针序列FZD2‑P：SEQ ID No:3 5’‑FAM‑GCTCCAGGAGCGCGTGGTGTGCA‑BHQ1‑3’、内参基因上游引物序列EFTUD2‑F：SEQ ID No:4 5’‑CTCAAAGTGCGGGGACTGAT‑3’、内参基因下游引物序列EFTUD2‑R：SEQ ID No:5 5’‑GGCATCAGGGTGACTCCAAA‑3’、内参基因探针序列EFTUD2‑P：SEQ ID No:6 5’‑HEX‑AGCCTGCTTCCTGGGAATGTGCTGCT‑BHQ1‑3’。上述引物探针用于数字PCR试剂盒。本发明试剂盒能快速、特异、灵敏地检测FZD2基因扩增，该试剂盒一步法扩增方法简单、成本低廉，非常适用于肿瘤组织、循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA等各种样本中的基因拷贝数变异情况，适合大范围推广应用。
本发明提供了一种检测乳腺癌复发转移基因HER2扩增的引物探针及其应用，所述引物探针序列分别为目的基因上游引物序列FZD2‑F：SEQ ID No:1 5’‑GTGTGGCAGTTCAGCCCTAT‑3’、目的基因下游引物序列FZD2‑R：SEQ ID No:2 5’‑AATGTGTGCCACGAAACTGC‑3’、目的基因探针序列FZD2‑P：SEQ ID No:3 5’‑FAM‑GGCTGATGGCTCGCGCTGGGCA‑BHQ1‑3’、内参基因上游引物序列EFTUD2‑F：SEQ ID No:4 5’‑CTCAAAGTGCGGGGACTGAT‑3’、内参基因下游引物序列EFTUD2‑R：SEQ ID No:5 5’‑GGCATCAGGGTGACTCCAAA‑3’、内参基因探针序列EFTUD2‑P：SEQ ID No:6 5’‑HEX‑AGCCTGCTTCCTGGGAATGTGCTGCT‑BHQ1‑3’。上述引物探针用于数字PCR试剂盒，试剂盒能快速、特异、灵敏地检测HER2基因扩增。该试剂盒一步法扩增方法简单、成本低廉，非常适用于肿瘤组织、循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA等各种样本中的基因拷贝数变异情况，适合大范围推广应用。
本发明提供了一种检测神经母细胞瘤复发转移基因WNT2扩增的引物探针及其应用，所述引物探针序列分别目的基因上游引物序列WNT2‑F：SEQ ID No:1 5’‑GCGTGGACTTACCACCATGA‑3’、目的基因下游引物序列WNT2‑R SEQ ID No:2 5’‑CTCTCGGTGGAATCTGGCTC‑3’、目的基因探针序列WNT2‑P：SEQ ID No:3 5’‑FAM‑TGACCTCGGGGGTGAGCCAGGTCA‑BHQ1‑3’、内参基因上游引物序列EFTUD2‑F：SEQ ID No:4 5’‑CTCAAAGTGCGGGGACTGAT‑3’、内参基因下游引物序列EFTUD2‑R：SEQ ID No:5 5’‑GGCATCAGGGTGACTCCAAA‑3’、内参基因探针序列EFTUD2‑P：SEQ ID No:6 5’‑HEX‑AGCCTGCTTCCTGGGAATGTGCTGCT‑BHQ1‑3’。上述引物探针用于数字PCR试剂盒。本发明试剂盒能快速、特异、灵敏地检测WNT2基因扩增，该试剂盒一步法扩增方法简单、成本低廉，非常适用于肿瘤组织、循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA等各种样本中的基因拷贝数变异情况，适合大范围推广应用。
