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[发明专利]一种含有重组乙肝病毒基因的真核汉逊酵母工程菌的构建及乙肝表面抗原的生产方法-CN201610137245.8有效
发明人：黄恩启;吴常伟;李超;王力卫;刘术敏;程英杰;陶立峰;杨世龙 -专利权人：安徽智飞龙科马生物制药有限公司;重庆智飞生物制品股份有限公司;北京智飞绿竹生物制药有限公司
申请日： 2016-03-11 - 公布日： 2019-08-23 - 主分类号： C12N15/51 文献下载
摘要：本发明公开一种含有重组乙肝病毒基因的真核汉逊酵母工程菌的构建及乙肝表面抗原的生产方法，属于生物工程技术领域，构建方法包括：步骤1，构建含有重组乙型肝炎病毒HBsAg基因的质粒pHPZF1.0‑ZS；步骤2，筛选得到表达水平最高的含有重组乙肝病毒HBsAg基因的真核汉逊酵母工程菌。采用本发明所述构建及生产方法，可以获得的乙型肝炎表面抗原汉逊酵母酵母工程菌株能够以甲醇诱导型方式稳定和高效地表达HBsAg重组蛋白，适用于规模化生产HBsAg重组蛋白。
一种含有重组乙肝病毒基因真核汉逊酵母工程构建乙肝表面抗原生产方法

[发明专利]一种汉逊酵母特异性表达载体的构建及在提高乙肝病毒表面抗原在汉逊酵母表达量的方法-CN201610137206.8有效
发明人：黄恩启;吴常伟;李超;王力卫;刘术敏;程英杰;陶立峰;杨世龙 -专利权人：安徽智飞龙科马生物制药有限公司;重庆智飞生物制品股份有限公司;北京智飞绿竹生物制药有限公司
申请日： 2016-03-11 - 公布日： 2019-08-23 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开一种汉逊酵母特异性表达载体的构建及在提高乙肝病毒表面抗原在汉逊酵母表达量的方法，属于生物工程技术领域，构建：步骤1，从真核汉逊酵母菌株ATCC34438或其衍生菌种基因组DNA，设计特异性引物，PCR扩增，分别调取MOX基因启动子MOXp和终止子MOX‑TT；步骤2，将毕赤酵母表达载体pPICZC上的启动子AOX1和终止子AOX‑TT，分别替换成MOX基因启动子MOXp和终止子MOX‑TT，即得汉逊酵母表达载体pHPZF1.0。采用本发明所述方法，可以获得的乙型肝炎表面抗原汉逊酵母酵母工程菌株能够以甲醇诱导型方式稳定和高效地表达HBsAg重组蛋白，适用于规模化生产HBsAg重组蛋白。
一种酵母特异性表达载体构建提高乙肝病毒表面抗原方法

[发明专利]一种汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的分离纯化方法及其应用-CN201610137254.7在审
发明人：黄恩启;吴常伟;李超;王力卫;刘术敏;程英杰;陶立峰;杨世龙 -专利权人：安徽智飞龙科马生物制药有限公司
申请日： 2016-03-11 - 公布日： 2016-06-22 - 主分类号： C07K14/02 文献下载
摘要：本发明公开一种汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的分离纯化方法及其应用，属于生物工程技术领域，纯化方法包括：1）汉逊酵母细胞的搅拌破碎；2）将步骤1）中得到悬液阴离子交换层析；3）将步骤2）得到层析悬液稀释；4）步骤3)中悬液阳离子交换层析；5）经步骤4）中阳离子交换层析所得组分，浓缩；6）将步骤5）得到的浓缩液使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤。采用本发明所述方法，可以将汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原高效的分离和纯化，适用于规模化生产HBsAg重组蛋白，同时能有效的用于生产乙肝疫苗。
一种酵母表达重组乙肝表面抗原分离纯化方法及其应用

[实用新型]浮动铰刀-CN201220667784.X有效
发明人：赵聪敏;王力卫 -专利权人：中国南方航空工业（集团）有限公司
申请日： 2012-12-06 - 公布日： 2013-07-10 - 主分类号： B23D77/00 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种浮动铰刀，浮动铰刀的中心为圆柱体，圆柱体的周缘上均匀向外延伸有多个刀齿，每一个刀齿的顶端设有刃带面，刃带面为一段平滑的弧段，多条刃带面的弧段均分布在与浮动铰刀中心线同轴的同一圆周面上；每一个刀齿的前端还设有前角，前角为圆弧前角，刃带面设置于前角的顶端。本实用新型的有益效果：刀齿的前端设有刃带面，刃带面可避免浮动铰刀进入已扩孔的孔口瞬间出现振刀现象，同时还可以边切边挤待加工的孔壁，如同磨削。圆弧状的前角可将切屑卷曲，避免排屑过程中划伤孔壁，提高铰削精度。此外，本浮动铰刀无需对机床主轴定心便可加工表面粗糙度为Ra0.4左右的孔径，浮动铰刀的主轴转速和进给量均提高，提高了生产效率。
浮动铰刀

[实用新型]用于固定内螺纹量环的夹具-CN201020161141.9有效
发明人： 王力卫 -专利权人：中国南方航空工业(集团)有限公司
申请日： 2010-04-16 - 公布日： 2011-02-16 - 主分类号： B23G1/44 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种用于固定内螺纹量环的夹具，包括：花盘，具有安装端面，且在安装端面上设置有至少两个径向延伸的定位导向槽；定位块，可滑动地卡设在定位导向槽内，以及紧固件，与定位块连接，使紧固件与安装端面之间形成夹持空间。根据本实用新型的用于固定内螺纹量环的夹具，可以把M30以上的内螺纹量环方便地装夹至数控磨床上，使内螺纹量环受到均匀的压紧力，避免了内螺纹量环的夹紧变形，而且便于找正内螺纹量环的内孔跳动。
用于固定螺纹夹具