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[发明专利]产环磷腺苷的节杆菌及其应用-CN202011297507.X有效
发明人：曹华杰;刘晓东;李静;张孟涛;刘帅;滕佳佳;朱创业;宋会文 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2020-11-19 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于发酵生产环磷腺苷的节杆菌，该菌已于2017年03月23日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心。本发明还公开了所述节杆菌为发酵生产环磷腺苷的方法，包括斜面、种子和发酵培养所需的培养基和培养条件。本发明菌的环磷腺苷产量高，具有良好工业化前景。
产环磷腺苷杆菌及其应用

[发明专利]一种改善羟脯氨酸发酵前期溶菌的方法-CN201910865635.0有效
发明人：张孟涛;徐倩;封浪;张磊鹏;刘永超;马辉 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2019-09-12 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12Q1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种改善羟脯氨酸发酵前期溶菌的方法，属于发酵技术领域，所述方法首先收集羟脯氨酸发酵过程中污染的噬菌体，将收集到的噬菌体对羟脯氨酸发酵液进行侵染，分离纯化侵染后长出的羟脯氨酸菌株，挑选种子进行上罐验证，筛选出优良菌株进行发酵生产。在本发明的羟脯氨酸菌株经噬菌体侵染后，种子活力明显提升，发酵过程中不易受到噬菌体的侵染，有效改善了羟脯氨酸发酵前期易产生自溶的情况。
一种改善羟脯氨酸发酵前期方法

[发明专利]一种细胞培养基用L-色氨酸的纯化方法-CN202310481984.9在审
发明人：刘博超;刘晓东;张俊超;滕佳佳;李正帅;张豪超 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C07D209/20 文献下载
摘要：本发明属于生物医药领域，具体涉及一种细胞培养基用L‑色氨酸的纯化方法。本发明对含有L‑色氨酸的发酵液经过陶瓷膜、纳滤、浓缩得到色氨酸结晶浆料；将其进行降温结晶处理，得到湿晶体和一次母液；得到的湿晶体经重溶后色谱分离、炭脱精制、浓缩结晶、离心获得精制色氨酸晶体和二次母液。精制色氨酸晶体经过醇溶、离心、烘干得高纯色氨酸成品。该方法具有具有操作性强、纯度高、反应条件温和、低碳环保等优点，克服了现有技术在制取高纯色氨酸时杂质去除不彻底、高浓度废水量大等缺点，产品可完全达到进口默克sigma质量标准。
一种细胞培养基色氨酸纯化方法

[发明专利]一种分离纯化细胞培养基用L-组氨酸的方法-CN202310481983.4在审
发明人：刘博超;刘晓东;张俊超;滕佳佳;李正帅;张豪超 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C07D233/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离纯化细胞培养基用L‑组氨酸的方法，属于生物医药领域。本发明将发酵液经过陶瓷膜将蛋白分离出来，获得的清液经过色谱纯化、纳滤、脱色后制得粗品，重结晶而得到产品。用本发明方法得到的产品，比旋光度可达到+12.1°~+12.8°，含量达到99.8%~101.5%，可完全达到进口默克sigma质量标准。该方法具有条件温和、操作简便、分离步骤少、选择性好，清洁生产等特点，克服了现有技术存在的收率不高、污水排量大及生产强度大的缺点，并且使L‑组氨酸的收率和质量显著提高。
一种分离纯化细胞培养基组氨酸方法

[发明专利]一种降低L-组氨酸发酵液粘度的方法-CN202011618904.2有效
发明人：李闯;曹华杰;李静 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12P13/24 文献下载
摘要：本发明涉及一种降低L‑组氨酸发酵液粘度的方法，属于发酵工程技术领域。本发明在发酵培养基中添加高浓度氯化钾，所述氯化钾浓度为5‑15g/L，然后在发酵过程中补入0.1‑1.0g/L灭菌胰蛋白酶溶液进行混合发酵。本发明在发酵过程中解决料液粘稠问题，通过添加高浓度氯化钾提高菌体渗透液，补加胰蛋白酶不但可以降低发酵液中胞外蛋白多糖的含量，降低粘度改善溶解氧而且水解蛋白后生成多种氨基酸又可以被菌体再次利用，有效提高L‑组氨酸发酵单位，由原来30g/L提高到45g/L。
一种降低组氨酸发酵粘度方法

[发明专利]一种提高腺苷发酵产量的方法-CN202011618924.X有效
发明人：曹华杰;刘小都;孙超超 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12P19/40 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高腺苷发酵产量的方法，属于发酵工程技术领域。本发明方法以枯草芽孢杆菌为生产菌株，发酵培养基通过添加一定量的酵母浸粉和异亮氨酸，使发酵后期腺苷产量持续增长，从而使腺苷的产量提高至60.7g/L，与未使用该方法相比产量提高43.5%。该方法不仅可以提高腺苷的产量，发酵过程简单无需补料，减少染菌几率，非常适合工业化生产。
一种提高腺苷发酵产量方法

[发明专利]一种腺苷一次母液回收方法-CN201911193619.8有效
发明人：漫磊磊;曹华杰;刘晓东;黄武涛;陈延超;滕佳佳;马辉 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2019-11-28 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C07H19/167 文献下载
摘要：本发明属于腺苷制备技术领域，具体涉及一种腺苷一次母液回收方法。该方法采用的步骤是腺苷一次母液先升温，再调节pH值，继续活性炭吸附后压滤，压滤清液蒸发浓缩后固液分离，最后腺苷粗品提纯得到腺苷成品。
一种腺苷一次母液回收方法

[发明专利]发酵生产L-瓜氨酸的大肠杆菌基因工程菌、构建方法和应用-CN202211159843.7在审
发明人：吴亚东;刘晓东;刘帅;王灿;李艳丹;宋会文;王军军 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2022-09-22 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明发酵生产L‑瓜氨酸的大肠杆菌基因工程菌、构建方法和应用，属于基因工程技术领域，对大肠杆菌W3110中编码谷氨酸脱氢酶的gdhA基因、谷氨酸‑丙酮酸氨基转移酶的alaA和编码L‑精氨酸ABC转运蛋白ATP结合亚基的artP基因进行过表达；同时对编码精胺琥珀酸合成酶的argG基因和编码精氨琥珀酸裂解酶的argH基因进行敲除，采用获得的基因重组菌株进行发酵生产L‑瓜氨酸，产酸量较高，可应用于工业生产。
发酵生产瓜氨酸大肠杆菌基因工程构建方法应用

[发明专利]一株粘质沙雷氏菌突变株以及发酵生产组氨酸的方法-CN202010237470.5有效
发明人：李静;刘晓东;张孟涛;滕佳佳;张兆昆;宋会文 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2020-03-30 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一株粘质沙雷氏菌突变株以及发酵生产组氨酸的方法，属于发酵工程技术领域。所述粘质沙雷氏菌突变株是通过诱变筛选获得的，其具有如下特征：①组氨酸酶缺陷；②ATP‑磷酸核糖基转移酶158位的丙氨酸突变为苯丙氨酸，252位的苏氨酸突变为谷氨酰胺，271位的谷氨酸突变为赖氨酸；③具有组氨酸结构类似物以及嘌呤结构类似物抗性。该突变株在50 L发酵罐中经过45 h发酵，组氨酸产量达到40 g/L，糖酸转化率可达16%。
一株粘质沙雷氏菌突变以及发酵生产组氨酸方法

[发明专利]一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产核黄素收率的方法-CN201911202810.4有效
发明人：曹华杰;李静;谢沛;李闯;张孟涛;刘晓东;魏志娟 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12P25/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产核黄素收率的方法，属于基因工程技术领域，所述方法通过对核黄素生产菌株进行遗传修饰，去除胞内高水平GTP对pyr operon的激活机制，将pyr operon的表达稳定在低水平，以减少嘧啶核苷酸从头合成途径的代谢通量，增大PRPP进入嘌呤核苷酸合成途径的比例，从而提高核黄素的产量和收率，降低核黄素发酵成本。
一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产核黄素收率方法

[发明专利]一种核黄素的发酵培养基及其发酵方法-CN201811602382.X有效
发明人：张磊鹏;刘博超;封浪;张向国;任向阳;上官同岗 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12P25/00 文献下载
摘要：本发明提供一种核黄素的发酵培养基及其发酵方法，所述发酵培养基中添加有叶酸和氟化钠，该发酵培养基添加叶酸和氟化钠为菌体代谢提供缺乏的营养物质，解除糖酵解途径中对原料的浪费，促进HMP途径的代谢强度，有利于代谢目标产物的高效合成，利用该发酵培养基的核黄素的发酵方法为：将发酵种子液转接至装有核黄素的发酵培养基的发酵罐中培养60～70h，且在发酵罐中分阶段控制发酵液中葡萄糖的浓度，前40h维持葡萄糖浓度为1.0‑1.5%，40h至下罐维持葡萄糖浓度0.5‑1.0%，保证各阶段适当的葡萄糖浓度，降低葡萄糖浓度过高或过低对菌体代谢核黄素的影响，利用该方法进行核黄素发酵，可以使核黄素的产量提高至34.6g/L，与未使用该方法相比产量提高76.53%，发酵周期缩短，减少成本。
一种核黄素发酵培养基及其方法

[发明专利]一种α-酮戊二酸的制备方法-CN201810257243.1有效
发明人：谢沛;曹华杰;刘帅;王卫富 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2018-03-27 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12P7/50 文献下载
摘要：本发明涉及一种α‑酮戊二酸的制备方法，属于生物工程技术领域，该方法包括发酵生产和提取，所述发酵生产是将大肠杆菌于发酵培养到OD660nm生长到10~20，向发酵培养基中添加乳糖继续诱导培养，离心收集湿菌体；以L‑谷氨酸或L‑谷氨酸盐、硫酸锰、过氧化氢酶和湿菌体组成转化体系，调整转化体系的pH值为4‑8，在温度为20~40℃、转速为100‑400rpm和风量为10~25L/min的条件下转化20‑30h，得转化液；所述提取是将转化液经过滤、纯化、脱色、浓缩和结晶得α‑酮戊二酸。本发明主要优化发酵和转化条件，缩短生产周期，提高α‑酮戊二酸的产量和收率，适合工业上的放大性生产。
一种酮戊二酸制备方法

[发明专利]一株丙氨酸发酵用菌株-CN201910654393.0有效
发明人：李国栋;杨佳丽;曹华杰;宋书怡;袁保梅;邱建平 -专利权人：郑州大学;河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2019-07-19 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本申请属于丙氨酸发酵技术领域，具体涉及一株丙氨酸发酵用菌株专利申请事宜。该菌株菌种为大肠埃希氏菌Escherichia coli，命名为：大肠埃希氏菌HNZZ3728；菌株保藏号为：CGMCC NO.17166。本申请中，通过对筛选所得菌株的产L‑丙氨酸发酵能力的初步优化，初步结果表明这一菌株的L‑丙氨酸生产能力可达到45.8g/L，虽然实际产量方面不及部分基因改造菌株，但鉴于该菌株为原始筛选所得菌株，因此对其进一步改造或者进一步对发酵工艺优化后，其实际产量应原高于现有其他菌株，因此具有较好的保护和应用价值。
丙氨酸发酵菌株

[发明专利]一种高产胞苷的大肠杆菌突变株以及发酵生产胞苷的方法-CN202010188550.6有效
发明人：李静;李国栋;刘晓东;张孟涛;滕佳佳;张兆昆;宋会文 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司;郑州大学
申请日： 2020-03-17 - 公布日： 2021-12-31 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种高产胞苷的大肠杆菌突变株以及发酵生产胞苷的方法，属于发酵技术领域，该大肠杆菌突变株是通过诱变筛选获得的，其具有如下特征：①氨甲酰磷酸合成酶182位的丙氨酸突变为缬氨酸，948位的丝氨酸突变为苯丙氨酸；②天冬氨酸氨甲酰转移酶调节亚基86位的异亮氨酸、93位的甘氨酸、109位的半胱氨酸缺失；③尿苷酸激酶72位的天冬酰胺突变为丙氨酸，159位的天冬氨酸突变为天冬酰胺；④胞苷三磷酸合成酶147位天冬氨酸突变为谷氨酸，149位谷氨酸突变为丙氨酸。该突变株在50 L发酵罐中经过发酵，胞苷产量达到90±2 g/L，糖酸转化率可达30±1%，均为现有报道的最高值。
一种高产大肠杆菌突变以及发酵生产方法

[发明专利]一种对发酵法L-色氨酸直接进行提取的工艺-CN201911124876.6有效
发明人：张孟涛;曹华杰;刘晓东;滕佳佳;马辉 -专利权人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
申请日： 2019-11-18 - 公布日： 2021-09-24 - 主分类号： C07D209/20 文献下载
摘要：本发明属于色氨酸制备技术领域，具体涉及一种对发酵法L‑色氨酸直接进行提取的工艺。该工艺的步骤为L‑色氨酸发酵液微滤膜过滤‑滤清液加活性炭脱色‑蒸发浓缩‑浓缩液脱色‑育晶‑干燥。本发明的工艺简化了提取步骤，缩短了提取时间，提高了收率。
一种发酵色氨酸直接进行提取工艺

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