本发明公开了一种ALV‑K的ELISA检测试剂盒及其检测方法。该蛋白的编码序列如SEQ ID NO.1所示。通过编码SEQ ID NO.1的基因克隆到表达载体上,得到重组表达载体;将重组表达载体转化到宿主细胞中进行表达纯化,得到重组HIS‑K‑gp85蛋白。以重组HIS‑K‑gp85蛋白为抗原免疫大耳兔获得兔多抗KE7,并以此建立了一种ALV‑K的ELISA检测试剂盒及其检测方法。本发明通过对gp85基因重组,成功构建重组表达载体pET‑28a‑ALV‑K‑gp85,获得了可溶性重组HIS‑K‑gp85蛋白;本发明建立的ALV‑K的ELISA检测方法,可信度高,特异性强,敏感度高,重复性好。