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[发明专利]蛋白纯化的系统和方法-CN202010460856.2有效
发明人：倪楠;张赶;梁泊宁;杨晓明;叶峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2020-05-27 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： C07K1/36 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白质纯化技术领域，尤其是涉及一种蛋白纯化的系统和方法。蛋白纯化的系统，包括深层过滤单元、层析单元和蠕动泵；所述蠕动泵的蠕动泵管的出口连接于所述深层过滤单元的入口；所述深层过滤单元的出口连接于所述层析单元的入口；所述层析单元包括层析膜和/或层析柱；所述深层过滤单元包括深层过滤膜；所述深层过滤膜的膜面积与所述层析膜的膜体积之比为1m2﹕(100～110)mL；所述深层过滤膜的膜面积与所述层析柱的柱体积之比为1m2﹕(0.8～10)L。本发明通过采用深层过滤膜与层析膜和/或层析柱配合，可同时处理多个步骤，极大的提高了生产效率；并且，无需采用现有的全自动化的层析系统，降低了生产成本。
蛋白纯化系统方法

[发明专利]采用亲和层析纯化减少抗体聚集的方法-CN202110373715.1在审
发明人：徐晓渊;张赶;梁泊宁;周佳豪;王贵卫;蔡子健;杨晓明;叶峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2021-04-07 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明涉及抗体纯化技术领域，尤其是涉及一种采用亲和层析纯化减少抗体聚集的方法。采用亲和层析纯化减少抗体聚集的方法，包括如下步骤：采用洗脱缓冲液洗脱亲和层析捕获的目标蛋白；洗脱缓冲液选自pH3.4～3.8的NaAc‑HAc缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和精氨酸缓冲液中的至少一种；NaAc‑HAc缓冲液的浓度为45～100mM，甘氨酸缓冲液的浓度为0.01～1.0M，柠檬酸缓冲液的浓度为20～100mM，精氨酸缓冲液的浓度为0.01～1.0M。本发明提供多种适于亲和层析过程的洗脱缓冲液，可保护目标蛋白，减少亲和层析洗脱后低pH灭活时抗体的聚集，极大的提高目标蛋白的纯度，稳定目标蛋白。
采用亲和层析纯化减少抗体聚集方法

[发明专利]一种抗体的纯化方法-CN201811332129.7有效
发明人：金雄华;徐志豪;汤炜;梁泊宁 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2018-11-09 - 公布日： 2021-02-12 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种抗体的纯化方法。一种抗体的纯化方法，包括蛋白A亲和层析步骤；所述蛋白A亲和层析的方法为：在上样之后和用洗脱液洗脱目标抗体之前，先用中间清洗缓冲液洗涤柱床；所述中间清洗缓冲液为：pH值为5‑6，电导率为20‑100mS/cm的缓冲液。本发明通过在蛋白A亲和层析过程中增加中间清洗的步骤提高了对HCP、DNA的去除能力，进而提高了阴离子交换层析去病毒的能力。
一种抗体纯化方法

[实用新型]用于切向流过滤的样品混合装置-CN202020080809.0有效
发明人：王贵卫;杨晓明;金雄华;徐志豪;梁泊宁;方峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2020-01-14 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： B01F13/08 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种用于切向流过滤的样品混合装置，涉及切向流过滤技术领域，本实用新型提供的用于切向流过滤的样品混合装置，包括：切向流过滤组件和磁力搅拌组件，磁力搅拌组件包括：磁力驱动器件和磁力搅拌子，磁力搅拌子设置在切向流过滤组件内，且磁力搅拌子位于磁力驱动器件的磁场中。本实用新型提供的用于切向流过滤的样品混合装置，可以缓解切向流过滤过程中样品混合不均匀的技术问题。
用于流过样品混合装置

[发明专利]样品调节设备及样品调节方法-CN202010411033.0在审
发明人：张赶;徐晓渊;梁泊宁;杨晓明;叶峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2020-05-14 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： G01N1/38 文献下载
摘要：本发明提供了一种样品调节设备及样品调节方法，涉及样品调节技术领域，本发明提供的样品调节设备，包括：混合容器、收集容器、第一液泵和导流阀组；第一液泵的进液管与混合容器流体连通，混合容器的回流口和收集容器分别连接导流阀组；导流阀组用于使混合容器的回流口和收集容器择一与第一液泵的出液管流体连通。本发明提供的样品调节设备，可以将混合容器内的样品试剂混合均匀并输送至收集容器。
样品调节设备方法

[发明专利]连续上样设备及连续上样方法-CN202010409943.5在审
发明人：张赶;周佳豪;梁泊宁;杨晓明;叶峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2020-05-14 - 公布日： 2020-08-14 - 主分类号： B01D61/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种连续上样设备及连续上样方法，涉及上样设备技术领域，本发明提供的连续上样设备，包括：供样器件、第一过滤器、第二过滤器和第一阀组，第一过滤器和第二过滤器分别连接第一阀组，第一阀组用于控制第一过滤器和第二过滤器交替与供样器件流体连通。本发明提供的连续上样设备，可以连续进行样品输送。
连续设备方法

[发明专利]细胞发酵液的澄清处理方法及抗体的分离纯化方法-CN202010326035.X在审
发明人：富敏霞;方峰;周佳豪;梁泊宁;杨晓明;叶峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2020-04-23 - 公布日： 2020-08-07 - 主分类号： C07K1/34 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白质分离技术领域，尤其是涉及一种细胞发酵液的澄清处理方法及抗体的分离纯化方法。细胞发酵液的澄清处理方法，包括如下步骤：采用深层过滤的方式对含目标抗体的细胞发酵液进行澄清处理，收集滤出液；其中，预先调节所述发酵液的pH至4.5～7.0。抗体的分离纯化方法：采用所述的方法对细胞发酵液进行澄清处理后，对所述滤出液进行阳离子交换层析处理。本发明通过调节降低发酵液pH值能够提高深层过滤的杂质去除率；并且，调节pH值在特定范围内，能够进一步提高深层过滤器件的载量，提高对细胞、细胞碎片、DNA以及HCP的截留率；同时采用阳离子交换层析作为捕获步骤，可大大降低抗体的整个生产成本。
细胞发酵澄清处理方法抗体分离纯化

[发明专利]一种连续流层析上样量的确定方法及其应用-CN201811524322.0有效
发明人：张赶;富敏霞;梁泊宁 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2018-12-13 - 公布日： 2019-09-27 - 主分类号： G16B25/00 文献下载
摘要：本发明涉及抗体纯化技术领域，尤其是涉及一种连续流层析上样量的确定方法及应用。连续流层析上样量的确定方法，包括如下步骤：将目标蛋白纯品制成上样液，上样获取穿透曲线；按照公式计算蛋白穿透量获取穿透曲线中C/C₀＝a的数据点对应的DBC为穿透载量b；获取蛋白穿透量P_n＝100b±10或P_n＝200b±10时的数据点对应的X，上样量为γ(X‑b)或γ(X‑2b)；其中，a≤5％，0.8≤γ≤1。本发明能够准确给出不同条件下的上样量，以兼顾收率和填料载量，可用于各类蛋白的分离纯化等，确定方法简单，无需积分处理等软件，具有便利性、操作学和易学性。
上样层析穿透蛋白穿透曲线数据点不同条件分离纯化公式计算积分处理抗体纯化目标蛋白便利性上样液可用收率应用

[发明专利]蛋白A亲和层析法纯化抗体的方法以及抗体的纯化方法-CN201811332123.X在审
发明人：金雄华;汤炜;梁泊宁;徐志豪 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2018-11-09 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种蛋白A亲和层析法纯化抗体的方法以及抗体的纯化方法。蛋白A亲和层析法纯化抗体的方法：循环利用以下蛋白A亲和层析柱纯化目标抗体：填料为MabSelect LX、Amsphere A3或Praesto Jetted A50，柱高为5～15cm，线性流速为200～500cm/h；在用洗脱液洗脱目标抗体之前，先用pH值为5～6，电导率为20～100mS/cm的缓冲液洗涤柱床。本发明通过选用载量高、传质能力好、运行流速快的填料，既降低了介质成本，又提高了纯化效率；还通过增加中间清洗的步骤提高了对HCP、DNA的去除能力，进而提高了阴离子交换层析去病毒的能力。
蛋白A亲和层析抗体目标抗体阴离子交换层析电导率缓冲液洗涤传质能力线性流速循环利用洗脱液柱纯化去除洗脱柱床清洗病毒

[发明专利]阳离子交换层析法纯化抗体的方法-CN201811333478.0在审
发明人：方峰;梁泊宁;汤炜;周佳豪 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2018-11-09 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明涉及抗体纯化技术领域，尤其是涉及一种阳离子交换层析法纯化抗体的方法。所述方法包括如下步骤：对抗体溶液进行阳离子交换层析处理，调节抗体溶液的pH为5.0‑7.0、电导率为3‑20mS/cm进行上样，平衡缓冲液的pH为5.0‑7.0、电导率为3‑20mS/cm，采用流穿模式或过载模式进行纯化。本发明利用阳离子交换层析法纯化抗体，调节抗体溶液和平衡缓冲液的pH和电导率，使目标抗体单体不能或极少量与阳离子层析柱或膜结合，随流穿液流出，而杂质成分能够与层析柱或膜结合，以达到抗体纯化的目的；同时抗体的得率可达到90％以上。
抗体阳离子交换层析法电导率平衡缓冲液抗体纯化抗体溶液膜结合阳离子交换层析阳离子层析柱过载模式目标抗体层析柱流穿液得率上样流出对抗

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