本发明属于生物检测技术领域,具体公开了布鲁氏菌病的外泌体miRNA标志物,包括hsa‑miR‑11400、hsa‑miR‑199a‑5p或hsa‑miR‑148a‑5p中的一种或两种以上;hsa‑miR‑11400的核苷酸序列为SEQ ID NO:3,hsa‑miR‑199a‑5p的核苷酸序列为SEQ ID NO:5,hsa‑miR‑148a‑5p的核苷酸序列为SEQ ID NO:7。本发明还公开了上述用于检测上述布鲁氏菌病的外泌体miRNA标志物的试剂在制备检测试剂盒中的应用,以及用于检测布鲁氏菌病的外泌体miRNA标志物的试剂在制备检测试剂盒中的应用。本发明公开的在布鲁氏菌病中具有诊断潜力,为布鲁氏菌病提供潜在的诊断生物标志物。