本发明公开了一种异丁香酚单加氧酶突变体IEM‑F305W‑L470E、工程菌及应用,属于生物技术领域。异丁香酚单加氧酶基因来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida),其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述突变体是在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第305位、第470位发生单突变或多位点突变获得的。本发明构建的异丁香酚单加氧酶并构建工程菌株,筛选到的突变体酶活较原始最高提高634.6%,并用于对羟基苯甲醛的酶法合成,产物浓度最高可达2.48g/L,转化率最大可达81.3%。
本发明公开了一种异丁香酚单加氧酶突变体、工程菌及应用,属于生物技术领域。异丁香酚单加氧酶基因来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida),其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述突变体是在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列59位、第216位、第304位发生单突变或多位点突变获得的。本发明构建的异丁香酚单加氧酶并构建工程菌株,筛选到的突变体酶活较原始最高提高445.7%,并用于对羟基苯甲醛的酶法合成,产物浓度最高可达1.27g/L,转化率最大可达41.6%。