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[发明专利]促植物生长的青霉菌发酵物有机提取物的制备及其应用-CN202211055504.4在审
发明人：王建光;付坚;陈穗云;代瑾然;李妤;廖菊够;焦梦婷;马丹;唐菊 -专利权人：云南大学
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： A01N63/36 文献下载
摘要：本发明公开了促植物生长的青霉菌发酵物有机提取物的制备及其应用，涉及生物技术领域，针对现有的无法将青霉菌发酵物中促进植物生长的有效成份分离出来。现提出如下方案，其包括青霉菌发酵物有机提取物，将青霉菌发酵物经过100℃高温烘干，加入甲醇萃取后，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯提取物再经硅胶柱分离，便可以得到青霉菌发酵物的有机提取物。本发明提供的一种促植物生长的青霉菌发酵物有机提取物及其制备的方法和应用，该方法操作简单、成本低，将青霉菌发酵物变废为宝，实现了有机废弃物的资源化。
植物生长青霉发酵有机提取物制备及其应用

[发明专利]一种复合花粉介质、万寿菊复合介质花粉及其制备方法和应用-CN202210863357.7有效
发明人： 廖菊够;陈穗云;王继华;段青;舒洁 -专利权人：云南大学
申请日： 2022-07-20 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： A01N65/38 文献下载
摘要：本发明属于植物花粉制备技术领域，具体涉及一种复合花粉介质、万寿菊复合介质花粉及其制备方法和应用。本发明所述复合花粉介质以假酸浆种子为固体分散剂，且由于其富含氨基酸、脂类和小分子等天然花粉促萌发生长因子，具备等同于促花粉萌发生长因子的作用，可显著提高花粉的萌发率和花粉使用效率；同时在复合花粉介质中外源添加惰性分子多糖和促花粉萌发因子，与假酸浆种子复配得到复合花粉介质可促进万寿菊花粉萌发、提高万寿菊授粉使用效率和万寿菊种子产量。
一种复合花粉介质万寿菊及其制备方法应用

[发明专利]一种产黄青霉菌灭活菌丝体多糖及其提取方法和应用-CN202211047440.3在审
发明人：王建光;付坚;陈穗云;代瑾然;李妤;廖菊够;焦梦婷;马丹;唐菊 -专利权人：云南大学
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2023-01-10 - 主分类号： C08B37/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种产黄青霉菌灭活菌丝体多糖及其提取方法和应用，涉及青霉菌领域，针对现有的无法分离出产黄青霉菌灭活菌丝体多糖中具体的活性成分，使得产黄青霉菌灭活菌丝体多糖的应用受到制约的问题。本发明确切公布了产黄青霉菌灭活菌丝体多糖的结构和制备方法，包括乙醇沉淀、酶解除蛋白、凝胶色谱柱分离纯化，红外光谱、高效液相色谱、核磁共振分析结构，制备的产黄青霉菌灭活菌丝体多糖对烟草花叶病毒的防治具有较好的效果，制备的产黄青霉菌灭活菌丝体多糖使得产黄青霉菌灭活菌丝体有效成分更为明确，制备方法简单，药理更为清楚，为开发天然抗病毒制剂提供了依据和方法，在天然产物抗植物病害领域具有广泛的适用性。
一种青霉菌灭活菌丝体多糖及其提取方法应用

[发明专利]一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法及其应用-CN202211053162.2在审
发明人：王建光;付坚;陈穗云;代瑾然;李妤;廖菊够;焦梦婷;马丹;唐菊 -专利权人：云南大学
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12P1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法及其应用，涉及生物技术领域，针对现有的无法很好的提取乙酸乙酯的问题。现提出如下方案，其包括如下原料：经过100℃高温烘干的青霉菌发酵物，甲醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，蒸馏水；本发明还提供了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法，包括如下制备步骤：步骤一:将粉末状的青霉菌发酵物加入10倍量的甲醇中常温浸提24h，期间充分搅拌多次，回流提取3次，温度60℃，过滤，合并滤液。本发明的优点在于：乙酸乙酯提取操作简便、效率高、成本低廉，用于促进植物细胞的增殖效果佳，更为生物源的植物生长调节剂的开发提供了具有开发前景的物质。
一种青霉发酵乙酸乙酯提取物制备方法及其应用

[发明专利]一种促植物侧根发生发育有机提取物的制备方法及应用-CN202211042426.4在审
发明人：王建光;付坚;陈穗云;代瑾然;李妤;廖菊够;焦梦婷;马丹;唐菊 -专利权人：云南大学
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： A01N63/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种促植物侧根发生发育有机提取物的制备方法及应用，涉及微生物发酵物有效组分提取技术领域。提取步骤包括：青霉菌发酵物经过100℃高温烘干，加入甲醇萃取后，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯提取物再经硅胶柱分离。本发明具有以下应用：应用于促植物侧根发生发育；应用于诱导植物侧根发生发育相关基因表达。本发明的有益效果为：本发明提供的一种青霉菌发酵物有机提取物，不仅提供了一种促进植物侧根发生发育的物质，还对工业生产的废弃物进行了再利用；本发明提供的一种促植物侧根发生发育的青霉菌发酵物的有机提取物制备的方法，该方法操作简单、成本低，为生物源的植物生长调节剂的开发提供了具有开发前景的物质。
一种植物侧根发生发育有机提取物制备方法应用

[发明专利]一种青霉菌发酵物多糖的制备及其应用-CN202211042404.8在审
发明人：陈穗云;付坚;王建光;代瑾然;李妤;廖菊够;焦梦婷;马丹;唐菊 -专利权人：云南大学
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C08B37/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种青霉菌发酵物多糖的制备及其应用，涉及一种微生物有效组分提取技术领域。现提出如下方案，制备方法包括：青霉菌发酵物经95％乙醇浸泡、热水浸提、乙醇沉淀、脱蛋白、脱盐等步骤；应用包括：青霉菌发酵物多糖在防治心叶烟TMV中的应用、青霉菌发酵物多糖在钝化烟草花叶病毒中的应用；本发明的有益效果为：多糖提取效率高、操作简便、成本低廉，用于防治烟草病毒病效果佳，为烟草病害的防治提供了具有开发前景的活性成分。
一种青霉发酵多糖制备及其应用

[发明专利]一种获得栽培烟草和花烟草杂交后代的方法-CN202110722671.9有效
发明人：吕立堂;陈穗云;廖菊够 -专利权人：中国烟草总公司贵州省公司
申请日： 2021-06-28 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种获得栽培烟草和花烟草杂交后代的方法，包括步骤：取第一栽培烟草的花粉，然后用第一栽培烟草的花粉对第二栽培烟草的柱头进行诱导处理，得第一次处理后的柱头；将所述第一次处理后的柱头依次进行细胞破碎处理、干燥处理和捣碎处理，得第二次处理后的柱头；取花烟草的花粉，并将所述花烟草的花粉与所述第二次处理后的柱头按预设比例混合，得待处理混合物；通过所述待处理混合物对第三栽培烟草在始开期后的120h内进行多次重复授粉，得授粉后的栽培烟草；对授粉后的栽培烟草以及得到的子代进行检测操作和筛分操作，得具有抗逆性的烟草杂交品种。本发明能够显著提升栽培烟与花烟草亲的亲和性，可以获得约5‑8％的真实杂交后代。
一种获得栽培烟草杂交后代方法

[发明专利]一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用-CN202010102860.1有效
发明人：陈穗云;廖菊够;马文广;牛永志;潘磊 -专利权人：玉溪中烟种子有限责任公司;云南大学
申请日： 2020-02-19 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C07K16/40 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.1所示的CDR1的氨基酸序列GYTFTDYY，SEQ ID NO.2所示的CDR2的氨基酸序列INPYNGDT和SEQ ID NO.3所示的CDR3的氨基酸序列AREDYSGSSYVANFDY；所述的单克隆抗体的轻链可变区序列包含SEQ ID NO.4所示的CDR1的氨基酸序列KSLLHSNGITY，SEQ ID NO.5所示的CDR2的氨基酸序列QMS和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列AQNLELWT。本发明提供一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用，以通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下PPO蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。
一种用于检测烟草氧化酶单克隆抗体及其应用

[发明专利]烟草花粉管的半离体培养方法-CN201711193369.9在审
发明人：牛永志;廖菊够;马文广;郑昀晔;索文龙;陈穗云 -专利权人：玉溪中烟种子有限责任公司;云南大学;云南省烟草农业科学研究院
申请日： 2017-11-24 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：烟草花粉管的半离体培养方法，具体步骤为取烟草始开期雌蕊，授粉后置于28 ℃恒温箱中预培养；用剃须刀片切割预培养的花柱二分之一或四分之三部位，切割完毕后置于含培养基的载玻片上，在保湿盒中28 ℃继续培养24 h；培养结束后，花粉管从花柱切割部位成束长出；用眼科镊在显微镜下切取花粉管，悬浮于含培养基的离心管中，5000 rpm离心10 min即可获得半离体培养的烟草花粉管。本发明中的培养基组分简单有效，可重复性高，针对花柱不同切割部位设置不同的培养时间和培养基，易于操作，为高效收集烟草半离体培养花粉管提供了有效途径。该方式适用于自交授粉和没有花柱不亲和阻碍的杂交授粉组合，为研究烟草花粉管和雌蕊互作调控机制提供了稳定体系。
烟草花粉管半离体培养方法

[发明专利]提高栽培烟与斯托克通氏烟草杂交花粉萌发率的方法-CN201510451699.8在审
发明人：陈穗云;廖菊够;李永平;马文广 -专利权人：云南大学
申请日： 2015-07-28 - 公布日： 2015-12-09 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：一种提高栽培烟与斯托克通氏烟草杂交柱头上花粉萌发率的方法，属农业生物技术领域。方法为：花期收集父本即斯托克通氏烟草成熟花粉，在10:00-12:00，12:00-14:00，14:00-16:00， 16:00-18:00 4个时间段分别用收集的成熟花粉对母本始开期柱头授粉；用10mg/L，30mg/L和60mg/L的CaCl₂涂抹母本始开期柱头，并在早上10:00-12:00时间段用父本即托克通氏烟草成熟花粉对涂抹了CaCl₂的母本始开期柱头授粉；用体积分数0.0001%，0.001%，0.1%的乙烯清除剂氨基乙氧基乙烯甘氨酸涂抹母本始开期柱头，并在早上10:00-12:00用父本成熟花粉对涂抹了氨基乙氧基乙烯甘氨酸的母本始开期柱头授粉；授粉12h后采样，压片后用荧光显微镜拍照并统计花粉萌发率；上述母本为栽培烟。优点在于：操作简单，成本低，花粉萌发率高，为提高柱头杂交亲和性提供了有效指导。
提高栽培斯托克通氏烟草杂交花粉萌发方法

[发明专利]提高栽培烟与花烟草杂交亲和性和结籽率的方法-CN201510449640.5在审
发明人：陈穗云;廖菊够;李永平;马文广 -专利权人：云南大学
申请日： 2015-07-28 - 公布日： 2015-10-28 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：提高栽培烟与花烟草杂交亲和性和结籽率的方法，属农业生物技术领域。方法为：母本花朵开放挂牌，挂牌时间为始开期，挂牌后72h、96h和120h为始开期后的衰老阶段，在这3个时间段，用父本成熟花粉对母本柱头授粉，授粉48h后采样，用胼胝质荧光统计花粉管数目和结籽率，比较授粉对杂交亲和性的影响；选母本始开期花朵，剥取雌蕊并剪取柱头，柱头在室内自然晾干2天后碎为粉末，将父本成熟花粉与柱头粉末按1:5-1:50的重量比混合；用混合的花粉对母本始开期后120h的花朵授粉，授粉48h后采样，用胼胝质荧光统计花粉管数目和结籽率，比较混合花粉对杂交结籽率的影响；栽培烟为母本，花烟草为父本。优点：操作简单，成本低，易推广，为植物种间杂交种的获得提供了参考。
提高栽培烟草杂交亲和性结籽率方法

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