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[发明专利]新型mlCas12a蛋白在核酸检测方面的应用-CN202010715154.4有效
发明人：刘华勇;陈翀;季宇;谢婵芳;黄嘉恩 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2020-07-23 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了新型mlCas12a蛋白及其在核酸检测方面的应用。本发明研究发现一种在gRNA介导下对靶标序列特异性识别并具有非特异单链DNA切割活性的新型mlCas12a蛋白，可作为新型CRISPR/mlCas12a系统应用于核酸检测，为基于CRISPR/Cas12a的分子检测方法提供了一种新的必要工具选择。同时提供了一种包括mlCas12a蛋白和gRNA的新型核酸检测系统和试剂盒，可在25℃‑37℃的室温下实现高灵敏、高特异性的分子检测，成本低廉、操作方便、快捷、应用范围广，在核酸检测方面具有良好的应用前景。
新型 mlcas12a 蛋白核酸检测方面应用

[发明专利]嵌合体TsCas12a蛋白及其制备方法和应用-CN202211489681.3在审
发明人：松阳洲;季宇;钟旖旎;韩延华;卢蜜雨 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2022-11-25 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种嵌合体TsCas12a蛋白及制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。该嵌合体TsCas12a蛋白包含由SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.11所示氨基酸序列的功能片段依次连接组成的活性区域。该嵌合体TsCas12a蛋白可在高浓度PEG、非离子型去污剂和还原剂存在的体系中实现高灵敏、高精度的分子检测。既基于Cas12a的核酸分子检测提供了一种必要工具的新选择，又有利于该新型CRISPR/TsCas12a系统与其余多种恒温扩增一步法联用方案的开发。
嵌合体 tscas12a 蛋白及其制备方法应用

[发明专利]一种新型嵌合体TsCas12a蛋白及制备技术-CN202110631842.7在审
发明人：松阳洲;韩延华;卢蜜雨 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2021-06-07 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型嵌合体TsCas12a蛋白序列及制备技术。本发明研究发现一种在gRNA介导下对靶标序列特异性识别并具有非特异单链DNA切割活性的新型嵌合体Cas12a蛋白，作为新型CRISPR/TsCas12a系统应用于核酸检测，可在含有高浓度PEG、多种非离子型去垢剂和还原剂的反应体系中正常工作，为基于Cas12a的一步法分子检测提供了一种新的必要工具选择。
一种新型嵌合体 tscas12a 蛋白制备技术

[发明专利]一种可用于胚胎注射制备敲除小鼠的Cas9蛋白的制备方法-CN201510269389.4有效
发明人：黄军就;陈昱僖;松阳洲 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2015-05-25 - 公布日： 2018-11-27 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种可用于胚胎注射制备敲除小鼠的Cas9蛋白的制备方法，将Cas9蛋白序列转化入pET28a‑ccdB‑CmR载体，再转化至原核表达菌株，经过诱导表达后，收集菌体，经亲和纯化、用超滤管浓缩纯化、透析后即得到纯化的Cas9蛋白；所述pET‑28‑ccdB‑CmR载体是以原核表达载体pET28a基础，在Hind III和Xho I酶切位点之间插入NotI‑ccdB‑CmR‑AscI序列得到。本发明构建了高效的Cas9蛋白原核表达系统，表达得到的Cas9蛋白经体外切割实验证明具有体外活性，可特异切割体外DNA；胚胎注射实验证明纯化的Cas9蛋白具有体内活性，可用于制备基因修饰动物。
一种用于胚胎注射制备小鼠 cas9 蛋白方法

[发明专利]金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统的制备及其在构建小鼠模型中的应用-CN201610287827.4在审
发明人：黄军就;梁普平;松阳洲;张曦亚 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2016-05-04 - 公布日： 2016-09-21 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明公开了一种金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统的制备方法及其在构建基因修饰小鼠模型中的应用。所述金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统由Cas9 mRNA和gRNA两部分组分组成；所述Cas9 mRNA的制备方法是在原始Cas9编码DNA的上游加上T7启动子；所述gRNA的制备方法是在原始gRNA编码序列上游加上T7启动子。将金黄色葡萄球菌Cas9 mRNA和gRNA通过显微注射的方法注射到小鼠受精卵中，可以对小鼠受精卵进行多种类型的基因编辑修饰，如单基因敲除、多基因敲除和/或基因敲入等，在小鼠等动物受精卵基因编辑修饰工作以及动物模型的构建方面，具有很好的应用前景。
金黄色葡萄球菌 crispr cas9 系统制备及其构建小鼠模型中的应用

[发明专利]一种高通量检测活细胞内SUMO修饰底物的方法及其应用-CN201511020132.1在审
发明人：任间;赵齐;蒋帅 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2015-12-28 - 公布日： 2016-04-06 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量检测活细胞内SUMO修饰底物的方法及其应用，该法基于BiFC系统，构建SUMO1、SUMO2/3的C端或N端连接YFPn的逆转录表达载体，将待检测对象的多个基因的cDNA克隆入含有YFPc的逆转录表达载体；病毒感染后，将同时稳定表达融合蛋白：SUMO-YFPn和待筛选蛋白-YFPc。如果是发生相互作用的蛋白，则可在FITC波长下观察到荧光信号，即筛选出活细胞内SUMO的修饰底物。该法可同时筛选SUMO1/2/3发生共价修饰和非共价修饰的蛋白底物，以及筛选在刺激和非刺激下SUMO共价或非共价修饰底物的结合情况，可筛选SUMO弱结合的蛋白底物，信噪比、灵敏度高，假阳性低。
一种通量检测细胞内 sumo 修饰方法及其应用

[发明专利]一种利用定向肽库检测蛋白质与其他分子相互作用的方法-CN201310290034.4有效
发明人：松阳洲 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2013-07-10 - 公布日： 2014-01-15 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用定向肽库检测蛋白质与其他分子相互作用的方法，包括定向肽库的设计、定向肽库的合成构建、目标蛋白的体外表达纯化、定向肽库与目标蛋白的反应、定向肽库的肽段洗脱分离、定向肽库的肽段线性化、线性化肽段的鉴定测序步骤，所述定向肽库由线性肽或环状肽组成。运用该方法可筛选鉴定出各种激酶、抗体、蛋白酶以及任何可能与蛋白质结合的分子的结合肽段的一致序列。
一种利用定向检测蛋白质其他分子相互作用方法

[发明专利]一种高通量检测蛋白相互作用的方法及其应用-CN201310157873.9有效
发明人：松阳洲 -专利权人： 广州美格生物科技有限公司
申请日： 2013-04-28 - 公布日： 2013-10-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量检测活细胞内蛋白相互作用的方法，以逆转录病毒为基础的BiFC系统，分别将“诱饵”蛋白cDNA克隆入含YFPn的逆转录病毒表达载体，而将18000个人类基因cDNA分别克隆入含YFPc的逆转录病毒表达载体，通过逆转录病毒感染，产生同时稳定表达待筛选基因-YFPc融合蛋白和“诱饵”蛋白-YFPn融合蛋白的细胞，如果“诱饵”蛋白能与目标蛋白相互作用，通过流式细胞仪在FITC波长将观察到发荧光的细胞并能检测信号强弱。本发明用于筛选在刺激或非刺激条件下与目的蛋白相互作用的蛋白网络，可检测较弱或瞬时相互作用，信噪比高，假阳性率低，灵敏度高。
一种通量检测蛋白相互作用方法及其应用

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