本发明公开了哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别引物、鉴别方法及试剂盒,所述引物包括上游引物HtaC1041F和下游引物HtaC1041R;上游引物HtaC1041F的序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物HtaC1041R的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明是国内外首次基于分子生物学技术原理建立的哲罗鲑和细鳞鲑种质鉴别的新方法,它利用哲罗鲑EST序列设计了1对SSR引物,通过一个PCR反应就可以实现哲罗鲑和细鳞鲑的鉴别。本发明可以区分哲罗鲑和细鳞鲑完整个体及其加工产品,且可以用于鱼卵、刚孵出苗种的鉴定,具有准确快捷、客观公正、经济实用的特点。
一种鉴别哲罗鲑遗传性别的分子标记以及鉴别方法,它涉及一种鱼类鉴别遗传性别的分子标记以及鉴别方法。鉴别哲罗鲑遗传性别的分子标记中哲罗鲑雄鱼特有条带的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,哲罗鲑雌雄鱼共有条带的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。鉴别方法:一、提取基因组DNA;二、PCR扩增;三、凝胶电泳,显示出现一条条带的为哲罗鲑雌鱼,显示出现两条条带的为哲罗鲑雄鱼。本发明方法能够快捷高效地鉴别哲罗鲑幼鱼性别,仅需一对引物扩增,根据琼脂糖凝胶电泳扩增产物的条带数量既可以鉴别哲罗鲑的雌雄,无需测序。
一种鉴别哲罗鲑遗传性别的分子标记以及鉴别方法,它涉及一种鱼类鉴别遗传性别的分子标记以及鉴别方法。鉴别哲罗鲑性别的分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。鉴别方法:一、提取基因组DNA;二、PCR扩增,PCR扩增体系中分子标记上游引物为5’‑TGTCAGGGTTGATTACAGTTCCT‑3’,分子标记下游引物为5’‑CTGCAGTCTGATTCCTCATCA‑3’;三、凝胶电泳,没有条带的出现的为哲罗鲑雌鱼,出现1条153bp条带的为哲罗鲑雄鱼。本发明采用分子标记PCR扩增的方法鉴别哲罗鲑的性别,操作方便,且能够在3.5h内完成鉴定,高效快捷,在生产方面具有重要的应用价值。
本发明公开了一种黑龙江茴鱼群体特异性分子标记引物、试剂盒及鉴定方法,引物为ThtC1010、ThtC1029、ThtC1034;其中,ThtC1010引物序列如SEQ ID NO.1‑2所示,ThtC1029引物序列如SEQ ID NO.3‑4所示,ThtC1034引物序列如SEQ ID NO.5‑6所示。本发明是国内外首次基于分子生物学技术原理建立的区分黑龙江茴鱼群体的新方法,是在黑龙江茴鱼EST数据的基础上,成功开发了EST‑SSR标记,并用部分标记对黑龙江茴鱼的群体的遗传背景进行分析,找到了能够区分3个群体的特异性标记,其中THC1010位点和THC1029位点能够准确区分根河群体与其他两个群体,THC1034位点能将三个群体区分开,具有准确性高,技术重现性好,性价比高的优势。
本发明公开了用于区分细鳞鲑和哲罗鲑的引物对、试剂盒及方法,该引物对包括引物对1和引物对2,引物对1包括上游引物ITS‑F和下游引物ITS‑R,引物对2包括上游引物mtDNA‑F和下游引物mtDNA‑R;其中ITS‑F的序列如SEQ ID NO.1所示,ITS‑R序列如SEQ ID NO.2所示,mtDNA‑F序列如SEQ ID NO.3所示,mtDNA‑R序列如SEQ ID NO.4所示。本发明是国内外首次基于分子生物学技术原理建立的区分细鳞鲑和哲罗鲑的新方法,它利用细鳞鲑和哲罗鲑ITS基因和线粒体基因组各设计1对特异性引物,建立了一种PCR反应就可以实现鉴别细鳞鲑和哲罗鲑的新方法。本发明可以区分细鳞鲑和哲罗鲑完整个体及其加工产品,具有准确快捷、客观公正、经济实用的特点。