本发明中公开了一种重组表达载体,含有苯酚羟化酶基因,所述苯酚羟化酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明同时提供含有上述重组表达载体的基因工程菌及该基因工程菌在降解苯酚中的应用。本发明从美棒状杆菌中克隆得到苯酚羟化酶基因,构建重组表达载体后,转化入大肠杆菌,表达得到苯酚羟化酶;测定其酶活为105.8U/ml,比活度达到了12.3U/mg,具有较高的酶活,可用于高效降解含酚废水,在工业废水处理中具有非常广泛的应用前景。
本发明公开了一种产丝氨酸乙酰转移酶的基因工程菌及其构建方法,大肠杆菌cysE‑30,保藏于武汉的中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M20211026。通过以下方法构建,(1)以非脱羧勒克氏菌YZ30的总DNA为模板,扩增出cysE基因,所述cysE基因序列如SEQ ID No.1所示;YZ30保藏于武汉的中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M20211025;(2)将步骤(1)克隆得到的cysE基因与质粒载体连接,得到表达载体;(3)将步骤(2)得到的表达载体转入大肠杆菌中,筛选阳性克隆,即得。本发明的基因工程菌可以高效催化L‑丝氨酸生成O‑乙酰丝氨酸。