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[发明专利]去除重组汉逊酵母乙肝表面抗原中宿主细胞残留DNA的方法-CN201610329460.8有效
发明人：杨旭琴;李彩梅;张德有;李津;杨云凯;赵铠;马锐;许宁;刘英微;王曦 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司
申请日： 2016-05-18 - 公布日： 2016-08-10 - 主分类号： C07K14/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种去除重组汉逊酵母乙肝表面抗原中宿主细胞残留DNA的方法，该方法包括：步骤a、将待去除宿主细胞残留DNA的重组汉逊酵母表达乙肝表面抗原样品溶于含400～500mM NaCl的10～30mM PB溶液中；步骤b、以上述溶有重组汉逊酵母表达乙肝表面抗原样品的含NaCl的PB溶液作为上样液，利用Monoliths QA阴离子交换柱进行层析纯化，得到去除宿主细胞残留DNA的重组汉逊酵母表达乙肝表面抗原样品。本发明的方法能够有效去除重组汉逊酵母乙肝表面抗原样品中残留DNA，使所制得疫苗满足国家药典三部(2010版)中对其中残留DNA含量的规定。
去除重组酵母乙肝表面抗原宿主细胞残留 dna 方法

[发明专利]重组DNA序列、酵母菌、乙肝表面抗原制备方法及疫苗-CN201310229177.4在审
发明人：李津;许毅;张德有;杨云凯;王曦;马锐 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司
申请日： 2013-06-08 - 公布日： 2014-12-24 - 主分类号： C12N15/51 文献下载
摘要：本发明提供一种重组DNA序列、酵母菌、乙肝表面抗原制备方法及疫苗。本发明的重组DNA序列是将乙型肝炎病毒表面抗原的编码基因根据多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)的密码子使用频率进行密码子优化后得到的。本发明还提供包含有所述的重组DNA序列的重组多形汉逊酵母菌；将上述重组酵母菌制备adr亚型乙型肝炎表面抗原的方法；以及所得到的乙型肝炎疫苗。本发明的adr亚型乙型肝炎病毒表面抗原的重组DNA序列表达水平高；本发明的重组酵母菌生长速率快、HBsAg的产率高，能利用廉价的化学合成培养基进行细胞高密度发酵，发酵染菌率低，有利于工业化生产；本发明HBsAg adr疫苗有诱导更强的Th1和Th2型细胞免疫应答的趋势。
重组 dna 序列酵母菌乙肝表面抗原制备方法疫苗

[发明专利]狂犬病病毒人二倍体细胞适应株及其制备方法与应用-CN201310291474.1有效
发明人：王辉;张月兰;苏桂民;李爱灵;梁宏阳;赵硕;张晋;马可 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司
申请日： 2013-07-11 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种狂犬病病毒人二倍体细胞适应株及其制备方法与应用，具体是指一种狂犬病病毒aG株人二倍体细胞（2BS）适应株，该狂犬病病毒人二倍体细胞适应株的保藏编号为CGMCC No.7307。本发明还提供了该适应株的制备方法、该适应株在制备人二倍体细胞狂犬病疫苗中的应用、以及以该适应株制备人二倍体细胞狂犬病疫苗的方法和所制备得到的狂犬病疫苗。
狂犬病病毒二倍体细胞适应及其制备方法应用

[发明专利]应用篮式生物反应器制备人二倍体细胞风疹减毒活疫苗的方法-CN201210204416.6有效
发明人：王辉;张月兰;梁宏阳;马可;李爱灵;苏桂民;赵硕;张晋 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司
申请日： 2012-06-15 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： A61K39/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种应用篮式生物反应器制备人二倍体细胞风疹减毒活疫苗的方法，该方法包括步骤：在篮式生物反应器中加入DMEM培养基，接种人二倍体细胞培养，细胞接种密度0.5×106～2.0×106cells/ml；培养条件：搅拌转速90～150rpm，DO 55％，pH7.0～7.4，37±1℃；培养至第6～9天时进行病毒接种，接种MOI为0.02～0.08，30±1℃培养；病毒接种22～26小时后，用PBS洗换，注入含0.2～0.3w/v％人血白蛋白的DMEM病毒维持液维持培养至收获病毒液。利用本发明的技术制备以人二倍体细胞为基质的风疹减毒活疫苗，减少了交叉污染，制品质量均一，具有较高经济效益。
应用生物反应器制备二倍体细胞风疹减毒活疫苗方法

[发明专利]百日咳杆菌69KD外膜蛋白的纯化方法-CN201210027545.2无效
发明人：肖詹蓉;王玲 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司
申请日： 2012-02-08 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K14/235 文献下载
摘要：本发明属于蛋白分离纯化领域，涉及百日咳杆菌的69KD外膜蛋白的工业化大规模分离纯化方法。所述方法包括：a.将百日咳杆菌CS菌体用含1mol/L至2mol/L氯化钠的pH8.8的缓冲液在40至60℃浸提30分钟至3小时，离心，收集上清，得到含有所述69KD外膜蛋白的菌体裂解物上清；b.在含有所述69KD外膜蛋白的菌体裂解物上清中加入硫酸铵使硫酸铵浓度达到15％重量/体积至25％重量/体积，静置1小时至8小时，离心，收集上清；c.在步骤b收集的上清中加入硫酸铵使硫酸铵浓度达到30％重量/体积至38％重量/体积，静置1小时至8小时，离心，弃上清，收集沉淀；d.以Tris-HCl缓冲液溶解步骤c中收集的沉淀并透析除去硫酸铵；e.过DEAE sepharose离子交换柱，用线性梯度氯化钠浓度从0mol/L至1mol/L的缓冲液洗脱，收集目的蛋白。本发明的方法可以快速、简便、低成本纯化天然构象69KD外膜蛋白，从而可用于大规模工业制备天然构象69KD外膜蛋白。
百日咳杆菌 69 kd 膜蛋白纯化方法

[实用新型]洁净型排水口-CN201020221189.4无效
发明人：杨绍林;洪艺;董建春;董翊 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司
申请日： 2010-06-02 - 公布日： 2010-12-29 - 主分类号： E03C1/22 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种洁净型排水口，包括：外壳，上方开口形成开口端，外壳底部开设有排水管接口，外壳内部为排水腔；水封挡，设于排水腔内部，水封挡为管状，其下端连接于排水管接口，水封挡与外壳侧壁之间形成填装部；扣碗，其碗口朝下方设置，扣碗的内部形成容置腔，扣碗的碗口侧壁伸入于所述填装部中，水封挡伸入于扣碗的容置腔内，扣碗与水封挡、外壳之间均具有间距，扣碗的碗口端面与外壳的内侧底面之间设有支撑扣碗的支撑件；漏水孔板，盖设于外壳的开口端，漏水孔板上设有多个漏水孔，本实用新型的洁净型排水口能够借助自身的结构设计，加装消毒药液并形成液封，从而达到自洁净和消毒的目的，防止细菌微生物等污染生产卫生环境。
洁净排水口

[发明专利]酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺-CN200410005407.X有效
发明人：马民强;汪和睦;周根喜;张德友 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司;天津博荟生物技术有限公司
申请日： 2004-02-18 - 公布日： 2004-12-08 - 主分类号： C12N15/13 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的新方法，该方法包括如下步骤：1)所述啤酒酵母工程菌的种子发酵步骤；2)利用步骤1)制得的种子进行发酵培养的步骤；和3)从步骤2)所得的发酵混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤；该方法的特征在于，在上述在步骤2)中以腺嘌呤的重量计，以低于14mg/升·小时的速率向培养基中流加腺嘌呤、腺苷、腺苷一磷酸、腺苷二磷酸或腺苷三磷酸。本发明的方法可显著提高提高重组HBsAg表达水平。
酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺

[发明专利]酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺-CN200410005408.4有效
发明人：汪和睦;马民强;李津;杨云凯 -专利权人： 北京天坛生物制品股份有限公司;天津博荟生物技术有限公司
申请日： 2004-02-18 - 公布日： 2004-12-08 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法，该方法包括如下步骤：1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤；2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤；和3)从步骤2所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤；该方法的特征在于，在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源；将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。
酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺

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