本发明公开了桂花花序不同发育时期荧光定量内参基因及应用,所述内参基因为OfACT和OfEF1α;其中,所述内参基因OfACT的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,内参基因OfEF1α的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明桂花花序不同发育时期荧光定量内参基因OfACT和OfEF1α基因是桂花不同发育时期花序中表达最稳定的两个内参基因,该两个基因表达的稳定性优于现有技术中的其他基因,作为荧光定量内参基因能为桂花不同发育时期花序中获得功能基因表达的精确定量数据提供有力支持。