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[发明专利]一种基于金属纳米粒子和三螺旋链的甲醛比色检测方法及应用-CN202111245232.X有效
发明人： 凌连生;黄文秀 -专利权人：中山大学
申请日： 2021-10-26 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于金属纳米粒子和三螺旋链的甲醛比色检测方法及应用，本发明中的甲醛比色检测方法包括如下步骤：(1)在金属纳米粒子表面修饰Oligo 1探针序列，得到金属纳米粒子探针；(2)将待测样品与步骤(1)制得的金属纳米粒子探针、Oligo 2序列、Oligo 3序列、银离子溶液混合，根据混合溶液最终颜色的RGB值定量待测样品中的甲醛含量。本发明中的检测方法简单、快速、灵敏、可靠，无需大型仪器和复杂的操作过程，可以在极短的时间内实现现场检测，特异性强，灵敏度高，检出限仅为0.14mg·L‑1，具有极高的应用价值。
一种基于金属纳米粒子螺旋甲醛比色检测方法应用

[发明专利]一种基于金纳米粒子和杂交链反应扩增检测甲醛的方法-CN202211630743.8在审
发明人： 凌连生;黄文秀;赵利珍 -专利权人：中山大学
申请日： 2022-12-19 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6876 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于金纳米粒子和杂交链反应扩增检测甲醛的方法，包括如下步骤：在金纳米粒子表面修饰Oligo 1探针序列，得到金纳米粒子探针；将金纳米粒子探针、待测样品、HP序列、H1序列、H2序列、银离子混合发生杂交链反应，根据反应后的混合溶液颜色的RGB值定量待测样品中的甲醛含量；或使用动态光散射法测定反应后的混合溶液中的金纳米粒子探针的粒径大小定量待测样品中的甲醛含量。本发明中的检测方法灵敏、可靠，无需复杂的操作过程，可以在较短的时间内实现现场检测，选择性强，灵敏度高，检出限仅为0.02mg·L‑1和0.01mg·L‑1，具有极高的应用价值。
一种基于纳米粒子杂交反应扩增检测甲醛方法

[发明专利]基于聚合酶链式反应和动态光散射检测CA125的方法-CN202010074675.6有效
发明人： 凌连生;沈瑞迪;黄文秀;张继 -专利权人：中山大学
申请日： 2020-01-22 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6816 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于聚合酶链式反应和动态光散射检测血液中癌症标志物CA125的方法，当癌症标志物CA125存在时，其能够与其核酸适配体序列结合，使核酸适配体不能在exo‑酶的作用下与部分互补链结合延伸，从而无法作为PCR反应的模板。相反，PCR反应可以引发。然后PCR产物可以与DNA修饰的金纳米粒子探针杂交，导致金纳米颗粒发生聚集。测定金纳米颗粒动态光散射信号(粒径大小)的变化，实现对癌症标志物含量的高灵敏定量分析。本发明操作简单、检测成本低、所需样品少，灵敏度高且特异性好，对于癌症多种癌症患者有不同响应，为癌症的无创诊断及术后监控提供了新途径。
基于聚合链式反应动态散射检测 ca125 方法

[发明专利]一种黄曲霉毒素M1的检测方法及其应用-CN202110522596.1有效
发明人： 凌连生;李婷婷;黄文秀 -专利权人：中山大学
申请日： 2021-05-13 - 公布日： 2023-01-10 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种黄曲霉毒素M1的检测方法及其应用，包括(1)制备纳米颗粒探针；(2)将检测样品与适配体混合，加入t‑DNA进行扩增，得到扩增产物；(3)将步骤(1)得到的纳米颗粒探针与步骤(2)得到的扩增产物混合，检测混合前后的纳米颗粒探针粒径变化情况。本发明中的N‑SDA和DLS检测方法操作简单、灵敏度高，检出限为1.3pmol/L，对AFM1检测具有特异性响应，不受其他毒素的干扰，在乳制品中也具有良好的适用性，为AFM1的分析检测提供了新的途径。
一种黄曲霉毒素 m1 检测方法及其应用

[发明专利]基于杂交链式反应和动态光散射检测尿液中端粒酶活性的方法-CN201811086677.6有效
发明人： 凌连生;李婷婷;邹李;王京 -专利权人：中山大学
申请日： 2018-09-18 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12Q1/6816 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于杂交链式反应(HCR)和动态光散射(DLS)检测尿液中端粒酶活性的方法。该方法是当活性端粒酶存在时，其底物的延长产物会引发探针H1和H2发生HCR反应，形成长的、带缺口的双链DNA产物。然后HCR产物可以与DNA修饰的金纳米颗粒(DNA‑AuNP)探针杂交，导致金纳米颗粒发生聚集。测定金纳米颗粒动态光散射信号(粒径大小)的变化，实现对端粒酶活性的高灵敏定量分析。本方法操作简单、检测成本低、所需样品少，灵敏度高且特异性好。同时，我们将该方法用于多种癌症病人尿液中端粒酶活性的检测，结果表明，本发明对膀胱癌具有特异性响应，为膀胱癌的无创诊断提供了新的途径。
基于杂交链式反应动态散射检测尿液端粒活性方法

[发明专利]基于链替换反应和DNA修饰的金纳米粒子检测端粒酶活性的方法-CN201811359762.5有效
发明人： 凌连生;王京;李婷婷;沈瑞迪 -专利权人：中山大学
申请日： 2018-11-15 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于链替换反应(SDA)和DNA修饰的金纳米粒子检测端粒酶活性的方法。该方法是当活性端粒酶存在时，其底物的延长产物会引发探针Hairpin和Primer发生SDA反应，形成长的、两端有单链的双链DNA产物。然后SDA产物可以与DNA修饰的金纳米颗粒(DNA‑AuNP)探针杂交，导致金纳米颗粒发生聚集。测定金纳米颗粒动态光散射信号(粒径大小)的变化，实现对端粒酶活性的高灵敏定量分析。本方法操作简单、检测成本低、所需样品少，灵敏度高且特异性好。
基于替换应和 dna 修饰纳米粒子检测端粒活性方法

[发明专利]基于三螺旋DNA结合级联信号放大策略检测黄曲霉毒素B1的方法-CN202111345112.7在审
发明人： 凌连生;张曼君;邹李 -专利权人：中山大学
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：本发明公开了基于三螺旋DNA结合级联信号放大策略检测黄曲霉毒素B1的方法，涉及生物技术领域。该方法提供一组检测毒素的探针组，包括Aptamer、Blocking DNA、探针HP、探针H1、探针H2、Zn‑Sub、Zn‑Enz、Fluorescent Probe和Fluorescent Probe。该探针组具有灵敏度高，特异性好，准确度高，重复性好的特点。此外，该探针对AFB1检测的线性范围为0.4‑16nmol/L，检出限为0.22nmol/L。
基于螺旋 dna 结合级联信号放大策略检测黄曲霉毒素 b1 方法

[发明专利]一种实时动态光散射定量PCR仪-CN201810282834.4有效
发明人： 凌连生;邹李 -专利权人：中山大学
申请日： 2018-04-02 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本发明公开了一种实时动态光散射定量PCR仪，包括：热循环系统，用于控制PCR样品试管的受热状态；动态光散射检测部件，包括将来自光源的光照射到PCR样品试管的照射部、光谱强度取得部及测定部，所述光谱强度取得部使来自参照面的反射光和透射过参照面的来自样品的散射光分光，取得所述反射光和所述散射光的干涉光的光谱强度；所述测定部基于取得的所述光谱强度对PCR样品进行实时动态光散射变化的检测；控制系统，包括控制单元及对来自所述测定部的检测数据进行分析处理的上位机。本发明能排除非特异性PCR产物对检测的干扰，并且可实时观察反应管中PCR扩增产物的增加情况，自动化程度高且测定结果更可靠。
一种实时动态散射定量 pcr

[发明专利]一种基于金纳米颗粒的定量PCR检测方法-CN201810378113.3有效
发明人： 凌连生;邹李 -专利权人：中山大学
申请日： 2018-04-25 - 公布日： 2021-08-06 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供一种扩增引物的设计方法，设计发夹结构的扩增引物，扩增产物两端带有单链DNA片段。本发明提供两种金纳米颗粒探针，该探针修饰的DNA序列与待测DNA的PCR产物两端的单链DNA片段互补。本发明提供一种基于金纳米颗粒的定量PCR检测方法，包括以下步骤：(1)选取待测DNA序列，设计一对特殊结构的扩增引物；所述一对特殊结构的扩增引物设计成发夹结构；(2)在含有待测DNA模板、一对特殊结构的扩增引物、Taq DNA聚合酶和dNTP的体系中进行PCR反应，得到PCR产物；(3)制备DNA修饰的金纳米颗粒探针；(4)将探针加入到PCR产物中，与PCR产物杂交；(5)测定金纳米颗粒的吸光度或动态光散射信号的变化。该方法操作简单，能够快速检测PCR产物，灵敏度高。
一种基于纳米颗粒定量 pcr 检测方法

[发明专利]一种多倍PCR扩增方法-CN201710591161.6有效
发明人： 凌连生;李海刚;王京 -专利权人：中山大学
申请日： 2017-07-19 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明提供了一种多倍PCR扩增方法，即以一对5’端与通用引物相同的多个相同序列组成的多倍引物(低浓度)和一对通用引物(高浓度)在同一PCR反应中进行扩增，扩增中所用DNA聚合酶是具有链置换作用的耐热聚合酶。多倍引物序列包含两部分，即3’端与目标基因互补，5’端携带至少1个与通用引物相同的序列。上、下游多倍引物5’端携带通用引物的数目相同或不同，且上、下游通用引物的序列也可以相同或不同。本方法一次循环同时产生多个扩增产物，且每一个扩增产物除含有目标扩增序列外还含有至少一个上游和一个下游通用引物序列。本发明因一次循环可以产生超过两倍的扩增产物，故能显著提高PCR的扩增效率和检测灵敏度，适合作为常规分子生物学实验室手段和医学核酸检测手段用于低模板数基因的检测。
一种 pcr 扩增方法

[实用新型]一种实时数字RGB颜色成像定量PCR仪-CN201921942006.5有效
发明人： 凌连生;邹李;黄文秀;沈瑞迪 -专利权人：中山大学
申请日： 2019-11-11 - 公布日： 2020-09-18 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种实时数字RGB颜色成像定量PCR仪。该数字RGB颜色成像定量PCR仪包括：用于控制PCR样品管的受热状态的热循环系统；包括照射到PCR样品的光源和RGB颜色检测器等成像装置对PCR样品的实时成像检测的RGB颜色检测系统；包括控制单元及对检测数据进行分析处理的上位机的控制系统。RGB颜色检查器由多个成列排布的颜色传感器、信号处理电路、单片机和显示屏构成。在光源的照射下，颜色传感器CCD或CMOS传感器或RGB三基色传感器感应PCR样品的颜色，产生的信号经过放大电路处理，进一步传输给单片机处理，通过显示屏显示检测分析结果。本实用新型能排除非特异性PCR产物对检测的干扰，并且可实时观察反应管中PCR扩增产物的增加情况，自动化程度高且测定结果可靠。
一种实时数字 rgb 颜色成像定量 pcr

[发明专利]一种基于自组装结构模拟酶及其制备方法与应用-CN201610165756.0有效
发明人： 凌连生;栗瑞敏 -专利权人：中山大学
申请日： 2016-03-21 - 公布日： 2017-11-10 - 主分类号： B22F9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于自组装结构模拟酶的制备方法，包括如下步骤(1)将能发生自组装行为的化学物质溶解于水中；(2)向上述(1)中加入活性金属盐溶液、还原剂，搅拌，即得所述基于自组装结构模拟酶。本发明提供的制备方法中，将两种预先配好的能发生组织的化学物水溶液混合，两种分子通过弱分子间作用力组装在一起，金属盐离子在其表面吸附，在还原剂的作用下，原位生成金属纳米颗粒，所得到的基于自组装结构的金属纳米颗粒在宽pH和温度范围、高离子强度等条件下具有很好的过氧化物酶活性。该材料合成条件温和简便，原料价格低廉，易被商业开发。本发明的基于自组装结构的金属纳米颗粒材料还可以应用于电催化、水处理、生物医学等诸多领域，有广泛的应用前景。
一种基于组装结构模拟及其制备方法应用

[发明专利]一种钌(Ⅱ)多吡啶配合物的制备方法-CN200610125479.7无效
发明人：何治柯;凌连生;黄珊;吉邢虎 -专利权人：武汉大学
申请日： 2006-12-15 - 公布日： 2007-06-27 - 主分类号： C07F15/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种钌(Ⅱ)多吡啶配合物的制备方法，首先分别制备1,10－菲咯啉－5,6－二醌，吡啶并[3,2－a：2′,3′－c]吩嗪(dppz)，7,8－二甲基吡啶并[3,2－a：2′,3′－c]吩嗪(dppx)配体以及前驱体Ru(bipy)₂Cl₂·2H₂O(bpy＝2,2′－联吡啶)、Ru(phen)₂Cl₂·2H₂O，然后在烧瓶内加入一定量的Ru(bipy)₂Cl₂·2H₂O/Ru(phen)₂Cl₂·2H₂O和dppz/dppx，加入甲醇和水的混合液，加热回流一定时间，加热浓缩后加水煮沸，然后在冰箱内放置，加入四氟硼酸钠，过滤析出沉淀，用乙醇重结晶后在红外灯下烘干，得到钌(Ⅱ)多吡啶配合物。本发明的钌(Ⅱ)多吡啶配合物可用作核酸识别探针，用于核酸的分析检测，具有稳定性好、灵敏度高、选择性好、无毒、环保等优点。
一种吡啶配合制备方法

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