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[发明专利]一种具有肿瘤细胞杀伤作用的CIK细胞的制备方法-CN201110446645.4无效
发明人：陈晓波;韩洪起;韩俊领;黄家学;武文杰;侯士芳;张宇光 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2011-12-28 - 公布日： 2013-07-03 - 主分类号： C12N5/078 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有肿瘤细胞杀伤作用的CIK细胞的制备方法，利用密度为1.084的Ficoll单核细胞分离液于PBS系统中分离外周血或脐带血单个核细胞，并且通过17-20天的诱导培养获得CIK细胞。本发明利用ficoll密度梯度离心法高效分离获得单个核细胞、并利用细胞培养袋和CIK细胞培养系统获得足量的CIK，可以满足临床治疗的需求。本方法采用Takara淋巴细胞培养基，和自体血清、细胞因子联合培养技术，避免了胎牛血清的应用，减少外源致热源、致敏原污染几率，同时保持了CIK细胞高效扩增的优点；利用细胞培养袋技术、减少细胞污染几率，适合临床治疗应用。
一种具有肿瘤细胞杀伤作用 cik 制备方法

[实用新型]一种脐带血干细胞分离袋-CN201120351068.6有效
发明人： 侯士芳;范雯;林琳 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2011-09-20 - 公布日： 2012-05-30 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种脐带血干细胞分离袋，包括由一个矩形密闭的并排分为第一室、第二室、第三室塑料袋和位于第二室下方并与第二室相通的独立的第四室塑料袋构成，第一室和第二室之间、第二室和第三室之间都留有热合带中线和通道，通道上分别配有单向开关阀，第二室和第四室通道之间设置有开闭阀。所述第一室和第二室之间、第二室和第三室之间留有通道位于各室顶端。本实用新型克服单袋采血中不能把血液分离为几个成份的缺点和多联袋系统结构复杂、操作繁多、分离效果低和价格昂贵以及密封性和无菌性难以保证等缺点。
一种脐带血干细胞分离

[实用新型]脐带血干细胞分离袋-CN201120351069.0有效
发明人： 侯士芳;张宇光 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2011-09-20 - 公布日： 2012-05-30 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种脐带血干细胞分离袋，分离袋整体由一个矩形密闭的塑料袋构成，分离袋并排分为第一室、第二室、第三室和第四室，各室之间留有热合带中线，相邻两室间留有通道，通道上分别配有单向开关阀，每个室留有进出导管。所述相邻两室间留有通道位于各室顶端。本实用新型克服单袋采血中不能把血液分离为几个成份的缺点和多联袋系统结构复杂、操作繁多、分离效果低和价格昂贵以及密封性和无菌性难以保证等缺点。
脐带血干细胞分离

[发明专利]一种体外大量扩增细胞系以及间充质干细胞的方法-CN201110268612.5有效
发明人：黄家学;陈晓波;韩洪起;侯士芳;张宇光;韩俊领;陈勇 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2011-09-13 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种体外大量扩增细胞系以及间充质干细胞的方法，应用微载体结合Hyperflask细胞培养容器在体外大量扩增细胞系以及间充质干细胞。本发明应用商品化微载体结合Hyperflask在体外能够在较小的培养空间中大量的扩增细胞，从而在节约成本的前提下大量的获得目的细胞。
一种体外大量扩增细胞系以及间充质干细胞方法

[发明专利]检测脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞的检测试剂盒及检测方法-CN201110279228.5无效
发明人：陈晓波;黄家学;韩洪起;侯士芳;张宇光;韩俊领;陈勇 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2011-09-20 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞的检测试剂盒，包括A、B、C、D、E、F液，A：8％氯化钠，2.16％磷酸氢二钠，0.2％氯化钾，0.2％磷酸二氢钾，89.44％ddH2O；B：4％多聚甲醛，96％ddH2O；C：6％油红O染料，94％无水乙醇；D：1％阿尔辛蓝染料，99％冰醋酸；E：0.1％茜素红染料，99％ddH2O；F：0.3％苏木精染料，25％冰醋酸，硫酸铝钾0.7％，17％甘油，30％ddH2O，27％无水乙醇。本发明利用这个细胞检测试剂盒，能够在最短的时间内、以最为简单的操作检测相关细胞。为相关的细胞研究提供了便利的条件。
检测脂肪细胞软骨试剂盒方法

[发明专利]Delta1转导的OP9细胞共培养体系的方法-CN201010178255.9无效
发明人：黄家学;侯士芳;王雪莲;张宇光;孟恒星;陈晓波 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-05-21 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本发明公开了一种Delta1转导的OP9细胞共培养体系的方法，包括以下步骤：(1)OP9-DL1细胞失去支持HSCs发育成为B细胞的能力；(2)OP9-DL1获得诱导HSCs发育成为T细胞的正常的程序。本发明OP9-DL1细胞体外共培养体系，可以诱导许多不同来源的祖细胞发育成为T细胞。到目前为止，我们已经可以高效的诱导或者说支持分化为T细胞的干细胞有小鼠胚胎肝细胞来源的HSCs，从骨髓来源的HSCs，末分化的ESCs，骨髓来源的淋巴祖细胞，胸腺来源的祖细胞和人Cord血米源的HSCs。
delta1 转导 op9 细胞培养体系方法

[发明专利]一种人白蛋白的制备方法-CN201010606393.2无效
发明人： 侯士芳;武文杰;张宇光 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-27 - 公布日： 2011-08-10 - 主分类号： C07K1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种人白蛋白的制备方法，以脐带血或经分离过脐带血单个核细胞后的脐带血血浆为原料，进行分离提取。包括如下步骤：将脐带血分离后剩余的血浆在无菌条件下混合，待用；采用低温乙醇分离法分步提取FI、∏、Ш、IV、V等组分；取组分V与95％无水乙醇、蒸馏水配置成水溶液；用盐酸所得水溶液至pH值至5.4-5.6，过滤，取上清；按质量0.2～0.3％的比例加入辛酸钠，巴氏消毒法灭火病毒，0.22μm滤器过滤，分装。本发明采用废弃不用的脐带血作为造血干细胞的重要来源，用于生产提取人血白蛋白，可有效缓解由于血浆原料不足造成的白蛋白供应短缺，从而也可防止假冒白蛋白进入市场。
一种白蛋白制备方法

[实用新型]脐带剪切器-CN201020646643.0有效
发明人： 侯士芳;陈勇 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-06-29 - 主分类号： G01N1/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种脐带剪切器，包括一对手柄、连接轴和一对刀片，在一个刀片侧面设置有冲着另一刀片方向的弯钩。所述弯钩的顶部为锥形的尖。所述弯钩位于刀片的前半部。所述手柄的尾部带有指环。本实用新型脐带剪切器在剪切脐带时，能牢固固定脐带，避免脐带滑落，操作方便，省时省力，减轻实验人员的工作量。
脐带剪切

[实用新型]细胞冻存盒-CN201020649817.9有效
发明人：句凤华;陈勇;侯士芳;张宇光;范雯;林琳 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-06-22 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞冻存盒，包括盒体和盒盖以及位于盒体中将盒体内部空间分为能插入多个管瓶的管架，所述盒盖为透明的，在盒盖的里侧设置有多个横纵交叉的肋条，在肋条形成的多个区域中能贴有不同的标签，在盒体中由多个横纵交叉的大隔板形成与盒盖的肋条划分的区域相对应的多个大区域，在大区域中还形成有多个能插入多个管瓶的管架。所述盒体为类长方体，盒体的一上角为抹角，相应的盒盖的一角也为抹角。本实用新型能划分区域，方便查找的存储的某一间冲质干细胞，减小工作量，不影响其他样品的保存质量。
细胞冻存盒

[发明专利]一种用于脐带血造血干细胞扩增的培养体系及其应用-CN201010580960.1无效
发明人：黄家学;韩洪起;侯士芳;陈晓波;张宇光;王雪莲 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-06-01 - 主分类号： C12N5/0789 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于脐带血造血干细胞扩增的培养体系及其应用，包括1640培养基、胎牛血清FBS、血小板生成素、干细胞因子SCF、人FMS样酪氨酸激酶3配体Flt-3L，还添加了多效生长因子PTN。在现有的造血干细胞培养基中加入适当浓度的PTN，从而得到一种能够在体外更为有效的支持脐带造血干细胞的生长、扩增，更为重要的是能够显著提高造血干细胞在移植到受体体内后的植入能力和造血系统重建能力，从而为脐血干细胞在临床上的应用开辟了新的应用前景。
一种用于脐带血造血干细胞扩增培养体系及其应用

[发明专利]抗人CD52的工程抗体、载体、试剂盒及其用途-CN201010580956.5无效
发明人：朱卫彬;屈浩;石琳;黄丽华;张宇光;侯士芳 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-06-01 - 主分类号： C07K16/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗人CD52的工程抗体、载体、试剂盒及其用途，能够在体内外特异性结合人类CD52抗原，通过多种机制单独或协调作用，有目的清除正常免疫细胞活杀伤白血病细胞。本发明涉及抗人CD52单克隆抗体HI52重链和轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备用于白血病或自身免疫病的诊断和治疗药物中的应用。重链和轻链可变区基因来自抗人CD52单克隆抗体。本发明采用基因工程技术成功制备人源化单链抗人CD52基因工程抗体，为白血病和免疫系统疾病的诊断和治疗提供了一种新的有效药物。
抗人 cd52 工程抗体载体试剂盒及其用途

[发明专利]一种用于临床输血的血浆制品及其制备方法-CN201010577700.9无效
发明人： 侯士芳;张宇光;陈勇;范雯;林琳 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-04-13 - 主分类号： A61K35/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于临床输血的血浆制品及其制备方法，其由脐带血制备而来。采集足月分娩婴儿废弃的胎盘脐带的脐带血，离心，去有核细胞；去所得血浆进行ABO和Rh血型检测、血细胞和血浆成份测定、病原微生物免疫检测和细菌培养；检测合格血浆，加入适量保护剂，-35℃下进行旋冻，2小时后，35℃-37℃下、18-20小时内冷干处理，得到冻干脐带血浆制剂。所述输血包括普通临床输血以及用于恶性肿瘤化/放疗后和再生障碍性贫血造血功能不良疾病方面的输血。脐带血除了是一种重要的造血干细胞来源外，也是一种具有重要治疗作用的特殊血液资源。
一种用于临床输血血浆制品及其制备方法

[发明专利]利用生物反应器规模化制备间充质干细胞的方法-CN201010580959.9无效
发明人：张宇光;孟恒星;侯士芳 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2010-12-09 - 公布日： 2011-03-16 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用生物反应器规模化制备间充质干细胞的方法，将间充质干细胞制备成单细胞悬液，于无菌培养袋内接种于微载体上，置于WAVE BioreactorTM生物反应器中扩增，根据所需的细胞数量，可以反复多次消化、传代、添加微载体，直至达到需要的细胞数量，然后将扩增后的间充质干细胞消化收集后冻存或直接应用。本发明可在短时间内获得大量可供临床应用的间充质干细胞，用于实验研究、临床治疗、组织工程等应用。其操作简单，工作强度低，扩增效率高，生产规模可灵活改变。
利用生物反应器规模化制备间充质干细胞方法

[实用新型]脐带快速切割器-CN200920096285.8有效
发明人：陈勇;何平;方健;韩俊领;黄家学;鲍亦泓;张宇光;侯士芳 -专利权人：协和干细胞基因工程有限公司
申请日： 2009-04-14 - 公布日： 2010-02-17 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种脐带快速切割器，包括底座、料桶、切刀，所述的切刀的刀片成细长的菱形，在菱形的其中一组两个相对的对边形成有锋利的刀刃，在菱形的中心形成有使电机轴穿过的通孔，通孔沿着切刀刀片的长度方向将刀片分为左右两部分，从通孔开始，右侧刀片沿着水平形成一端水平段，然后向右下方弯折一段，再向水平弯折一段，形成右侧切刀，左侧刀片沿着水平形成一段水平段，然后向左下方弯折一段，再向左上方弯折一段，形成左侧切刀，使右侧切刀的端部与左侧切刀的端部不在同一水平面上。由于两侧的切刀位于不同的水平面，可以通过机械的方法，既可以切割脐带，又不至于将脐带切得太碎。
脐带快速切割

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