本发明公开了一种来源于深海真菌新型转录调控因子DcGliZ及其应用。其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次公开了一种新型深海真菌埃德菌转录调控因子DcGliZ,并对其体外功能进行了验证,经EMSA分析,DcGliZ与胶霉毒素生物合成基因的启动子pG、pM和pN存在凝胶阻滞条带。证实了DcGliZ在体外与胶霉毒素生物合成基因启动子pN、pM和pG的相互作用,从而为后期通过转录调控等代谢工程手段提高胶霉毒素产量并获得新型胶霉毒素类化合物奠定分子生物学基础。
本发明公开了一种露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)A553单端孢霉烯合酶基因Tri5启动子及其应用。该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过染色体步移技术获得Tri5基因的上游启动子序列并进行启动子核心区域预测,获得露湿漆斑菌A553单端孢霉烯合酶基因Tri5启动子Tri5P。本发明的启动子能够高效启动潮霉素抗性基因hph的表达,且启动效率与组成型启动子TEF1相近,从而为后期通过转录调控和异源表达以提高单端孢霉烯毒素产量并获得更多高活性的新型单端孢霉烯毒素奠定分子生物学基础。
本发明公开了一种新型埃博霉素生物合成基基因P3启动子及其制备方法和应用。P3启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次采用设计简并引物的方法扩增So ce M4埃博霉素生物合成基因的启动子,并对其进行克隆及启动子元件分析,并采用荧光素酶报告基因载体验证所得埃博霉素生物合成基因启动子的功能。所得新型埃博霉素生物合成基因簇启动子可为纤维堆囊菌埃博霉素生物合成转录调控及埃博霉素生物合成基因簇的异源表达奠定分子生物学基础,促进埃博霉素产量的提高,促进埃博霉素在生物医药方面的广泛应用。
本发明公开了一种埃德菌FS110谷胱甘肽硫转移酶基因GliG启动子及其应用。该启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过染色体步移技术获得GliG基因的上游启动子序列并进行启动子核心区域预测,获得埃德菌FS110谷胱甘肽硫转移酶基因GliG启动子。本发明的启动子能够高效启动潮霉素抗性基因hph的表达,且启动效率显著高于pgpdA启动子,从而为后期通过转录调控和异源表达以提高胶霉毒素产量并获得更多高活性的新型胶霉毒素奠定分子生物学基础。
本发明公开了一种埃博霉素生物合成基因转录调控蛋白及其制备方法。本发明首次采用生物素标记埃博霉素生物合成基因启动子P3钓取的方法获得So ce M4埃博霉素生物合成基因簇的转录调控蛋白,并采用EMSA实验验该转录调控蛋白的功能。所得新型埃博霉素生物合成基因簇转录调控蛋白可为纤维堆囊菌埃博霉素生物合成转录调控及埃博霉素生物合成基因簇的异源表达奠定分子生物学基础,从而促进埃博霉素的高效生物合成及埃博霉素在生物医药方面的广泛应用。