本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物组合物及应用。所述引物组合物含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1～4所示的引物；所述应用为核苷酸序列如SEQ ID NO:1～4所示的引物在制备检测非洲猪瘟和/或猪瘟的试剂盒中的应用。本发明提供了检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物，并建立了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒双重RAA琼脂糖凝胶电泳法的检测方法。通过使用本发明提供的引物对待测样本的基因组DNA和/或cDNA进行重组酶介导的等温扩增，再进行琼脂糖凝胶电泳检测，可快速、准确地检测出是否存在非洲猪瘟病毒和/或猪瘟病毒，具有操作简便、检测效率高等优点，对防控非洲猪瘟和猪瘟以及促进养猪业的发展具有重要的应用价值。
本发明属于分子生物技术领域，具体涉及一种基于ADDomer嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的VLPs及应用。一种基于ADDomer嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白是在ADDomer载体VL区、RGD1区和RGD2区中插入以下猪O型口蹄疫病毒抗原表位的任一或串联的任意组合：所述猪O型口蹄疫病毒抗原表位为T细胞表位第16～44位氨基酸、B细胞表位第129～160位氨基酸和B细胞表位第200～213位氨基酸。所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。利用重组蛋白组装成新型嵌合病毒样颗粒，并用于制备亚单位疫苗，免疫BALB/c雌鼠后，可诱导机体产生特异性免疫反应，能有效预防FMDV的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫具有重要意义。
本发明公开了一种猪塞内卡病毒GD‑SVA‑2018株，所述病毒株的全基因序列如SEQ ID NO：2所示。本发明采用PCR方法对广东地区采集的疑似SVA病料进行PCR检测，经PCR证实为猪塞内卡病毒(SVA)，采用仓鼠肾细胞(BHK‑21)细胞分离培养，分离培养出1株BHK‑21传代细胞培养适应毒株，命名为GD‑SVA‑2018株。通过将猪塞内卡病毒GD‑SVA‑2018株灭活病毒液与油乳剂201混合制成灭活疫苗，所述疫苗免疫2月龄母猪28d后，采血测中和抗体效价可达1:256以上，几何平均为1:256～1:512之间，具有良好的免疫原性，具有较大的应用前景。
本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示。利用上述VLPs制备亚单位疫苗，免疫BALB/c雌鼠后，可诱导机体产生特异性免疫反应，能有效预防PCV2d和FMDV的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫和断奶仔猪多系统衰竭综合征具有重要意义。
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种串联优势表位的重组猪圆环病毒2型Cap蛋白及其应用。该串联优势表位的重组猪圆环病毒2型Cap蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码上述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明进一步构建了含有上述核苷酸序列的双启动子转移载体，并转化大肠杆菌，获得重组杆状病毒质粒；然后转染昆虫细胞，得到重组杆状病毒，其重组蛋白表达量达914μg/ml，能够与阳性血清发生特异性结合，具有良好的免疫学反应性。本发明提供的亚单位疫苗，免疫小鼠后能够刺激小鼠产生高水平的体液免疫应答；免疫仔猪后可诱导机体产生特异性免疫反应，能为攻毒仔猪提供良好的免疫保护作用。
本发明公开一种猪细小病毒毒株及其应用，属于疫苗领域。该病毒是从广东地区采集并分离得到的，经鉴定，命名为猪细小病毒PPVGD株，于2016年03月18日保藏于中国.武汉.武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：V201618。其全基因序列如SEQ ID NO：1所示。将PPVGD株制备的灭活疫苗接种豚鼠后，28d后，测HI抗体效价的几何平均为1：194；接种四月龄的猪细小病毒抗体阴性的猪，在免疫28d后，测HI，抗体效价的几何平均约为1：147。可知，本发明表明了以广东分离株PPVGD株制备的灭活疫苗接种豚鼠和后备母猪后具有良好的免疫原性，且略高于商品化的灭活疫苗。
本发明公开了一种检测鸭传染性浆膜炎的RPA‑LFD可视化试剂盒及其应用；所述试剂盒包含RPA‑LFD引物对和探针，所述引物对的上游引物、下游引物，探针序列依次如SEQ ID NO.1～3所示；其中，下游引物5’端用生物素Biotin标记；探针5’端用羧基荧光素FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且离5’端第32位碱基被四氢呋喃替代。所述试剂盒将RPA技术结合核酸试纸条技术用于检测鸭疫里氏杆菌，可以在常温等温条件下扩增、试纸条可视化检测，不需要PCR仪、荧光定量PCR仪、电泳仪、电泳槽等复杂的仪器设备，且RPA不需要复杂的样品处理，可以真正实现便携式的现场快速核酸检测。
本发明涉及病毒检测领域，尤其涉及一种检测猪流行性腹泻病毒的RPA‑LED可视化试剂盒。本发明提供了检测猪流行性腹泻病毒的重组酶聚合酶等温扩增引物组，包括序列如SEQ ID NO：1‑3所示的上游引物、下游引物和探针。还提供了检测猪流行性腹泻病毒的逆转录重组酶聚合酶等温扩增试剂，包括重组酶聚合酶、dNTPs和所述的引物组。另外提供了检测猪流行性腹泻病毒的逆转录重组酶聚合酶等温扩增试剂盒，所述试剂盒含有所述的引物组或所述的试剂。本发明检测试剂盒的特异性强，灵敏度高，且结果便于观察，不需要复杂设备，可以真正实现便携式的现场快速核酸检测猪流行性腹泻病毒。
