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[发明专利]用于鉴定多房棘球绦虫引物对、引物探针组以及他们的应用-CN201810947518.4有效
发明人：贾万忠;吴燕涛;闫鸿斌;李立;朱国强;李秀荣;李双男;姚刚;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2018-08-20 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于鉴定多房棘球绦虫引物对、引物探针组以及他们的应用。本发明提供了特异引物对，由序列2所示单链DNA分子和序列3所示单链DNA分子组成。本发明还保护引物探针组，由特异引物对和特异探针组成；特异探针自上游至下游依次由如下元件组成：区段甲、四氢呋喃和区段乙；区段甲如序列4所示，且3’末端第2位核苷酸被荧光基团修饰；区段乙如序列5所示，且5’末端第2位核苷酸被淬灭基团修饰，且3’末端进行C3 Spacer修饰。特异引物对或引物探针组可用于：鉴定多房棘球绦虫；鉴定待测样本中是否含有多房棘球绦虫。本发明提供特异引物对或引物探针组用于鉴定多房棘球绦虫，操作简便、快速、特异性强、灵敏度高。
用于鉴定多房棘球绦虫引物探针以及他们应用

[发明专利]一种基于RPA技术的石渠棘球绦虫检测试剂盒及其应用-CN201810516496.6有效
发明人：贾万忠;吴燕涛;闫鸿斌;李立;朱国强;李双男;姚刚;田文俊 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2018-05-25 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于RPA技术的石渠棘球绦虫检测试剂盒及其应用。本发明根据石渠棘球绦虫线粒体基因序列设计并筛选了一套可用于RPA检测的引物及探针组合，建立了石渠棘球绦虫特异性实时荧光RPA检测方法。该方法采用重组酶和单链结合蛋白在常温下协同实现引物与模板的特异性结合，在DNA聚合酶的作用下延伸引物生成新的DNA链。本发明的石渠棘球绦虫特异性荧光RPA检测方法操作简便、快速、特异性强，适用于现场快速检测。
一种基于 rpa 技术石渠绦虫检测试剂盒及其应用

[发明专利]细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95组成型表达载体的构建方法-CN202011050126.1在审
发明人：贾万忠;闫鸿斌;李立;郭爱民;李建秋;李文静;李文卉;李乐;张林生;张念章;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-09-29 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明提供一种细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95基因组成型表达载体，且提供含有该表达载体的毕赤酵母基因工程菌。申请人成功在毕赤酵母组成型表达系统中实现了EG95蛋白的分泌性表达，经三角瓶摇床表达的蛋白浓度达到0.5g/L，目的蛋白纯度达到90％以上。经Westernblotting试验证实，表达的重组蛋白与现有羊棘球蚴病EG95亚单位疫苗免疫阳性血清具有良好的反应原性和特异性(与其他重组蛋白抗体无反应)。本发明从构建的p‑GAPZαA‑Eg95重组质粒转化毕赤酵母SMD1168中筛选出可以高效稳定地分泌表达EG95重组蛋白的工程菌，且不需使用诱导剂，显著降低了生产周期、生产成本和生产的复杂性。
细粒棘球蚴免疫原性蛋白 eg95 组成表达载体构建方法

[发明专利]一种牛棘球蚴EG95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒-CN202010771238.X在审
发明人： 闫鸿斌;贾万忠;李立;李文卉;张念章;付宝权;李建秋;刘百林;李乐;李文静;何智宇;郭爱民 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-08-04 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明公开了一种牛棘球蚴EG95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒，包括细粒棘球绦虫重组抗原EG95蛋白预包被酶标板、血清稀释液、酶标记结合物稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标记结合物、洗涤液、底物显色液和终止液；细粒棘球绦虫重组抗原制备过程中在EG95基因采用Xho I和EcoRⅠ同时酶切PCR产物和真核表达载体pGAPZαA，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pGAPZαA‑Eg95，再将重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168菌，连续经含100μg/mL和200μg/mL Zeocin的YPD培养基筛选，然后经甘油诱导表达。本发明采用真核表达系统获得的重组蛋白EG95用于创制牛棘球蚴病抗体检测试剂盒，具有特异性强、敏感性高、重复性好、易于操作优点。
种牛棘球蚴 eg95 蛋白抗体间接 elisa 检测试剂盒

[发明专利]一种穿舱型泵浦的划线装置及使用方法-CN202010127950.6在审
发明人：梁春泉;王贤安;高峰;方弟彪;宋剑虹;闫鸿斌 -专利权人：广船国际有限公司
申请日： 2020-02-28 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： B25H7/04 文献下载
摘要：本发明公开一种穿舱型泵浦的划线装置及使用方法，穿舱型泵浦的划线装置包括对中工装轴、划线工装轴、划线工装夹和划针，对中工装轴的一端与泵轴连接，对中工装轴的另一端与划线工装轴的一端连接，划线工装夹设置在划线工装轴的另一端，划针设置在划线工装夹上，泵轴、对中工装轴及划线工装轴的轴线均在一条直线上。本发明的穿舱型泵浦的划线装置以泵轴的轴线为基准进行安装，泵轴、对中工装轴及划线工装轴的轴线均在一条直线上，使固定在划线工装夹上的划针能以泵轴轴线为旋转轴精确划圆，大大降低了划线精度和难度，提高了施工效率。
一种穿舱型泵浦划线装置使用方法

[发明专利]用于检测和区分多种以犬为终末宿主的常见大中型绦虫的检测试剂盒-CN201710013354.3有效
发明人： 闫鸿斌;李立;朱国强;娄忠子;李双男;李文卉;张念章;贾万忠;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2017-01-09 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了用于检测和区分多种以犬为终末宿主的常见大中型绦虫的检测试剂盒，包括有四对特异引物，分别为泡状带绦虫特异性引物对，多头带绦虫特异性引物对，豆状带绦虫特异性引物对，犬复孔绦虫特异性引物对。本发明的有益效果为：本发明提供的检测试剂盒，不仅能够确定被检样品是否被感染，而且能够确定感染了四种寄生虫中的具体虫种种类，其既可以用于中间宿主感染病料的检测，也可以用于终末宿主的感染检测，而且能对终末宿主可能的混合感染进行检测。经过对比验证，本发明的四对引物同时在一个PCR反应体系内使用而互不干扰，表明其具有高效性、系统性和经济简便性，适用于临床和实验室进行快速准确的病原学鉴定。
用于检测区分多种宿主常见大中型绦虫试剂盒

[发明专利]一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒-CN201711367335.7在审
发明人： 闫鸿斌;贾万忠;李立;付宝权;李文卉;张念章;吴燕涛 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2017-12-18 - 公布日： 2018-03-23 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括细粒棘球绦虫重组抗原Eg95蛋白预包被酶标板、血清稀释液、酶标记结合物稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标记结合物、洗涤液、底物显色液和终止液；细粒棘球绦虫重组抗原制备过程中在Eg95基因的前后分别连接了His标签序列和Myc标签序列，然后采用EcoR I和Xho I同时酶切PCR产物和真核表达载体pPIC9K，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pPIC9K‑(His‑Eg95‑Myc)，再将重组质粒转化到毕赤酵母GS115菌，经甲醇诱导表达，经Ni‑NTA纯化。本发明采用双标签序列和真核表达载体系统获得的羊棘球蚴病抗体检测试剂盒抗体，具有特异性强、敏感性高、重复性好、易于操作的优点。
种羊棘球蚴 eg95 蛋白抗体间接 elisa 检测试剂盒

[发明专利]一种棘球蚴体外三维培养模型及其应用-CN201510212551.9有效
发明人：贾万忠;李立;陈冰;肖志峰;戴建武;闫鸿斌;娄忠子 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所;中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2015-04-29 - 公布日： 2017-04-12 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种棘球蚴体外三维培养模型及其应用。本发明所提供的用于培养棘球蚴的模型，包括培养池和设于所述培养池内的三维胶原支架；所述三维胶原支架上负载有饲养细胞；所述饲养细胞为原代肝实质细胞和骨髓间充质干细胞；所述培养池内含有生物培养液；所述生物培养液为用于培养所述棘球蚴和所述饲养细胞的溶液。利用本发明公开的棘球蚴体外三维培养模型可以研究棘球蚴的发育过程，并且利用该模型可对三维胶原支架中的宿主细胞和寄生虫组织细胞进行免疫荧光染色观察、电镜检测及RT‑PCR分析，实现棘球蚴体外长期培养及发育相关研究，与现有的棘球蚴培养模型相比，具有显著的进步。
一种棘球蚴体外三维培养模型及其应用

[实用新型]双层实验犬笼-CN201620126341.8有效
发明人： 闫鸿斌;李立;贾万忠;李文卉;娄忠子 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2016-02-18 - 公布日： 2016-09-07 - 主分类号： A01K1/03 文献下载
摘要：本实用新型公开了双层实验犬笼，包括笼体和抽屉结构和排污管道，所述笼体底板为栅板，所述抽屉结构安装在所述笼体下方，所述抽屉结构与排污管道相连接。本实用新型双层实验犬笼，既能够使存放试验犬的空间保持清洁，又可避免试验犬的排泄物中所携带病原的传播，保证了工作人员的身体健康，且便于清洁和移动，能够存放各种体型的试验犬。
双层实验

[发明专利]靶向抑制小鼠白细胞介素17A基因的序列siRNA-288-CN201510566140.X在审
发明人：贾万忠;刘聪暖;娄忠子;闫鸿斌;李立;付宝权;李文卉;张念章 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2015-09-08 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一个靶向抑制小鼠白细胞介素17A的siRNA-288序列，siRNA-288的序列为SEQ.No.1。本发明的有益效果为：本发明提供的一个靶向抑制小鼠白细胞介素17A的siRNA-288序列，通过相关实验结果表明，其可以抑制小鼠细胞介素17A基因的表达，同时，相关实验结果提示，序列siRNA-288可用于抑制由小鼠细胞介素17A基因的表达引起的病理损伤，并能调节与之相关的细胞因子的表达，达到治愈疾病的目的。
靶向抑制小鼠白细胞 17 基因序列 sirna 288

[发明专利]靶向抑制小鼠白细胞介素17A基因的序列siRNA-180-CN201510566188.0在审
发明人：贾万忠;刘聪暖;娄忠子;闫鸿斌;李立;付宝权;李文卉;张念章 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2015-09-08 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一个靶向抑制小鼠白细胞介素17A的siRNA-180序列，siRNA-180的序列为SEQ.No.1。本发明的有益效果为：本发明提供的一个靶向抑制小鼠白细胞介素17A的siRNA-180序列，通过相关实验结果表明，其可以抑制小鼠细胞介素17A基因的表达，同时，相关实验结果提示，序列siRNA-180可用于抑制由小鼠细胞介素17A基因的表达引起的病理损伤，并能调节与之相关的细胞因子的表达，达到治愈疾病的目的。
靶向抑制小鼠白细胞 17 基因序列 sirna 180

[发明专利]靶向抑制小鼠白细胞介素17A基因的序列siRNA-136-CN201510569611.2在审
发明人：贾万忠;刘聪暖;娄忠子;闫鸿斌;李立;付宝权;李文卉;张念章 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2015-09-08 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一个靶向抑制小鼠白细胞介素17A的siRNA-136序列，siRNA-136的序列为SEQ.No.1。本发明的有益效果为：本发明提供的一个靶向抑制小鼠白细胞介素17A的siRNA-136序列，通过相关实验结果表明，其可以抑制小鼠细胞介素17A基因的表达，同时，相关实验结果提示，序列siRNA-136可用于抑制由小鼠细胞介素17A基因的表达引起的病理损伤，并能调节与之相关的细胞因子的表达，达到治愈疾病的目的。
靶向抑制小鼠白细胞 17 基因序列 sirna 136

[发明专利]一种用于诊断羊脑多头蚴病的重组蛋白-CN201510405279.6在审
发明人：李文卉;张念章;闫鸿斌;李立;岳龙;付宝权 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2015-07-13 - 公布日： 2015-12-16 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于诊断羊脑多头蚴病的重组蛋白，其氨基酸序列为SEQ ID No.1，基因序列SEQ ID No.2，其保藏号为M2015388；同时公开了合成该重组蛋白的上下游引物SEQ ID No.3和SEQ ID No.4以及合成该重组蛋白的制备方法。通过west‑blotern及ELISA检测发现该重组蛋白对羊脑多头蚴感染血清反应明显，表明这种重组蛋白对羊脑多头蚴病具有诊断价值。
一种用于诊断多头重组蛋白

[发明专利]鉴定和区分多房棘球蚴和石渠棘球蚴感染的PCR-RFLP检测试剂盒-CN201410426254.X在审
发明人：贾万忠;范彦雷;娄忠子;李立;闫鸿斌;蔡进忠;史万贵;李建秋;刘聪暖;杨玉荣;唐纳德·麦克麦纳斯 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2014-08-26 - 公布日： 2014-11-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种鉴定和区分多房棘球蚴和石渠棘球蚴感染的PCR-RFLP检测试剂盒。该试剂盒包含如SEQ ID NO.1和2所示的Em和Es通用引物、限制性内切酶EcoR Ⅰ和/或Ssp Ⅰ；还包含PCR试剂和多房棘球蚴和石渠棘球蚴DNA模板标准物。通过提取待检测样品单个包囊的DNA作为模板，再使用通用引物进行PCR扩增，PCR产物纯化后再使用EcoR Ⅰ或Ssp Ⅰ内切酶酶切，对酶切产物进行电泳即可达到鉴定和区分多房棘球蚴和石渠棘球蚴感染的目的。本发明省去了测序造成的耗时、耗钱和数据处理的繁琐过程，且不需要复杂的操作系统，可以快速、方便、经济的区分鉴定野生啮齿动物感染多房棘球蚴还是感染石渠棘球蚴。
鉴定区分多房棘球蚴石渠棘球蚴感染 pcr rflp 检测试剂盒

[发明专利]一种用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的检测试剂盒-CN201310342870.2有效
发明人：贾万忠;倪兴维;娄忠子;闫鸿斌;李宏民;李立 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2013-08-08 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开一种用于检测石渠棘球绦虫(蚴)的LAMP检测试剂盒。本发明的试剂盒内包括有SEQ ID №1、SEQ ID №2、SEQ ID №3和SEQ ID №4四条引物，或者包括由前述四条引物构成的引物反应混合物，本发明建立的LAMP方法可克服现有技术费时费力、敏感性和特异性低的缺点，能够不需要特殊的仪器设备而只需要常规的水浴锅，且不需长时间直接接触就可以实现检测，并具有高敏感性、特异性好和灵敏性高的优点，且检测反应敏感、快速，操作简单，适用于临床和实验室进行快速准确的病原学鉴定。
一种用于检测石渠绦虫试剂盒

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