本发明属于生物技术领域,具体涉及一种无抗生素四价抗病虫和除草剂植物表达载体及应用。所述载体的T-DNA区结构为:右边界-35S启动子-正向双价抗病序列-内含子-反向双价抗病序列-OCS终止子-Ubi启动子-抗虫基因-NOS终止子-NOS启动子-抗除草剂基因-NOS终止子-左边界,T-DNA区左右边界内无抗生素基因,其中正向双价抗病序列即甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒双价干扰序列,其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。得到的植物表达载体可用于转化获得同时具有4种抗性的转基因作物,并且获得的转基因作物没有抗生素抗性基因,可提高转基因作物的安全性。并且同一次转化中可获得同时具有4种抗性的转基因作物,与单一抗性的遗传转化相比,可以提高效率3倍以。
本发明提供的是一种甘蔗花青素调节基因ScRS及其应用,属于生物技术领域,调节基因ScRS序列如SEQ ID NO.1所示,根据玉米花青素转录因子RS基因序列设计引物,利用同源克隆技术,从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScRS的全长序列。甘蔗ScRS基因开放读码框长度为1722bp,编码573个氨基酸。与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中,E值等于零,说明了所克隆的基因确实为花青素有关的基因。在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点,构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS,再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织,转化的愈伤组织颜色转变为亮紫红色,进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。