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[发明专利]一种高产D-泛酸的基因工程菌、构建方法及应用-CN202310185193.1在审
发明人：柳志强;杨桧;逄爱萍;张博;周俊平;黄良刚;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2023-02-22 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法及应用。本发明提供的高产D‑泛酸的基因工程菌，通过在谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032中敲除ilvA基因以减少消耗丙酮酸生成异亮氨酸，同时过表达泛酸合成途径中3‑甲基‑2‑氧桥丁酸羟甲基转移酶基因panB和泛酸合成酶基因panC并异源过表达来自大肠杆菌的泛酸还原酶panE使得谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032中的D‑泛酸产量进一步提高。
一种高产泛酸基因工程构建方法应用

[发明专利]一种恶臭假单胞菌自杀载体的构建方法及其应用-CN202310156721.0在审
发明人：柳志强;王云;逄爱萍;张博;黄良刚;周俊平;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2023-02-23 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N15/78 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种恶臭假单胞菌自杀载体的构建方法及其应用。本发明提供的恶臭假单胞菌自杀载体的构建方法以pK18mobsacB载体为模板，扩增得到载体骨架，然后将以恶臭假单胞菌KT2440菌液为模板扩增得到强启动子Prib、待敲除基因x的上、下游同源臂连接于载体骨架上得到恶臭假单胞菌自杀载体。强启动子Prib可以使sacB蔗糖酶在恶臭假单胞菌中的表达量增多，增强蔗糖致死效应。将得到的恶臭假单胞菌自杀载体导入恶臭假单胞菌中后，即可以通过卡那霉素正向筛选和蔗糖负向筛选，高效准确地获得待敲除靶基因缺失的菌株。
一种恶臭假单胞菌自杀载体构建方法及其应用

[发明专利]一种丝状真菌的荧光融合蛋白原位表达的基因方法及其应用-CN202210539479.0在审
发明人：林凤鸣;逄爱萍;张茯宁 -专利权人：东南大学
申请日： 2022-05-18 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种丝状真菌的荧光融合蛋白原位表达的基因方法及其应用。属于分子生物学和生物技术领域；具体步骤：1、荧光蛋白载体构建；2、荧光融合蛋白原位表达质粒的构建；3、真菌转化构建重组菌株；并且叙述了本发明在真菌蛋白检测(荧光融合蛋白共聚焦成像和荧光融合蛋白定量分析)中的应用。本发明通过农杆菌介导的同源重组基因操作手段在真菌目的基因3’端原位连接一个荧光蛋白基因，使目的基因和荧光蛋白基因以融合蛋白(目的蛋白‑荧光蛋白)的形式共表达；通过荧光观察分析目的蛋白亚细胞定位和量化其表达量；本发明中公开的真菌荧光融合蛋白原位表达基因技术，减少了随机插入的不确定性，提高了实验结果的精准性。
一种丝状真菌荧光融合蛋白原位表达基因方法及其应用

[发明专利]一种促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备方法-CN201811220401.2在审
发明人：葛丽芹;任姣雨;李敏俐;陆祖宏;逄爱萍 -专利权人：东南大学
申请日： 2018-10-19 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C08L5/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备方法，首先将双醛淀粉溶液滴入培养板中,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗多次,再将壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液滴入培养板中,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗多次,得到单层所述促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜；反复多次重复步骤一和步骤二组装双醛淀粉,壳聚糖和绿藻生长因子，利用层层自组装法逐层将双醛淀粉溶液、壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液沉积到培养板中，得到多层所述促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜。因此通过层层自组装方法制备的薄膜具有自修复性能和促进细胞粘附作用。本发明方法简单有效，操作简便，且所需时间较短。
薄膜细胞粘附自修复珊瑚绿藻生长双醛淀粉壳聚糖培养板制备混合溶液超纯水吸出清洗层层自组装法细胞粘附作用层层自组装自修复性能多次重复溶液滴单层滴入多层沉积组装

[发明专利]提高林可霉素A组份和减少林可霉素B组份的重组工程菌及应用-CN201510400668.X有效
发明人：赵广荣;逄爱萍 -专利权人：天津大学
申请日： 2015-07-09 - 公布日： 2018-09-28 - 主分类号： C12N15/76 文献下载
摘要：本发明公开了提高林可霉素A组份和减少林可霉素B组份的重组工程菌及应用,重组工程菌用下述方法构建：(1)以林可链霉菌基因组为模板，以SEQ ID No.1所示序列为上游引物，以SEQ ID No.2所示序列为下游引物，克隆lmbW基因；(2)将lmbW基因以酶切连接的方式，连接到pUWL201apr载体上，构建pAP04载体；(3)将pAP04载体转化到林可链霉菌，筛选，获得提高林可霉素A组份和减少林可霉素B组份的重组工程菌。本发明重组菌不仅使林可霉素A组份发酵效价高，而且林可霉素B组份下降。有利于简化下游分离纯化过程，降低生产成本、节能、减排，提高经济效益。
提高林可霉素减少重组工程应用