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[发明专利]一种生产L-岩藻糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用-CN202310277625.1在审
发明人：孙俊松;伏聪;谢雨康;史吉平 -专利权人：中国科学院上海高等研究院
申请日： 2023-03-21 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种生产L‑岩藻糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用，包括重组枯草芽孢杆菌BS164GF‑pW、BS164FU；BS164GF‑pW通过克隆GDP‑D‑甘露糖水解酶基因构建载体pMK4‑T7‑WcaH转化重组枯草芽孢杆菌BS164GF获得，BS164FU通过在BS164GF上整合GDP‑D‑甘露糖水解酶基因获得；所述BS164GF通过在枯草芽孢杆菌基因组上依次整合comk基因、T7RNA聚合酶基因、T7‑manA‑manB‑manC基因、T7‑gmd‑wcaG基因获得。本发明通过构建重组枯草芽孢杆菌首次以GDP‑L‑岩藻糖为底物实现了L‑岩藻糖的从头合成，相比传统酸解法更加环保。
一种生产岩藻糖重组枯草芽孢杆菌及其构建方法应用

[发明专利]一种改造的大肠杆菌工程菌及其生产柠苹酸的方法-CN202210412291.X有效
发明人：孙俊松;陈艾;谢雨康;史吉平 -专利权人：中国科学院上海高等研究院
申请日： 2022-04-19 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种改造的大肠杆菌工程菌及其生产柠苹酸的方法。以埃希氏菌属大肠杆菌种Escherichia coli S17‑3为出发菌株，在其基因组中插入识别T7启动子的T7RNA聚合酶基因，得到所述改造的大肠杆菌工程菌。所述改造的大肠杆菌工程菌进一步高表达柠苹酸合酶基因，以及失活辅助响应因子RcsA、响应调控因子RcsB、跨膜传感激酶RcsC、磷酸转运蛋白RcsD、外膜脂蛋白RcsF其中一种或多种功能蛋白。本发明提供一种新型的工业大肠杆菌及发酵培养方法，该菌株易于培养，可利用廉价碳源高效生物合成柠苹酸，且生产效率高于目前的生物合成方法。
一种改造大肠杆菌工程及其生产柠苹酸方法

[发明专利]生产3-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用-CN202011223864.1有效
发明人：孙俊松;纪明华;谢雨康;陈艾;史吉平 -专利权人：中国科学院上海高等研究院
申请日： 2020-11-05 - 公布日： 2022-11-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产3‑岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用。所述重组枯草芽孢杆菌为重组枯草芽孢杆菌1643FL、1643FL‑fcoA2、1643FL‑fcoA1；所述重组枯草芽孢杆菌1643FL通过在枯草芽孢杆菌的manA位点整合编码甘露糖6‑磷酸异构酶、磷酸甘露糖变位酶、甘露糖‑1‑磷酸鸟苷基转移酶的融合基因片段，以及在xylA‑xylB位点整合编码GDP‑甘露糖脱水酶、GDP‑L‑岩藻糖合成酶、α‑1,3岩藻糖基转移酶的融合基因片段获得；所述重组枯草芽孢杆菌1643FL‑fcoA2通过在重组枯草芽孢杆菌1643FL的fcoA2位点整合编码乳糖渗透酶的基因片段获得；所述重组枯草芽孢杆菌1643FL‑fcoA1通过在重组枯草芽孢杆菌1643FL的fcoA1位点整合编码乳糖渗透酶的基因片段获得。本发明的重组枯草芽孢杆菌能够利用比较廉价的碳源高产量生产3‑岩藻糖基乳糖。
生产岩藻糖基乳糖重组枯草芽孢杆菌及其构建方法应用

[发明专利]一种利用大肠杆菌生产2’-岩藻糖基乳糖的方法-CN202010084247.1有效
发明人：孙俊松;陈桥;史吉平;谢雨康 -专利权人：中国科学院上海高等研究院
申请日： 2020-02-10 - 公布日： 2022-11-15 - 主分类号： C12P19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种埃希氏菌属大肠杆菌种Escherichia coli S17‑3用于生产2’‑岩藻糖基乳糖的用途，所述埃希氏菌属大肠杆菌种Escherichia coli S17‑3的保藏号为CCTCC 2018200。本发明利用高产可拉酸的大肠杆菌菌种Escherichia coli S17‑3以乳糖作为唯一底物从头合成2’‑岩藻糖基乳糖，没有外源表达GDP‑L‑岩藻糖的合成途径。本发明生产2’‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌的发酵方法，将其发酵产量提高了10倍以上，最高产量达到617.0mg/L，产量大大提高。
一种利用大肠杆菌生产岩藻糖基乳糖方法

[发明专利]生产2’-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用-CN202011061807.8有效
发明人：孙俊松;纪明华;刘云辉;谢雨康;史吉平 -专利权人：中国科学院上海高等研究院
申请日： 2020-09-30 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产2’‑岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用。所述重组枯草芽孢杆菌为重组枯草芽孢杆菌164FL、164FL‑fcoA2、164FL‑fcoA1；所述重组枯草芽孢杆菌164FL通过在枯草芽孢杆菌的manA位点整合编码甘露糖6‑磷酸异构酶、磷酸甘露糖变位酶、甘露糖‑1‑磷酸鸟苷基转移酶的融合基因片段，以及在xylA‑xylB位点整合编码GDP‑甘露糖脱水酶、GDP‑L‑岩藻糖合成酶、α‑1,2岩藻糖基转移酶的融合基因片段获得；所述重组枯草芽孢杆菌164FL‑fcoA2通过在重组枯草芽孢杆菌164FL的fcoA2位点整合编码乳糖渗透酶的基因片段获得；所述重组枯草芽孢杆菌164FL‑fcoA1通过在重组枯草芽孢杆菌164FL的fcoA1位点整合编码乳糖渗透酶的基因片段获得。本发明的重组枯草芽孢杆菌能够利用比较廉价的碳源高产量生产2’‑FL。
生产岩藻糖基乳糖重组枯草芽孢杆菌及其构建方法应用