一种重组嗜热中性蛋白酶及其在降解蛋白质中的应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种可在枯草芽孢杆菌宿主分泌表达的重组嗜热中性蛋白酶，其包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶，及如SEQ ID No.2所示的不带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶。本发明所述的嗜热中性蛋白酶以带有前肽序列形式在枯草芽孢杆菌中分泌表达，实验结果表明具有较高的酶活力，可降解豆粕得到高抗氧化活性的小分子多肽，且在多种洗涤剂中能够稳定发挥酶活力，能够很好地降解血红蛋白，去除血渍。
一种近红外驱动嗜热酶催化型抗肿瘤靶向纳米制剂，属于肿瘤治疗技术领域。本发明通过构建嗜热精氨酸酶和嗜热天冬酰胺酶(核苷酸序列分别如SEQ IDNo.1、SEQ ID No.2所示)与金纳米棒和透明质酸共价耦合的纳米复合物，利用纳米金的光热效应，实现近红外激光激发的局域能量传递而激活嗜热酶活性，催化肿瘤细胞内部精氨酸/天冬酰胺的水解，产生“氨基酸饥饿”状态，协同饥饿疗法与光热治疗，提升肿瘤杀伤能力。最终结果显示该纳米体系具备靶向CD44高表达的乳腺癌细胞系MCF‑7的优异的细胞摄取能力以及抑制肿瘤细胞增殖、迁移、浸润能力，在裸鼠皮下移植瘤模型中显示出显著的抑瘤能力。
嗜热酶及一锅法高效合成UDP‑葡萄糖和UDP‑葡萄糖醛酸的方法，属于生物工程及生物合成技术领域。本发明使用热稳定性更好的嗜热酶(核苷酸序列分别如SEQ ID No.1～5所示)代替常温酶催化UDP‑Glc的合成反应，并将一锅法反应体系拆分为几个分步反应，对每步反应的条件进行系统优化，最终整合各步反应最适条件的基础上设计一锅法反应条件，以达到高效合成UDP‑Glc和UDP‑GlcUA的目的。与全细胞催化相比，UDP‑Glc终产量提高了约14倍(Leloir途径)和3.5倍(非Leloir途径)。反应合成的UDP‑Glc作为底物进一步合成了药用价值更高的UDP‑葡萄糖醛酸(UDP‑GlcUA)。
本发明公开了一种表达重组人神经生长因子的基因、重组表达载体及含有上述基因的工程菌和重组人神经生长因子的制备方法。针对人神经生长因子的蛋白质结构及原核和真核表达系统，通过密码子优化，获得重组人神经生长因子的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，并将所述表达重组人神经生长因子的基因可操作地插入质粒表达载体构建适于在大肠杆菌和酵母体系中表达的重组表达载体。本发明的重组表达系统可高效表达重组人神经生长因子，具有天然蛋白结构和天然活性。
