本发明提供了一种核酸分子和相应的载体、稳定共表达GFP‑Flag‑FXR的细胞及制备方法,所述核酸分子包含表达FXR蛋白的FXR序列和/或相应的互补序列、表达Flag标签的Flag序列和/或相应的互补序列、表达GFP标签的GFP序列和/或相应的互补序列;所述FXR蛋白的氨基酸序列示于SEQ ID NO:1,所述Flag标签的氨基酸序列示于SEQ ID NO:2,所述GFP标签的氨基酸序列示于SEQ ID NO:3。该核酸分子能够同时表达GFP标签、Flag标签和FXR蛋白。以GFP为标签,可以在转染过程中实时观察FXR的转染效率,提高了操作效率;小分子的Flag标签,在不改变FXR基本结构的前提下,使其能够用于IP、ChIP等对于蛋白分子构象要求较高的基础研究,能够拓展研究范围。
本发明属于组织分离技术领域,具体公开了一种用于分离猪肠道隐窝的分离液及其分离方法,该分离液包括以下浓度各组分5.0~10.0mM HEPES;5.0~30.0 mM Na2EDTA‑2H2O;0.50~1.0 mM DTT;0.25~0.50 mM BSA;2.5~3.0 mM 葡萄糖;0.5~2.5 mM谷氨酰胺;0.50~1.0 mM DL‑β‑羟丁酸钠;2~10 mM Y‑27632;1.5~2.7 mM KCl;1.0~1.5 mM KH2PO4;130~138 mM NaCl;5~8 mM Na2HPO4‑7H2O;在低温条件下仔猪小肠通过上述分离液和HBSS的配合获得结构完整、活性和纯度都较高的猪肠道隐窝。