本发明涉及一种耐热性提高的乙醇脱氢酶ADH10C1及其编码基因和应用。乙醇脱氢酶ADH10C1是由鲁氏接合酵母CBS732乙醇脱氢酶ADH10序列SEQ ID NO.2突变获得，其突变位点是G201C，G207C，P52C和E56C。该突变体在70℃高温下保持5min仍维持80％酶活，而ADH10在60℃下5min仅能维持60％的酶活；该突变体最适pH为8.5，在pH7.5‑10.5都有较高的酶活性，pH稳定性好；该突变体具有良好的热稳定性和蛋白酶抗性。本发明扩大了乙醇脱氢酶基因的资源，也为乙醇代谢过程中乙醇转化为乙醛提供了优良的乙醇脱氢酶，在制作解酒饮品方面具有潜在的应用价值。
本发明属于蛋白质工程领域，为了克服现有塑料降解酶降解效率低，热稳定性差等缺点。本发明提供了一种耐高温塑料降解酶突变体及其编码基因与应用，所述突变体与野生型塑料降解酶SEQ ID NO:1的氨基酸序列相比，其包含以下位点的氨基酸取代：第233位、第282位、第122位、第186位、第280位和第207位。本发明还提供了该突变体的编码基因，核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。该突变体具有较佳的稳定性，pH稳定性好，热稳定性尤佳。最适温度为60℃，解链温度高达86.5℃，经75℃处理2h后仍能够保持90％以上的酶活力；降解效率高，降解效率较野生型提高了3.5倍。该突变体的耐高温特性，使其满足了工业生产的高温环境的需求。
本发明涉及蛋白质工程技术领域，提供了一种塑料降解酶突变体、含其的融合蛋白及其应用，所述突变体与氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的野生型塑料降解酶相比，包含以下位点的氨基酸取代：第122位、第186位和第241位；融合蛋白包括所述突变体以及李氏木霉碳水化合物结合结构域。本发明的突变体及含其的融合蛋白，性能优良，显著增强了与底物结合能力，具有高效的塑料降解能力；稳定性好，在不同的条件下均能保持相当的活性，其可适应20‑70℃和pH＝3‑11的条件，最适pH为中性，最适温度为50℃。
本发明提供了一种耐热性提高的酸性蛋白酶PepAm4及其编码基因。蛋白酶PepAm4是由黑曲霉的蛋白酶pepA序列SEQ ID NO.2突变获得，其突变位点是G52C，G142C，Y223C和A371C。与PepA相比，PepAm4的耐热性提高10℃，在75℃高温下保持5min仍维持80％酶活，而PepA在75℃下5min仅能维持20％的酶活；PepAm4的最适pH为3.0，在pH2.0‑7.0都有较高的酶活性，pH稳定性好；PepAm4还具有良好的热稳定性及抗胃蛋白酶和胰蛋白酶的能力，开发前景良好，可广泛应用于饲料、食品、能源化工等行业。
本发明提供一种甘露聚糖酶，其氨基酸序列包括SEQ ID NO.1。本发明的甘露聚糖酶最适pH为6.0，在pH3.5‑7.0都有较高的酶活性；pH稳定性好；具有良好的抗蛋白酶的能力。其热稳定性高的特性，可使其在需求高温环境的工业生产上应用。本甘露聚糖酶可应用于饲料工业，降低或消除因粘度增加而引起的抗营养作用。此外，也可用作果汁饮料的澄清剂。还可与木聚糖酶协同作用破坏半纤维素与木质素之间的键结，减少漂白剂及氯的用量，进而保护环境，因而显示出巨大的潜力。
本发明提供了一种α‑淀粉酶，其氨基酸序列包括SEQ ID NO.1或与SEQ ID NO.1具有63％以上同一性的序列。本发明提供的α‑淀粉酶是一种耐高温酸性α‑淀粉酶，具有较好的pH稳定性和热稳定性。除可作用于可溶性淀粉外，对于土豆淀粉、红薯淀粉有一定的降解作用。该酶在玉米淀粉深加工、酒精生产、氨基酸和有机酸发酵和饲料行业具有非常广阔的应用前景。
