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[发明专利]基于ES-DMA-CPC颗粒计数的蛋白质定量方法-CN202211537689.2有效
发明人：米薇;戴新华;胡志上;张馨艺 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2022-12-01 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： G01N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC颗粒计数的蛋白质定量方法，包括以下步骤：(1)校准因子的测定；(2)已知校准因子的蛋白样品的定量：按照步骤(1)由蛋白标准物质得到该类蛋白质的校准因子，对该类已知校准因子的蛋白样品进行定量时，将蛋白样品通过ES‑DMA‑CPC进行分析，获得检测到的粒子总数CCPC，根据校准因子，计算得到待测蛋白质样品的浓度；(3)未知校准因子的蛋白质样品的定量方法。本发明方法不会受到免疫反应中蛋白活性和标记效率等因素的影响；采用本发明方法可直接测定溶液中的蛋白含量，无需将其进行酶切等前处理。
基于 es dma cpc 颗粒计数蛋白质定量方法

[发明专利]生物分子光学检测器计量标准装置及使用方法-CN201710499261.6有效
发明人：武利庆;王晶;盛灵慧;米薇;杨彬;高运华;金有训;王志栋 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2017-06-27 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物分子光学检测器计量标准装置及使用方法，包括计算机、数据传输单元、单片机、光源模组。光源模组根据不同的校准仪器而设计相应的外形；光源模组的四角位置、中心位置、四边的中间位置均装有发光单元。本发明装置可以实现线性和重复性计量特性指标的校准。本发明的计量标准装置可以实现原位多波长条件下线性和重复性的校准，改变波长、发光强度时无需移动计量标准器，保证了重复性指标计量的可靠性。
生物分子光学检测器计量标准装置使用方法

[发明专利]一种基于特征性肽段同位素稀释质谱法的胰岛素定量方法-CN202211319268.2在审
发明人：米薇;何日梅;孙瑞雪 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2022-10-26 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于特征性肽段同位素稀释质谱法的胰岛素定量方法，包括以下步骤：特征肽段选择；合成用于胰岛素定量的标记肽段；特征肽段纯度的测定；特征肽段质谱分析离子对的确定；液相分离及质谱条件优化；样本分析前处理；肽标准曲线制备；检出限和定量限测量、回收率和精密度测量；计算胰岛素样品中特征肽段含量，特征肽段含量乘以系数即得胰岛素浓度。本发明方法可用于定量不同来源的胰岛素和胰岛素类似物，包括猪胰岛素、牛胰岛素、人胰岛素及其他具有GFFYTPK特征性肽段的胰岛素类似物。本发明的定量方法无需进行高温水解，安全性较高。
一种基于特征性肽段同位素稀释质谱法胰岛素定量方法

[发明专利]新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白的制备和定值方法-CN202210245575.4有效
发明人：武利庆;戴新华;米薇;刘亚辉;彭涛;谢洁 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2022-03-09 - 公布日： 2023-01-03 - 主分类号： C07K14/165 文献下载
摘要：本发明的新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质制备及定值的方法，它包括：新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白原料的纯化与稀释；新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质候选物溶液的均匀性初检与分装；对分装单元中的新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质候选物溶液理化性质的表征；对分装单元中的新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质的均匀性和稳定性检验；新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质中N蛋白含量标准值的测定，新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质标准值的确定和统计检验；新型冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白标准物质标准值定值结果的不确定度评定。
新型冠状病毒核衣壳蛋白制备方法

[发明专利]基于DNA四面体的磁性固定化酶反应器、制备及应用-CN202211152952.6在审
发明人：翟睿;方向;樊小雪;楚占营;朱曼曼;赵洋;米薇;龚晓云;江游;武利庆;戴新华;俞晓平 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2022-09-21 - 公布日： 2022-12-23 - 主分类号： C12N11/02 文献下载
摘要：本发明涉及功能化磁性纳米材技术领域，提供了一种基于DNA四面体的磁性固定化酶反应器、制备及应用，所述反应器制备方法包括：制备磁性氧化石墨烯，将金纳米颗粒固载在磁性氧化石墨烯上；利用自组装反应合成顶点含有巯基的DNA四面体；利用Au、S之间的共价结合将DNA四面体修饰在金纳米颗粒上；最后将胰蛋白酶固载在DNA四面体上，得到固定化酶反应器。本发明固定化酶反应器具有较大的比表面积，可有效提高胰蛋白酶的固载量；磁性基质便于将固定化酶反应器快速分离回收，实现酶的回收及反复利用；通过控制DNA四面体的尺寸有效控制酶之间的间距，有效避免由于酶的自消化引起的酶活性损失，提高固定化酶的重复使用寿命和酶解效率。
基于 dna 四面体磁性固定反应器制备应用

[发明专利]用于富集外泌体的DNA四面体复合磁性纳米材料及制备-CN202111554661.5在审
发明人：翟睿;宋雨蒙;楚占营;朱曼曼;樊小雪;李晶晶;米薇;江游;武利庆;叶子弘;戴新华;方向 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2021-12-17 - 公布日： 2022-05-10 - 主分类号： G01N1/40 文献下载
摘要：本发明涉及复合磁性纳米材料及外泌体富集技术领域，提供了一种用于富集外泌体的DNA四面体复合磁性纳米材料及制备，在制备四氧化三铁磁核的表面，通过沉淀聚合法修饰带有活性反应基团的聚合物；然后通过共价键将DNA四面体稳定地固载在磁球表面，最后利用DNA四面体的磷酸基团的螯合作用固载金属离子。该材料可通过金属离子与外泌体磷脂双分子层的特异性相互作用，实现对外泌体的分离富集。本发明首次以DNA四面体中的磷酸基团为作用位点固载金属离子，利用DNA四面体特殊的刚性骨架及空间特性，可以有效地提高对外泌体的富集效率。使用该材料富集外泌体的操作过程便捷、快速，并且避免了离心操作造成的样品损失。
用于富集外泌体 dna 四面体复合磁性纳米材料制备

[发明专利]人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法-CN202110259059.2有效
发明人：米薇;戴新华;胡志上;彭涛;谢洁;翟睿;方向;欧阳艳艳 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2021-03-10 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种人源化IgG单克隆抗体标准物质及制备方法，该方法包括如下步骤：针对病毒抗原进行噬菌体抗体库筛选，获得达到亲和力阈值需求的IgG原型抗体；对筛选得到的异源抗体进行人源化改造获得人源化IgG单克隆抗体；对筛选得到的人源抗体进行框架优化；需要时后续还可对获得的人源化IgG单克隆抗体进行体外亲和力成熟；表达、纯化以获得人源化IgG单克隆抗体标准物质原料；对人源化IgG单克隆抗体标准物质原料进行纯度表征，蛋白质活性表征和结构表征；在纯度充分表征和结构确证与目标抗体序列一致的基础上，经均匀性、稳定性检验，采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法对单克隆抗体标准物质进行定值。
人源化 igg 单克隆抗体标准物质制备方法

[发明专利]人源化IgM单克隆抗体标准物质及制备方法-CN202110259295.4有效
发明人：米薇;戴新华;胡志上;王越珉;翟睿;方向;欧阳艳艳 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2021-03-10 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C07K16/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种人源化IgM单克隆抗体标准物质及制备方法，该方法包括如下步骤：针对病毒抗原进行噬菌体抗体库筛选，获得达到亲和力阈值需求的IgG原型抗体；原型IgG抗体亲和力成熟后，将优化后的抗体重链可变区嫁接到人源IgM抗体的恒定区上组成嵌合体重链，Kappa轻链可不变。表达、纯化以获得人源化IgM单克隆抗体标准物质原料；对人源化IgM单克隆抗体标准物质原料进行纯度表征，蛋白质活性表征和结构表征；在纯度充分表征和结构确证与目标抗体序列一致的基础上，经均匀性、稳定性检验，采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法对人源化IgM单克隆抗体标准物质进行定值。
人源化 igm 单克隆抗体标准物质制备方法

[发明专利]一种基于肽段同位素稀释质谱法的IgG抗体定值方法-CN202110390063.2有效
发明人：米薇;戴新华;胡志上;王越珉;游吴凯 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2021-04-12 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于肽段同位素稀释质谱法的IgG抗体定值方法，包括如下步骤：特征肽段选择：根据人源IgG抗体恒定区的氨基酸序列，确定ALPAPIEK，GPSVFPLAPSSK，DSTYSLSSTLTLSK三条人源IgG恒定区肽段为定值的特征肽段；特征肽段纯度的准确测定；特征肽段质谱参数的优化：包括特征肽段质谱分析离子对的确定，定量离子对的各质谱参数的优化；特征肽段线性范围的确定；人源IgG抗体蛋白样本分析前处理，主要步骤有：酶切条件优化、人源IgG抗体蛋白酶切、浓缩样品；样品酶切溶液质谱分析后，根据公式计算人源IgG抗体蛋白样品中特征肽段含量，根据人源IgG抗体蛋白和特征肽段的分子量计算溶液中人源IgG抗体蛋白的浓度作为标准物质的定值结果。
一种基于同位素稀释质谱法 igg 抗体方法

[发明专利]基于ES-DMA-CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法-CN201911225128.7有效
发明人：米薇;胡志上;刘洋;武利庆;王晶 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2019-12-04 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： G01N15/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于ES‑DMA‑CPC的高准确度蛋白质标准物质定值方法，包括如下步骤：1)准备待测目标蛋白；2)待测蛋白样品用乙酸铵缓冲液稀释；3)配制蔗糖溶液，样品通过进样泵注入电喷雾气溶胶发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率纳米柱；使用蔗糖溶液进行液滴尺寸计算；4)将蛋白样品分别通过进样泵注入电喷雾气溶胶颗粒发生器中，通过25μm内径的毛细管产生雾化的高电荷液滴，液滴蒸发干燥后，带电粒子通过差分电迁移率分析，由粒子计数器获得蛋白样品的粒径分布；5)线性回归拟合获得单体Cp1和二聚体Cp2的绝对数浓度，然后确定三聚体浓度Cp3；求和来确定待测目标蛋白质样品的原始浓度。
基于 es dma cpc 准确度蛋白质标准物质方法

[发明专利]全自动生化分析仪线性范围标准物质及其制备方法和应用-CN202110485628.5在审
发明人：米薇;何日梅;武利庆;张宁 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2021-04-30 - 公布日： 2021-07-27 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明提供了一种全自动生化分析仪线性范围标准物质的制备方法，包括以下步骤：(一)标准物质候选物的制备：(1)原料筛选，以Orange G为原料，(2)配制分装：配制吸光度范围在3～3.5的Orange G原液，稀释，获得候选标准物质；(二)标准物质的确定分析方法：对候选标准物质进行均匀性检验、稳定性检验、定值确定和不确定度分析，若均匀性检验、稳定性检验、不确定度分析均满足要求，则制得全自动生化分析仪线性范围标准物质。本发明为生化分析仪线性误差的校准、检测提供标准物质，保证生化分析仪线性误差测试数据的准确可靠，填补了全自动生化分析仪线性标准物质的空白。本发明还提供了一种全自动生化分析仪线性标准物质及其应用。
全自动生化分析线性范围标准物质及其制备方法应用

[发明专利]流式聚集体杂质分析仪-CN202010413815.8有效
发明人：胡志上;李红梅;米薇 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2020-05-15 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： G01N15/06 文献下载
摘要：本发明涉及药品中聚集体颗粒浓度检测领域，具体涉及一种流式聚集体杂质分析仪。该分析仪包括液流系统(1)、光路系统(2)以及分析控制系统(3)；其中，所述光路系统(2)包括激光器(21)、FSC检测通道(22)和SSC检测通道(23)；其中，所述FSC检测通道(22)能够分别提供405‑435V和175‑205V的检测电压；所述SSC检测通道(23)能够分别提供290‑310V和120‑140V的检测电压，并且能够提供600‑1200的阈值。采用本发明的分析仪能够同时对样品中1微米以下和200纳米以上的可溶性聚集体颗粒以及1微米以上的不溶性聚集体颗粒进行高灵敏度、高分辨率和精准定量地检测。
聚集体杂质分析

[发明专利]定性和定量测量数据的计量学处理方法-CN201710756227.2有效
发明人：武利庆;罗一;米薇;盛灵慧;金有训;高运华;王志栋;杨彬;王晶 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2017-08-29 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： G06F17/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种定性和定量测量数据的计量学处理方法，包括测量装置、控制装置和存储器，包括如下处理步骤：测量仪器对被测物进行测量，采集被测数据；将测量数据保存在第一存储器中；确定测量结果的置信范围，将测量结果的置信范围保存在第二存储器中；测量结果符合性的判定；将从第一存储器依次提取单次测量结果xi,与第二存储器中提取测量结果的置信区间X进行比对，将判定结果保存在第三存储器中。本发明定性和定量测量数据的计量学处理方法，实现了采用数学体系对定性测量结果的表示，使得定性测量后续的评定结论完全依赖数学体系的运算进行描述，实现在指定概率下定性和定量结果置信范围的计算与表示。
定性定量测量数据计量学处理方法

[发明专利]检测样品中聚集体颗粒在目标粒径下浓度的非标记方法-CN202010414964.6有效
发明人：胡志上;李红梅;米薇 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2020-05-15 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： G01N15/06 文献下载
摘要：本发明涉及药品中聚集体颗粒浓度检测领域，具体涉及一种检测样品中聚集体颗粒在目标粒径下浓度的非标记方法。该方法包括：在流式细胞仪上分别采用FSC和SSC通道检测所述样品在激发的前向散射光和侧向散射光，其中，目标粒径为0.1‑1μm区间，FSC检测电压405‑435V，SSC检测电压290‑310V，SSC阈值600‑1200；目标粒径为1μm以上区间，FSC检测电压175‑205V，SSC检测电压120‑140V，SSC阈值600‑1200。采用本发明的方法能够同时对样品中1微米以下和200纳米以上的可溶性聚集体颗粒以及1微米以上的不溶性聚集体颗粒进行高灵敏度、高分辨率和精准定量地检测。
检测样品聚集体颗粒目标粒径浓度标记方法

[发明专利]一种基于吸光度的高准确度核酸浓度测定方法-CN201710546327.2有效
发明人：武利庆;高运华;郑康乐;罗一;杨彬;金有训;米薇;盛灵慧;王志栋 -专利权人：中国计量科学研究院
申请日： 2017-07-06 - 公布日： 2019-08-13 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于吸光度的高准确度核酸测定方法，包括如下步骤：(1)准备核酸标准物质和核酸样品以及对应的空白缓冲溶液。(2)用空白缓冲溶液将核酸标准物质进行梯度稀释，分别测定稀释后的各个浓度水平标准物质以及待测样品的吸光度。计算出样品的初测浓度c₀。(3)根据初测浓度用核酸标准物质配制K₁c₀和K₂c₀的一对标准采用括号法对核酸样品浓度进一步测定。根据配制过程，计算出这一对标准品各自的标准不确定度u₁和u₂，并进一步计算出测定结果的合成标准不确定度u_c。(4)通过求解非线性规划使不确定度最小从而得到K₁和K₂的具体值。(5)根据计算出的K₁和K₂的值，配制出高标和低标，并采用括号法对样品进行测定，得到样品的准确结果c。
一种基于光度准确度核酸浓度测定方法

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